滤膜质控菌株及其使用和制备方法技术

本申请涉及滤膜质控菌株及其使用和制备方法，该方案包括配制冻干保护剂并进行灭菌处理；对微孔滤膜进行灭菌处理，得到无菌滤膜；制备保护性菌液并控制至合适数量；将含合适数量菌体的菌液与冻干保护剂按设定比例混合稀释，得到菌液；将混合后的菌液以0.5mL~100mL的量均匀分散到无菌滤膜上，得到含菌滤膜；将含菌滤膜真空冷冻干燥，得到滤膜质控菌株，并精确标定和控制滤膜质控菌株的菌量。本申请制成的滤膜质控菌株可直接用于定性或定量分析，无需复杂的菌株传代复苏计数流程，避免常规划线等菌株接种过程中造成的菌株分散不均匀，计数失败等问题，最大程度保护人员健康安全。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于微生物检测领域，具体而言，涉及一种评估培养基质量和消毒剂消毒效果的滤膜质控菌株及其使用和制备方法。

技术介绍

1、随着水质检测、医疗、食品、消毒等行业快速发展，对行业内检测要求也越来越高。为保证检测的快速准确，推荐质控菌株即商业化衍生菌株来进行检验。由于质控菌株含有固定的菌含量，使用者无需制备新鲜菌液，能够快速缩短检验时长，提高检测者工作效率，所以质控菌株逐步被推广开来。在培养基质控、方法验证以及抑菌防腐效果测试等方面起重要作用。

2、现有常规质控菌株产品中，定量的质控菌株在冷冻干燥过程中保护剂保护效率低、保护效果不稳定，需要浪费更多的菌液量进行产品制备。例如专利cn111321084a，其冻干保护效率仅24.3%。另外，大量的菌体会产生聚集，在使用时其分布状态难以控制，菌体多处于受损状态且菌体聚集双重因素决定无法实现直接定量，在定量实验应用时需要繁杂的操作步骤进行间接定量，即需要复水制成悬液，复苏培养后，再制备0.5麦氏浓度的菌悬液，再依次5-6次梯度稀释至合适的菌悬液浓度后接种参比培养基和待评估培养基实现定量评估，所述操作过程本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.滤膜质控菌株制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的滤膜质控菌株制备方法，其特征在于，还包括步骤S60、在无菌条件下，将所述滤膜质控菌株真空密封包装。

3.根据权利要求1所述的滤膜质控菌株制备方法，其特征在于，步骤S00中，所述冻干保护剂的成分包括蔗糖、谷氨酸钠、甘油、海藻糖、脱脂奶粉，混合后进行灭菌处理。

4.根据权利要求3所述的滤膜质控菌株制备方法，其特征在于，步骤S00中，每100mL水中含海藻糖2.5~15g，蔗糖5~10g，脱脂奶粉1~6g，谷氨酸钠1~5g，甘油17~20%。

5.根据权利要求3或4所述...

【技术特征摘要】

1.滤膜质控菌株制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的滤膜质控菌株制备方法，其特征在于，还包括步骤s60、在无菌条件下，将所述滤膜质控菌株真空密封包装。

3.根据权利要求1所述的滤膜质控菌株制备方法，其特征在于，步骤s00中，所述冻干保护剂的成分包括蔗糖、谷氨酸钠、甘油、海藻糖、脱脂奶粉，混合后进行灭菌处理。

4.根据权利要求3所述的滤膜质控菌株制备方法，其特征在于，步骤s00中，每100ml水中含海藻糖2.5~15g，蔗糖5~10g，脱脂奶粉1~6g，谷氨酸钠1~5g，甘油17~20%。

5.根据权利要求3或4所述的滤膜质控菌株制备方法，其特征在于，步骤s00中，灭菌方式为115℃，30min或121℃，20min高压蒸汽灭菌。

6.根据权利要求1所述的滤膜质控菌株制备方法，其特征在于，步骤s10中，所述微孔滤膜的材质包括混合纤维素膜、聚丙烯膜、醋酸纤维膜、玻璃纤维膜、核孔膜、聚四氟乙烯膜、聚醚砜膜和尼龙膜的其中一种。

7.根据权利要求1所述的滤膜质控菌株制备方法，其特征在于，步骤s20中，保护性菌液制备并控制至合适数量的方法，所述方法为麦氏浓度法、活菌平皿计数法和/或流式荧光细胞计数法，在培养获得的菌体中加入1~5ml保护剂重悬，重悬后用0.1%吐温80进行稀释，根据麦氏浓度法、活菌平皿计数法和/或流式荧光细胞计数法调节菌液至所需数量...

【专利技术属性】
技术研发人员：崔雯，王云光，张晓斌，丁正蛟，方利敏，徐磊，赵赢，沈志林，
申请(专利权)人：浙江泰林生命科学有限公司，
类型：发明
国别省市：