一种富含鱼类抗原递呈分子MHCII阳性外泌体的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种富含抗原递呈分子MHCII阳性外泌体的制备方法，属于生物技术领域。本发明专利技术的方法包括如下步骤：鳗弧菌摇至对数生长期后将其灭活；取灭活的鳗弧菌溶液对鱼类进行腹腔注射，诱导6‑24h；将鱼类麻醉后，用注射器沿尾静脉抽取外周血；去除外周血后，用注射器向鱼类腹腔中注射无血清L15培养基；按摩鱼腹后，使用注射器沿腹腔上沿抽出腹腔液；最后采用连续梯度离心方法分离腹腔液得到MHCII阳性外泌体。本发明专利技术制备的富含抗原递呈分子MHCII阳性的外泌体在促进T细胞活化及疫苗免疫效力方面具有显著的作用。本发明专利技术通过适用于鱼类的刺激物和独特的鱼类腹腔灌洗方法创造性地建立了一种高效、高纯度和高得率的鱼类富含抗原递呈分子MHCII阳性外泌体的制备方法，具有重要的科学意义和应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于涉及一种富含抗原递呈分子mhcii阳性外泌体的制备方法和应用，属于生物。

技术介绍

1、外泌体是一种包含了小rna、信使rna和蛋白质等复杂分子模式的小膜泡（40-200nm），主要来源于溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体，经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中，具有将“分子货物”转移到其它细胞并触发生理反应的能力。外泌体可由不同类型的细胞分泌，参与许多生理功能和病理过程，如抗原呈递、细胞活化、肿瘤生长与迁移等。但目前，关于鱼类外泌体的研究报道较少，主要是由于无法获得大量高纯度的外泌体，无法满足后续功能性实验的需要。

2、适应性免疫反应的充分启动取决于抗原递呈细胞表面的主要组织相容性复合体ii（mhcii）中病原体衍生肽的呈递，该复合物被t细胞受体识别并激活cd4+t细胞，同时分泌细胞因子，进一步调控免疫反应。有研究报道外泌体具有特异性免疫反应启动的潜力，外泌体可以携带mhcii类分子直接或间接激活cd4+t细胞，从而特异性地诱导t细胞免疫反应，为实现t细胞靶向给药和靶向治疗提供可能。

3、但目前分离得到富含mhcii本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种富含鱼类抗原递呈分子MHCII阳性外泌体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.如权利要求1所述外泌体的制备方法，其特征在于，所述鳗弧菌的灭活方法为采用甲醛溶液，37oC，180rpm使其灭活。

3.如权利要求1所述外泌体的制备方法，其特征在于，所述鱼类为牙鲆。

4.权利要求1-3任一项所述富含鱼类抗原递呈分子MHCII的阳性外泌体用于诱导CD4+T淋巴细胞活化的应用。

5.权利要求1-3任一项所述富含鱼类抗原递呈分子MHCII的阳性外泌体用于促进鱼类疫苗免疫效力的应用。

【技术特征摘要】

1.一种富含鱼类抗原递呈分子mhcii阳性外泌体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.如权利要求1所述外泌体的制备方法，其特征在于，所述鳗弧菌的灭活方法为采用甲醛溶液，37oc，180rpm使其灭活。

3.如权利要求1所述外泌体的制备方法...

【专利技术属性】
技术研发人员：迟恒，石雪燕，战文斌，绳秀珍，邢婧，唐小千，
申请(专利权)人：中国海洋大学，
类型：发明
国别省市：