水稻烷基嘌呤糖基化酶及其突变体在植物A-to-K单碱基编辑中的应用制造技术

本发明专利技术公开了水稻烷基嘌呤糖基化酶及其突变体在植物A‑to‑K单碱基编辑中的应用。本发明专利技术基于水稻烷基嘌呤糖基化酶OsMPG及其突变体开发了新型植物A‑to‑K的单碱基编辑器rAKBEs，利用rAKBEs可同时实现植物基因组中一个靶序列编辑窗口内腺嘌呤(A)的转换(G)和颠换(T)。通过原生质体及稳定转化株系鉴定结果表明，rAKBE04单碱基编辑器表现最好，可以在5个测试靶点上产生包含A‑to‑G、A‑to‑C、A‑to‑T以及indel在内的编辑事件。本发明专利技术开发的rAKBEs碱基编辑将极大地丰富植物单碱基编辑工具箱，为水稻和其它农作物重要基因功能分析和遗传改良提供了重要技术支撑。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于分子育种领域，具体涉及水稻烷基嘌呤糖基化酶及其突变体在植物a-to-k单碱基编辑中的应用，特别涉及基于水稻烷基嘌呤糖基化酶osmpg及其突变体mosmpg开发的新型植物a-to-k的单碱基编辑器rakbes，以及利用rakbes同时实现植物基因组中靶序列编辑窗口内腺嘌呤(a)的转换(g)和颠换(t)的方法。

技术介绍

1、遗传变异是作物性状遗传改良的基础，植物育种的目标是通过利用更多的遗传变异，提高农作物的产量、品质、抗病性等，从而创制农艺性状优良的农作物新种质。在农作物品种演化过程中，等位基因的差异是造成农作物产量和其他重要农艺性状差异的主要原因，而等位基因的差异通常是由一个或多个单核苷酸多态性(snp)的差异或特定片段的插入/缺失引起的。利用常规育种方法将优异等位基因导入栽培品种往往需要经过多次杂交和回交，通常需要数年时间，耗时费力。此外，针对重要农艺性状关键基因创制新型等位变异，可以丰富农作物的遗传多样性，从而满足育种实践中的多样化需求。crispr/cas介导的碱基编辑可在靶位点实现单个碱基的转换或颠换，利用单碱基编辑技术介导的内源靶本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.成套系统，所述成套系统为如下M1)-M4)中任一种：

2.根据权利要求1所述的成套系统，其特征在于：所述腺嘌呤脱氨酶TadA8e为A1)或A2)：

3.根据权利要求1或2所述的成套系统，其特征在于：所述Cas9(D10A)缺刻酶为B1)或B2)：

4.根据权利要求1-3任一所述的成套系统，其特征在于：所述水稻烷基DNA糖基化酶OsMPG为C1)或C2)：

5.根据权利要求1-4任一所述的成套系统，其特征在于：所述反式激活因子Vp64为D1)或D2)：

6.根据权利要求1-5任一所述的成套系统，其特征在于：所述成套系统还包括筛...

【技术特征摘要】

1.成套系统，所述成套系统为如下m1)-m4)中任一种：

2.根据权利要求1所述的成套系统，其特征在于：所述腺嘌呤脱氨酶tada8e为a1)或a2)：

3.根据权利要求1或2所述的成套系统，其特征在于：所述cas9(d10a)缺刻酶为b1)或b2)：

4.根据权利要求1-3任一所述的成套系统，其特征在于：所述水稻烷基dna糖基化酶osmpg为c1)或c2)：

5.根据权利要求1-4任一所述的成套系统，其特征在于：所述反式激活因子vp64为d1)或d2)：

6.根据权利要求1-5任一所述的成套系统，...

【专利技术属性】
技术研发人员：夏兰琴，李玉才，李少雅，林勇，张阳军，
申请(专利权)人：中国农业科学院作物科学研究所，
类型：发明
国别省市：