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一种检测马立克氏病病毒gC蛋白抗体的间接ELISA方法及其应用技术

技术编号:41595392 阅读:31 留言:0更新日期:2024-06-07 00:05
本发明专利技术提供了一种检测马立克氏病病毒gC蛋白抗体的间接ELISA方法及其应用。属于生物医药技术领域。方法中选取糖蛋白C基因编码的第69‑85位氨基酸区段的gC抗原肽段,作为包被抗原,采用化学方法直接合成包被抗原,用于构建马立克氏病病毒间接ELISA方法,相比于传统的PCR检测方法,包被抗原的制备需要经原核表达获取,而本发明专利技术的包被抗原为合成肽,通过化学方法就可以合成,既不具有修饰性且产量具有可控性相比于传统的原核表达获取更简单便捷,且无需制备原核表达的培养基,极大的简化了操作流程,具有较高的特异性、重复性,在2h内就可以完成检测,更加快速高效。本发明专利技术还提供了上述检测方法在马立克氏病病毒检测中的应用以及一种检测马立克氏病病毒gC蛋白抗体的ELISA试剂盒,为MDV的定性鉴别提供了技术支持。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物医药,更具体的说是一种检测马立克氏病病毒gc蛋白抗体的间接elisa方法及其应用。


技术介绍

1、马立克氏病(marek's disease,md)是我国家禽三大主要传染病之一,能引起鸡发生急性t细胞淋巴瘤,破坏免疫器官的结构和功能,以外周神经、皮肤和虹膜在内的各种器官和组织的单核性细胞浸润为特征,能在多个器官上形成肿瘤或造成器官的明显肿大。严重抑制鸡群对疫苗的反应,加剧其它病原的感染风险。马立克氏病病毒(mdv)属于高致瘤性疱疹病毒,引起被感染鸡的免疫抑制和肿瘤发生,主要诱发淋巴细胞瘤。

2、目前,诊断马立克病(md)的经典方法包括病毒分离、组织病理学观察以及pcr、lamp等技术,然而这些方法都存在一些局限性。病毒分离需要在特定的实验条件下操作,包括特定的细胞培养、病毒培养液和特殊的实验室设施等。这些限制条件可能导致分离的成功率较低,从而影响诊断结果的准确性。利用组织病理学观察诊断md,可能需要进行有创的手术或活检程序。对于某些患禽来说,这可能是不切实际的,特别是在病情严重或手术风险较高的情况下。此外,病理判断是基于病理学本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种检测马立克氏病病毒gC蛋白抗体的间接ELISA方法,其特征在于,以马立克病毒编辑糖蛋白C的基因序列为模板,编码其对应的氨基酸序列,选取序列中第69-85位氨基酸区段的gC抗原肽,作为包被抗原,建立检测马立克氏病病毒gC蛋白抗体的间接ELISA检测方法。

2.根据权利要求1所述的检测马立克氏病病毒gC蛋白抗体的间接ELISA检测方法,其特征在于,具体步骤如下:

3.根据权利要求2所述的检测马立克氏病病毒gC蛋白抗体的间接ELISA检测方法,其特征在于,步骤(2)所述包被条件为:37℃湿盒孵育2h后,4℃包被过夜;所述包被抗原的浓度为7.5μg/mL。

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【技术特征摘要】

1.一种检测马立克氏病病毒gc蛋白抗体的间接elisa方法,其特征在于,以马立克病毒编辑糖蛋白c的基因序列为模板,编码其对应的氨基酸序列,选取序列中第69-85位氨基酸区段的gc抗原肽,作为包被抗原,建立检测马立克氏病病毒gc蛋白抗体的间接elisa检测方法。

2.根据权利要求1所述的检测马立克氏病病毒gc蛋白抗体的间接elisa检测方法,其特征在于,具体步骤如下:

3.根据权利要求2所述的检测马立克氏病病毒gc蛋白抗体的间接elisa检测方法,其特征在于,步骤(2)所述包被条件为:37℃湿盒孵育2h后,4℃包被过夜;所述包被抗原的浓度为7.5μg/ml。

4.根据权利要求3所述的检测马立克氏病病毒gc蛋白抗体的间接elisa检测方法,其特征在于,步骤(3)所述封闭条件为37℃...

【专利技术属性】
技术研发人员:黄腾秦可徐贝贝梁佳华李娟梁开钧滕卓敏
申请(专利权)人:广西大学
类型:发明
国别省市:

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