转氨酶及其变体制造技术

本公开涉及转氨酶及其变体，以及转氨酶及其变体在胺合成中的应用。

【技术实现步骤摘要】

本公开涉及转氨酶及其变体，以及所述转氨酶及其变体在胺合成中的应用。其中，所述转氨酶及其变体在胺合成过程中具有高催化活性。

技术介绍

1、转氨酶(ec 2.6.1.x)是一类广泛的酶，能够将氨基(nh2)官能团从一个部分(供体)转移到另一个部分(受体)，通常使受体的所得反应产物具有光学纯和nh2官能团。这是特别令人感兴趣的，因为许多药物中间体或最终药物物质是手性胺。例如，多替拉韦(dolutegravir)就是这样一种分子。尽管多替拉韦本身结构复杂，但其关键结构模体是手性胺(r)-3-氨基-1-丁醇((r)-3-amino-1-butanol，rabo)。目前所有商业上可行的工艺都使用rabo作为关键成分。

2、当前，(r)-3-氨基-1-丁醇的制造路线涉及不期望特性的组合，例如，使用有害金属氢化物、高压或氢气、沉重的废物负载流和/或丢弃其中一半材料而造成浪费。因此，需要一种温和且具有选择性的催化剂来实现相同的转化。

3、众所周知，酶是温和的选择性催化剂。然而，酶和酶促过程通常与化学制造过程不相容，因为化学制造过程通常对高温和高底物负本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种制备式III所示的胺的方法，所述方法包括在转氨酶的存在下，将式I所示的氨基受体或其药学上可接受的盐与氨基供体反应：

2.权利要求1所述的方法，其中，所述氨基供体为式II所示化合物，或其药学上可接受的盐：

3.权利要求1或2所述的方法，其中，式I所示的氨基受体中，

4.权利要求2或3所述的方法，其中，式II所示的氨基供体中，

5.权利要求1-4中任一项所述的方法，其中所述转氨酶变体相比于具有SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的野生型转氨酶具有改进的转氨酶活性，并且所述转氨酶变体包含与SEQID NO:2所示的氨基酸序列具有至少约7...

【技术特征摘要】

1.一种制备式iii所示的胺的方法，所述方法包括在转氨酶的存在下，将式i所示的氨基受体或其药学上可接受的盐与氨基供体反应：

2.权利要求1所述的方法，其中，所述氨基供体为式ii所示化合物，或其药学上可接受的盐：

3.权利要求1或2所述的方法，其中，式i所示的氨基受体中，

4.权利要求2或3所述的方法，其中，式ii所示的氨基供体中，

5.权利要求1-4中任一项所述的方法，其中所述转氨酶变体相比于具有seq id no:2所示的氨基酸序列的野生型转氨酶具有改进的转氨酶活性，并且所述转氨酶变体包含与seqid no:2所示的氨基酸序列具有至少约78％、79％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；优选地，所述转氨酶变体包含与seq id no:2所示的氨基酸序列具有至少约88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列。

6.权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述转氨酶变体具有对应于seq id no:2的以下位置处的一种或多种取代：

7.权利要求1-6中任一项所述的方法，其中所述转氨酶变体具有对应于seq id no:2的位置s214处的氨基酸取代；优选地，所述转氨酶变体具有对应于seq id no:2的位置s214处的s214p的取代。

8.权利要求7所述的方法，其中所述转氨酶变体与seq id no:2相比，还具有选自以下取代组的取代：

9.权利要求8所述的方法，其中所述转氨酶变体与seq id no:2相比，还具有选自以下的取代：

10.权利要求9所述的方法，其中所述转氨酶变体与seq id no:2相比，还具有选自以下取代组的取代：

11.权利要求10所述的方法，其中所述转氨酶变体与seq id no:2相比，还具有选自以下取代组的取代：

12.权利要求11所述的方法，其中所述转氨酶变体与seq id no:2相比，还具有选自以下的取代：

13.权利要求12所述的方法，其中所述转氨酶变体与seq id no:2相比，还具有选自以下取代组的取代：

14.权利要求13所述的方法，其中所述转氨酶变体与seq id no:2相比，还具有选自以下的取代：

15.权利要求14所述的方法，其中所述转氨酶变体与seq id no:2相比，还具有选自以下取代组的取代：

16.权利要求15所述的方法，其中所述转氨酶变体与seq id no:2相比，还具有选自以下取代组的取代：

17.权利要求16所述的方法，其中所述转氨酶变体与seq id no:2相比，还具有选自以下的取代：

18.权利要求17所述的方法，其中所述转氨酶变体与seq id no:2相比，还具有选自以下取代组的取代：

19.权利要求18所述的方法，其中所述转氨酶变体与seq id no:2相比，还具有选自以下取代组的取代：

20.权利要求1-19中任一项所述的方法，其中所述转氨酶变体包含选自下组的氨基酸序列或由选自下组的氨基酸序列组成：seq id no:4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、142、144、146、148、150、152、154、156、158、160、162、164、166、168、170、172、174、176、178、180、182、184、186、188、190、192、194、196、198、200、202、204、206、208、210、212、214、216、218、220、222、224、226、228、230、232、234、236、238、240、242、244、246、248、250、252、254、256、258、260、262、264、266、268、270、272、274、276、278、280、282、284、286、288、290、292、294、296、298、300、302、304、306、308、310、312、314、316、318、320、322、324、326、328、330、332、334、336、338、340、342、344、346、348、350、352、354、356、358、360、362、364、366、368、370、372、374、376、378、380、382、384、386、388、390、392、394、396、398、400、402、404、406、408和410。

21.根据权利要求2-20中任一项所述的方法，其中，氨基受体与氨基供体的反应如下：

22.权利要求1-21中任一项所述的方法，其用于(r)-3-氨基-1-丁醇(rabo)的合成或用于多替拉韦的合成。

23.一种转氨酶变体，所述转氨酶变体相比于具有seq id no:2所示的氨基酸序列的野生型转氨酶具有改进的转氨酶活性，并且所述转氨酶变体包含与seq id no:2所示的氨基酸序列具有至少约78％、79％、80％、81％、82％...

【专利技术属性】
技术研发人员：马瑞，梁世杰，
申请(专利权)人：杭州恩和生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：