一种β-烟酰胺单核苷酸合成方法技术

本发明专利技术公开一种β‑烟酰胺单核苷酸合成方法，包括：以大肠杆菌为宿主菌建立表达烟酰胺核糖激酶的基因工程菌；诱导表达所述基因工程菌并纯化，获得纯酶液；以烟酰胺核糖为底物，ATP为磷酸供体，并添加所述纯酶液构建β‑烟酰胺单核苷酸的合成体系，合成β‑烟酰胺单核苷酸；所述烟酰胺核糖激酶来源于绣球菌，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明专利技术的方法在较宽的温度范围下均有良好的合成效果，且使用的酶在弱碱性条件下相比现有NRK酶酶活高，本发明专利技术的方法在10min内可将底物烟酰胺核糖氯化物的转化率提高至80%以上，还可进一步联合PPK酶进行共催化，降低了ATP的供应，适合于产业应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于微生物工程，具体涉及一种β-烟酰胺单核苷酸合成方法。

技术介绍

1、β-烟酰胺单核苷酸（nicotinamide mononucleotide，nmn）是人体内合成 nad+的重要前体，通过转化为 nad+来发挥其生理功能，与多种疾病紧密相关，其中 nmn 用于治疗衰老性疾病及延缓衰老是其研究最为热门的领域之一。nmn 已逐渐应用于保健食品和医学药物，通过调节生物体内 nmn 的水平，对心脑组织损伤、代谢性疾病、衰老及其相关老化化退行性疾病等有较好的预防、治疗和修复作用。

2、nmn 广泛存在于毛豆、西兰花、真菌、虾等天然食物中，但是食用天然食物摄入nmn的量，远不能达到使其对人体健康造成关键性的影响。因此将其应用于加工食品，可以为改善人体健康，预防疾病等起到重要的作用。由于合成问题，目前以 nmn 为主要成分的产品价格仍十分昂贵。合成 nmn 的方法中，相比于化学法合成 nmn，生物法因无有机溶剂残留也不存在手性问题，成为最环保无公害的合成方法。nmn的生物催化制备一般有两种途径，一种是以烟酰胺和磷酸核糖基焦磷酸为底物，在烟酰胺本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.在一种β-烟酰胺单核苷酸合成方法，其特征在于，包括：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述β-烟酰胺单核苷酸的合成体系中添加Mg2+、Ca2+和K+中的一种或两种。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述β-烟酰胺单核苷酸的合成体系中添加Mg2+和Ca2+。

4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于，添加的金属离子终浓度为10-15mM。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述β-烟酰胺单核苷酸的合成体系中反应温度为40-65℃。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述β-烟酰胺单核苷酸...

【技术特征摘要】

1.在一种β-烟酰胺单核苷酸合成方法，其特征在于，包括：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述β-烟酰胺单核苷酸的合成体系中添加mg2+、ca2+和k+中的一种或两种。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述β-烟酰胺单核苷酸的合成体系中添加mg2+和ca2+。

4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于，添加的金属离子终浓度为10-15mm。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述β-烟酰胺单核苷酸的合成体系中反应温度为40-65℃。

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【专利技术属性】
技术研发人员：任路静，党梦晗，杜晨晨，胡学超，
申请(专利权)人：南京工业大学，
类型：发明
国别省市：