一种仿生矿化细菌膜囊泡的制备方法及其在靶向抗菌方面的应用技术

本发明专利技术公开一种仿生矿化的大肠杆菌细菌膜囊泡的制备方法及其在靶向抗菌领域的应用。本发明专利技术首先采用薄膜分散法制备大肠杆菌细菌膜囊泡，并采用挤出法将抗生素环丙沙星包封在细菌膜囊泡内，再利用细菌膜囊泡表面的酸性残基和负电荷提供的成核位点进行仿生矿化形成碳酸钙外壳，最终得到仿生纳米颗粒CIP@EMV@CaCO<subgt;3</subgt;。CIP@EMV@CaCO<subgt;3</subgt;形貌良好，尺寸均一，生物相容性好，碳酸钙外壳具有pH响应性，可在酸性环境下分解产生大量的CO<subgt;2</subgt;气泡涨破溶酶体，从而实现溶酶体逃逸，同时细菌膜囊泡具有同源靶向作用，能有效地将抗生素靶向递送到具有同类型膜结构的大肠杆菌抑制其生长，在靶向抗菌、药物递送等领域具有广泛的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物，具体涉及一种仿生矿化的大肠杆菌细菌膜囊泡的制备方法及其在靶向抗菌方面的应用。

技术介绍

1、一直以来抗生素被广泛用于预防和治疗细菌感染，但直接使用抗生素存在利用率低、无靶向性、容易引发耐药性等问题。随着仿生纳米技术的快速发展，各来源生物载体被开发用于药物靶向递送，为解决抗生素负面影响同时增强抗菌效果提供了巨大机会。

2、细菌可分泌产生含有生物活性分子(核酸、脂多糖、金属离子、膜蛋白等)的细菌膜囊泡(bmvs)，这些囊泡在介导细胞间通讯和细胞功能方面发挥着核心作用。bmvs主要由磷脂酰甘油、磷脂酰乙醇胺、蛋白质和脂多糖膜组成，具有类似脂质体的磷脂双分子层结构，大多呈球形(直径约20-400nm)，其中亲水性和疏水性的隔室可用于各类药物的负载。基于革兰氏阴性菌具有独特的双膜结构，可制备得到细菌外膜囊泡(omvs)、细菌内膜囊泡(imvs)和细菌双膜囊泡(dmvs)，目前已被用于药物靶向递送、疫苗开发、抗菌、抗肿瘤等生物医学领域。

3、由于同种细菌的bmvs与相应细菌的膜结构相似，bmvs可以很容易地与细菌细胞膜融合，本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种具有靶向大肠杆菌的仿生矿化的细菌膜囊泡的制备方法，其特征在于：首先采用薄膜分散法制备大肠杆菌细菌膜囊泡，并通过连续挤出将抗生素环丙沙星包封在大肠杆菌细菌膜囊泡内，再利用细菌膜囊泡表面的酸性残基和负电荷提供的成核位点先后加入CaCl2和Na2CO3仿生矿化形成CaCO3外壳，得到仿生纳米颗粒CIP@EMV@CaCO3。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：取500mL的大肠杆菌菌液进行离心；摇床培养参数为37℃、200rpm；菌液在6000rpm下离心5min；离心后将大肠杆菌分散到40mL...

【技术特征摘要】

1.一种具有靶向大肠杆菌的仿生矿化的细菌膜囊泡的制备方法，其特征在于：首先采用薄膜分散法制备大肠杆菌细菌膜囊泡，并通过连续挤出将抗生素环丙沙星包封在大肠杆菌细菌膜囊泡内，再利用细菌膜囊泡表面的酸性残基和负电荷提供的成核位点先后加入cacl2和na2co3仿生矿化形成caco3外壳，得到仿生纳米颗粒cip@emv@caco3。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：取500ml的大肠杆菌菌液进行离心；摇床培养参数为37℃、200rpm；菌液在6000rpm下离心5min；离心后将大肠杆菌分散到40ml tris/hcl缓冲溶液中；溶菌酶加入量为600mg；摇床在37℃、200rpm条件下孵育时间为3h；sds加入量为400mg；

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤2)中，提取的大肠杆菌细菌膜用bca试剂盒测定蛋白含量并用pbs定量至1mg/ml；大肠杆菌细菌膜溶液分别通过孔径为0.4μm和0.2μm聚碳酸酯膜连续...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘惠玉，廖慧颖，刘爽，
申请(专利权)人：北京化工大学，
类型：发明
国别省市：