降胆固醇乳酸菌的微胶囊化方法技术

降胆固醇乳酸菌的微胶囊化方法，包括降胆固醇乳酸菌的活化、固定化降胆固醇乳酸菌的制备、Ｗ／Ｏ／Ｗ复相乳液法制备微胶囊、冷冻干燥的步骤。本发明专利技术采用复相乳液法（Ｗ／Ｏ／Ｗ）制备的降胆固醇乳酸菌微胶囊，因其壁材均属于天然高分子材料，具有稳定、无毒等特性，肠液中２ｈ的释放率为８７．４％以上，活菌数可达到７．０３×１０９ｃｆｕ／ｍＬ；置于５０℃下３ｈ，活菌数仍能达６．８１×１０６ｃｆｕ／ｍＬ，储存３０ｄ活菌数仍可达到６×１０８ｃｆｕ／ｍＬ；体外降胆固醇试验中，胆固醇降解率为３６．０７％以上，且具有较好的耐酸性、肠溶性、耐高温性及降胆固醇性，产率在８６．６２％左右。囊材与载体材料价格低廉，降低了成本。

Microencapsulation of cholesterol reducing lactic acid bacteria

Microencapsulation of cholesterol reducing lactic acid bacteria, including cholesterol lowering, activation of lactic acid bacteria, immobilization of cholesterol lowering, preparation of lactic acid bacteria, preparation of microcapsules and freeze-drying steps by W / O / W composite emulsion method. The invention adopts the composite emulsion method (W / O / W) cholesterol reducing lactic acid bacteria preparation of microcapsule wall material, because it belongs to the natural macromolecule material, with stable and non-toxic properties, intestinal 2H release rate is above 87.4%, the viable number reached 7.03 * 109cfu / mL in 50; at 3h, number of live bacteria can still reach 6.81 * 106cfu / mL, 30d storage living bacteria number can reach 6 * 108cfu / mL; in vitro cholesterol lowering trials, cholesterol degradation rate was more than 36.07%, and has good acid resistance, high temperature resistance, enteric and cholesterol, the yield of around 86.62%. The shell material and the carrier material are low in price and lower in cost.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种。
技术介绍
在人体肠道内栖息着数百种的细菌，其数量超过百万亿个。其中对人体健康的有 益菌，以乳酸菌、双歧杆菌等为代表。乳酸菌的益生作用已被医学界所公认，长期研究结果 表明，乳酸菌对人的健康与长寿非常重要。据最近几年研究资料表明，乳酸菌作为定居肠 道中的有益菌群具有多种保健作用能维持微生态平衡和肠道机能，改善肝功能，降低胆固 醇，增强免疫功能以及抗肿瘤等作用。乳酸菌大量存在于酸乳及其它相关发酵乳制品中。20 世纪70年代，科学家先后通过对大量饮用酸乳等发酵乳制品的非洲Massai人的血清胆固 醇进行研究，并对常饮酸乳的美国人进行调查以及直接对酸乳进行研究等，均发现乳酸菌 具有降低人体血清胆固醇的作用。随着人民生活水平的提高和膳食营养的增加，胆固醇的 摄入量很容易超标。自上世纪30年代有国外研究者得出血管壁增厚即动脉粥样硬化症是 不正常胆固醇代谢的结果这一结论以来，已有越来越多的实验和研究表明胆固醇与动脉 粥样硬化、冠心病、脑中风等心脑血管疾病间的关系。因此研究出不限饮食，不影响食品风 味，经济实用的降低食品及人体中血清胆固醇水平的方法已成为当前重要的研究课题。 本文档来自技高网...

【技术保护点】
降胆固醇乳酸菌的微胶囊化方法，包括以下步骤：　　１）、降胆固醇乳酸菌的活化　　挑取斜面固体培养基上的菌落，经梯度稀释后加入到ＭＲＳ液体培养基中混菌，３７℃培养４８小时，重复以上操作２～３次；然后取２００μＬ培养液涂布在改良ＭＲＳ培养基的平板上，３７℃恒温培养４８～７２ｈ；挑取单个菌落，斜面接菌得到活化的纯培养物；　　所述的挑取斜面固体培养基上的菌落是这样得到的：　　将经分离纯化的降胆固醇乳酸菌，接种于含０．７５ｗｔ％ＣａＣＯ↓［３］ＭＲＳ斜面培养基，４℃保存；　　２）固定化降胆固醇乳酸菌的制备　　２．１）活化后的降胆固醇乳酸菌发酵液，经２５００～３５００ｒｐｍ／ｍｉｎ离心８～１２分钟后，去上清...

【技术特征摘要】
降胆固醇乳酸菌的微胶囊化方法，包括以下步骤1)、降胆固醇乳酸菌的活化挑取斜面固体培养基上的菌落，经梯度稀释后加入到MRS液体培养基中混菌，37℃培养48小时，重复以上操作2～3次；然后取200μL培养液涂布在改良MRS培养基的平板上，37℃恒温培养48～72h；挑取单个菌落，斜面接菌得到活化的纯培养物；所述的挑取斜面固体培养基上的菌落是这样得到的将经分离纯化的降胆固醇乳酸菌，接种于含0.75wt％CaCO3MRS斜面培养基，4℃保存；2)固定化降胆固醇乳酸菌的制备2.1)活化后的降胆固醇乳酸菌发酵液，经2500～3500rpm/min离心8～12分钟后，去上清液；2.2)将收集到的菌体用pH 7.0的无菌PBS缓冲液洗涤，再次离心；重复三次；2.3)以1∶4～6的体积比菌体和缓冲液的比例，用pH 7.0的无菌PBS缓冲液重新悬浮菌体；2.4)将悬浮菌液与活化后的硅藻土以5mL∶1～2g的比例，缓慢倒入活化后的硅藻土中，同时不断搅拌，然后静置1～3h；2.5)1～3小时后待硅藻土充分吸附菌体后抽滤；3)W/O/W复相乳液法制备微胶囊3.1)将含菌的硅藻土分散到内层水相中，两者的比例为1g硅藻土30～40mL水相；所述的内层水相中含明胶3.5～4wt％，海藻酸钠2～2.5wt％；将该水相溶液在搅拌的条件下，按照1∶1～1.5体积比加入到含0.2wt～0.3wt％吐温80和0.4wt％～0.5wt％十二烷基磺酸钠的普通植物色拉油中，形成W/O乳液；3.2)将上述W/O乳液按照5∶3～3.5...

【专利技术属性】
技术研发人员：侯红漫，陈金子，张公亮，
申请(专利权)人：大连工业大学，
类型：发明
国别省市：91[中国|大连]