一种固定化细胞高效生产氨基丁酸的方法技术

技术编号:41643650 阅读:40 留言:0更新日期:2024-06-13 02:36
本发明专利技术公开了一种固定化细胞高效生产氨基丁酸的方法,属于绿色生物制造领域。该方法为:在制备固定化高产氨基丁酸的希氏乳杆菌菌悬液的过程中添加四氢嘧啶。包括以下步骤:(1)将希氏乳杆菌发酵液离心,得菌体,向菌体加入灭菌生理盐水,得洗涤后的菌体;(2)将洗涤后的菌体加入含有四氢嘧啶和磷酸吡哆醛的灭菌生理盐水,制得菌悬液;(3)将海藻酸钠用水溶解,高温灭菌后冷却保温,得海藻酸钠溶液;(4)向海藻酸钠溶液中加入菌悬液,得混合液;(5)将混合液滴入CaCl2溶液中,静置后过滤,用无菌水洗涤,得固定化细胞。本发明专利技术方法制备的固定化细胞稳定性好,重复利用率高,连续使用20次以上活性仍为原来的95%以上。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种固定化细胞高效生产氨基丁酸的方法,属于绿色生物制造领域。


技术介绍

1、固定化发酵结合了固态发酵菌体密度高、液态发酵可控性强的优点,用物理或化学的方法将细胞固载于一定的结构域内,将整个固定化体系放置于液体环境中进行发酵,并实现细胞的回收再利用。固定化细胞具有保护细胞免受损伤、细胞重复利用等优点,但细胞在固定化过程中容易自溶、活性不稳定,最终导致产品纯度不高,产品品质不好。

2、四氢嘧啶,又叫1,4,5,6-四氢-2-甲基-4-嘧啶羧酸,是耐盐微生物为维持渗透压平衡而在细胞内产生的一种相容性溶质。四氢嘧啶在高渗透压、高温、低温、干燥、强酸碱和辐射等逆境条件下对蛋白、核酸、生物膜及细胞都有很好的保护作用,可用作生物大分子的稳定保护剂。

3、中国专利cn 101838672 b公开了固定化植物乳杆菌生产γ-氨基丁酸的方法,该方法制备的固定化细胞酶活力强,转化过程简单,转化液中无复杂成分,简化了gaba的分离纯化过程。但该方法制备的固定化细胞稳定性不好,利用l-glu转化为gaba,重复反应十个批次后,gaba的产率仅能达本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种固定化细胞高效生产氨基丁酸的方法,其特征在于:该方法为:在制备固定化高产氨基丁酸的希氏乳杆菌菌悬液的过程中添加四氢嘧啶。

2.根据权利要求1所述的固定化细胞高效生产氨基丁酸的方法,其特征在于:按质量计,四氢嘧啶的加入量为希氏乳杆菌菌悬液的0.1-1%,其中四氢嘧啶的最佳加入量为希氏乳杆菌菌悬液的0.45%。

3.根据权利要求1所述的固定化细胞高效生产氨基丁酸的方法,其特征在于:将希氏乳杆菌菌体加入含有四氢嘧啶和磷酸吡哆醛的生理盐水中,混匀后孵育10-60min,其中最佳孵育时间为25min。

4.根据权利要求1-3任一所述的固定化细胞高效生产氨...

【技术特征摘要】

1.一种固定化细胞高效生产氨基丁酸的方法,其特征在于:该方法为:在制备固定化高产氨基丁酸的希氏乳杆菌菌悬液的过程中添加四氢嘧啶。

2.根据权利要求1所述的固定化细胞高效生产氨基丁酸的方法,其特征在于:按质量计,四氢嘧啶的加入量为希氏乳杆菌菌悬液的0.1-1%,其中四氢嘧啶的最佳加入量为希氏乳杆菌菌悬液的0.45%。

3.根据权利要求1所述的固定化细胞高效生产氨基丁酸的方法,其特征在于:将希氏乳杆菌菌体加入含有四氢嘧啶和磷酸吡哆醛的生理盐水中,混匀后孵育10-60min,其中最佳孵育时间为25min。

4.根据权利要求1-3任一所述的固定化细胞高效生产氨基丁酸的方法,其特征在于:包括以下步骤:

5.根据权利要求4所述的固定化细胞高效生产氨基丁酸的方法,其特征在于:步骤(1)中,所述菌体与灭菌生理盐水的质量比为1:30-35。

6.根据权利要求4所述的固定...

【专利技术属性】
技术研发人员:李珍爱李海军王超张英华张杰胡红涛张鑫徐波刘运常
申请(专利权)人:山东福瑞达生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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