N-脱氧核糖转移酶C3突变体及其在2’-脱氧核糖转移中的应用制造技术

技术编号:41558285 阅读:46 留言:0更新日期:2024-06-06 23:43
本发明专利技术提供了N‑脱氧核糖转移酶C3突变体及其在脱氧核糖转移中的应用。本发明专利技术揭示了N‑脱氧核糖转移酶(简称NDT)氨基酸序列中与其催化活性(转移2’‑脱氧核糖(基团))密切相关的位点,在此基础上揭示了一种NDT突变体(简称NDT‑C3)及其在催化2’‑脱氧核糖(基团)转移中的应用。所述突变体可参与核苷类似物合成途径、提高核苷类似物的转化率。本发明专利技术也提供了合成核苷类似物的优化的工艺,为规模化生产提供了有效途径。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于酶工程及合成领域,更具体地,本专利技术涉及一种n-脱氧核糖转移酶c3突变体及其在2’-脱氧核糖转移中的应用。


技术介绍

1、核苷类似物是一类重要的药物(如作为抗癌化疗剂),包括各种嘌呤和嘧啶核苷的衍生物,主要是一类抗代谢物,通过干扰肿瘤细胞的dna合成和dna合成中需要的嘌呤、嘧啶、嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸的合成,从而抑制了肿瘤细胞的存活和复制必不可少的代谢途径,以及以细胞内的酶、核酸为作用靶而产生细胞毒性。近年来,随着核苷转移子、核苷代谢过程中的酶以及核苷的抗癌机制的不断深入的研究,核苷类抗癌化疗剂取得了很大进展。利用前药原理对核苷类似物的结构进行修饰是优化核苷类似物抗癌活性的重要途径。

2、n2-异丁酰-2’-脱氧鸟苷,cas:68892-42-2,分子式为c14h19n5o5,作为重要的核苷类似物,可以用于多种活性抗病毒药物的合成,但鲜有文献报道,且大多采用化学法合成,生物酶法制备的报道几乎没有。关于n2-异丁酰-2’-脱氧鸟苷的合成方法有如下报道:

3、1)以2-甲基丙酸酐,2’-脱氧鸟苷和吡啶等为主要原料,在氯本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种N-脱氧核糖转移酶突变体,所述突变体选自:

2.如权利要求1所述的所述的N-脱氧核糖转移酶突变体,其特征在于,所述保守性变异蛋白选自:

3.一种多核苷酸,其编码权利要求1或2所述的N-脱氧核糖转移酶突变体;较佳地,其为核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示或其简并序列的多核苷酸。

4.一种载体或含有该载体的宿主细胞,所述载体含有权利要求3所述的多核苷酸。

5.一种生产权利要求1或2所述的N-脱氧核糖转移酶突变体的方法,包括步骤:

6.一种提高N-脱氧核糖转移酶的催化活性的方法,包括:对应于SEQ ID NO:2,将其氨基...

【技术特征摘要】

1.一种n-脱氧核糖转移酶突变体,所述突变体选自:

2.如权利要求1所述的所述的n-脱氧核糖转移酶突变体,其特征在于,所述保守性变异蛋白选自:

3.一种多核苷酸,其编码权利要求1或2所述的n-脱氧核糖转移酶突变体;较佳地,其为核苷酸序列如seq id no:3所示或其简并序列的多核苷酸。

4.一种载体或含有该载体的宿主细胞,所述载体含有权利要求3所述的多核苷酸。

5.一种生产权利要求1或2所述的n-脱氧核糖转移酶突变体的方法,包括步骤:

6.一种提高n-脱氧核糖转移酶的催化活性的方法,包括:对应于seq id no:2,将其氨基酸序列中第21位突变为gly、第29位突变为val、第67位突变为thr、第91位突变为ala。

7.权利要求1或2所述的n-脱氧核糖转移酶突变体的应用,用于以脱氧核糖受体为底物,在其上增加一个2’-脱氧核糖;或

8.如权利要求7所述的应用,其特征在于,所述脱氧核糖受体为具有嘌呤结构的化合物;较佳地,所述脱氧核糖受体包括:n2-异丁酰基鸟嘌呤,n6-苯甲酰基腺嘌呤,6-...

【专利技术属性】
技术研发人员:张波琨谢磊李杰孙丰来黄月园韩姝然霍欣洋王宸
申请(专利权)人:上海合全药物研发有限公司
类型:发明
国别省市:

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