一种PEDV裂解液和应用、一种裂解方法和应用技术

本发明专利技术提出了一种PEDV裂解液和应用、一种裂解方法及其应用，裂解液包括所述PEDV裂解液包括缓冲液、卤盐、表面活性剂和蛋白酶抑制剂；其中所述缓冲液为醋酸‑醋酸铵缓冲液、磷酸盐缓冲液、氨‑氯化铵缓冲液、Tris‑HCl缓冲液中的一种；所述卤盐为NaCl、KCl中的至少一种；所述表面活性剂中包含Triton X‑100；所述蛋白酶抑制剂包括正矾酸钠、EDTA、亮抑酶肽中的至少一种；将PEDV病毒用该PEDV裂解液室温裂解1～30min后，可以将PEDV病毒完全裂解使N蛋白完全释放；该PEDV裂解液或裂解方法可应用于PEDV定量分析、疫苗质量检测中。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物，具体涉及一种pedv裂解液和应用、一种裂解方法和应用。

技术介绍

1、猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus，pedv)是猪肠道传染病病原，能够引起猪呕吐、腹泻和脱水，哺乳仔猪、架子猪或育肥猪等各年龄段均可发病。该病发病突然，传播较快，流行范围广，流行时间长，应用各种抗生素防治无效，其发病率达80％左右，死亡率高达50％～85％，对我国畜牧业造成重大的经济损失。注射猪流行性腹泻灭活病毒疫苗是防护该疾病的有效手段。由于抗原的含量对免疫保护效果至关重要，因此疫苗生产企业抗原生产过程准确定量是质量控制环节中必不可少的部分。

2、在pedv的主要结构蛋白中，n蛋白分子量为55-58kda，为pedv的主要结构蛋白之一，较其他结构蛋白的所占比例大。n蛋白为经磷酸化的核衣壳蛋白，与病毒的互相缠绕后形成病毒的核衣壳，并且也是主要的免疫原抗原，具有高度保守性，和病毒的含量具有相关性。但是现有技术中的裂解液不能将pedv中的n蛋白完全裂解出来，无法为后续研究提供定量分析的依据。p>

3、因此，本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种PEDV裂解液，其特征在于，所述PEDV裂解液包括缓冲液、卤盐、表面活性剂和蛋白酶抑制剂；其中所述缓冲液为醋酸-醋酸铵缓冲液、磷酸盐缓冲液、氨-氯化铵缓冲液、Tris-HCl缓冲液中的一种；所述卤盐为NaCl、KCl中的至少一种；所述表面活性剂中包含Triton X-100；所述蛋白酶抑制剂包括正矾酸钠、EDTA、亮抑酶肽中的至少一种。

2.根据权利要求1所述的裂解液，其特征在于，所述缓冲液的摩尔浓度为50～200mM，卤盐的摩尔浓度为125～300mM，蛋白酶抑制剂的摩尔浓度为≥5～20mM，表面活性剂的体积浓度为0.1～2％；优选地，所述缓冲液的摩尔浓度为100～...

【技术特征摘要】

1.一种pedv裂解液，其特征在于，所述pedv裂解液包括缓冲液、卤盐、表面活性剂和蛋白酶抑制剂；其中所述缓冲液为醋酸-醋酸铵缓冲液、磷酸盐缓冲液、氨-氯化铵缓冲液、tris-hcl缓冲液中的一种；所述卤盐为nacl、kcl中的至少一种；所述表面活性剂中包含triton x-100；所述蛋白酶抑制剂包括正矾酸钠、edta、亮抑酶肽中的至少一种。

2.根据权利要求1所述的裂解液，其特征在于，所述缓冲液的摩尔浓度为50～200mm，卤盐的摩尔浓度为125～300mm，蛋白酶抑制剂的摩尔浓度为≥5～20mm，表面活性剂的体积浓度为0.1～2％；优选地，所述缓冲液的摩尔浓度为100～200mm，卤盐的摩尔浓度为125～300mm，蛋白酶抑制剂的摩尔浓度为≥5～20mm，表面活性剂的体积浓度为0.5～1.5％。

3.根据权利要求1所述的裂解液，其特征在于，所述表面活性剂为triton x-100、triton x-100与sds组合或triton x-100与tween-20组合中的任意一种。

4.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：贺笋，杨延丽，陈晓洁，陈诗雅，杜久斌，蔡清波，
申请(专利权)人：天康生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：