癌症治疗剂制造技术

本发明专利技术提供一种针对难治性癌症、尤其是对免疫检查点抑制剂的单独疗法或其与其他药剂的并用无效的癌症表现出治疗效果的、新型且有效的癌症免疫疗法剂。具体地，提供一种组合免疫检查点抑制剂、白细胞介素‑18(IL‑18)和T细胞生长因子(例如白细胞介素‑12(IL‑12))而成的癌症治疗剂。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】

本专利技术涉及一种组合白细胞介素-2(il-2)等t细胞生长因子、白细胞介素-18(il-18)和免疫检查点抑制剂(checkpoint inhibitor)而成的癌症治疗剂。

技术介绍

1、对于肝癌而言，存在以肝切除、肝移植、穿刺局部疗法、肝动脉化疗栓塞疗法(tace)等非药物疗法为中心的疗法，而对于与这些不相适应的进行性肝细胞癌，虽然进行利用作为血管内皮生长因子(vegf)抑制剂的索拉非尼、乐伐替尼进行的药物疗法，但即使是最新药乐伐替尼，其有效率也仅为40％左右。最近，作为免疫检查点抑制剂的抗pd-1抗体(纳武利尤单抗(nivolumab)、帕博利珠单抗(pembrolizumab))，作为针对具有索拉非尼给药史的肝细胞癌的2次治疗药物被美国承认，但帕博利珠单抗在安慰剂对照组的第iii期试验中，未通过总生存时间和无进展生存期这样的主要评价项目。虽然还研究了与vegf抑制剂的并用等，但帕博利珠单抗和乐伐替尼的并用的起效率仅止于6成左右，还也不能说具有充分的效果。

2、由于炎症性细胞因子能够强力地活化对癌症免疫重要的t细胞、自然杀伤(nk)细胞，因此期待其抗肿瘤效果而研究了各种细胞因子疗法。il-18显著促进nk细胞、cd8阳性杀伤性t细胞(ctl)、γδt细胞等的增殖。然而，il-18的单独给药在对转移性黑素瘤(metastatic melanoma)的第ii期试验中未表现出充分的有效性。本专利技术人的研究团队之前报道了通过并用免疫检查点抑制剂和il-18，被期待具有促进获得性免疫能力的nk细胞(辅助性nk细胞)、ctl增加，免疫检查点抑制剂的抗肿瘤效果增强(专利文献1、非专利文献1)。

3、另一方面，由于il-2由活化t细胞、nk细胞、树突状细胞等产生，可引起ctl、nk细胞等表现出肿瘤杀伤作用的细胞的增殖、活化，因此可通过单独给药或与通过il-2活化的nk细胞并用，临床上用于转移性肾癌、恶性黑素瘤等的治疗(非专利文献2)。本专利技术人发现在并用il-18和il-2来培养源自外周血的nk细胞时，显著促进了nk细胞的增殖、活化(非专利文献3)。

4、然而，表现出免疫刺激作用(immuno-stimulatory effect)的细胞因子另一方面存在表现出促进肿瘤增殖的作用。il-2诱导由初始t细胞(naive t cell)到th1、th2、th17、调节性t细胞(treg)的分化/活化，但由于treg增强ctl活性的抑制，因此完全不能预测通过体内给药是否能够再现在体外时的效果。对il-18也报道有其具有抗肿瘤效果和促进肿瘤增殖效果的两面性(非专利文献4)。此外，还报道有在癌症微环境中，对il-18亲和性极高的il-18结合蛋白(il-18bp)的表达增大，通过il-18、抗pd-l1抗体的治疗，il-18bp的表达进一步地增大(非专利文献5)。因此，免疫检查点抑制剂与il-18的并用在实际的人临床试验中有多少效果是未知数。

5、现有技术文献

6、专利文献

7、专利文献1：日本专利特许第6245622号公报

8、非专利文献

9、非专利文献1：ma,z.et al.,clin.cancer res.,22(12)：2969-2980(2009)

10、非专利文献2：公益社团法人/日本临床肿瘤学会编写，“癌症免疫疗法准则”(金原出版株式会社)，第15页，2016年12月20日发行

11、非专利文献3：el-darawish,y.et al.,j.leukoc.biol.,104：253-264(2018)

12、非专利文献4：fabbi,m.et al.,j.leukoc.biol.,97：665-675(2015)

13、非专利文献5：zhou,t.et al.,nature,583(7817)：609-614(2020)

技术实现思路

1、专利技术要解决的问题

2、本专利技术的目的在于提供一种对难治性癌症、尤其是免疫检查点抑制剂的单独疗法或其与其他药剂并用无效的癌症表现出治疗效果的、新型且有效的癌症免疫疗法剂。

3、解决问题的手段

4、虽然作为难以治疗的肝癌模型在使用自然发病型的小鼠，但对于该模型几乎没有有效的治疗药物，作为对进行性肝细胞癌的首发治疗(primary therapy)的标准药的乐伐替尼也无效。本专利技术人使用敲除了编码p-糖蛋白的mdr2基因的自然发病型肝细胞癌模型小鼠(mdr2 ko小鼠)，研究了可在植入大肠癌细胞的腹膜接种模型、植入黑素瘤细胞的肺转移模型中确认到效果的免疫检查点抑制剂(抗pd-l1抗体)与il-18并用给药的治疗效果。其结果确认了肿瘤尺寸的增大倾向，暗示了免疫检查点抑制剂与il-18的并用对难治性肝癌不发挥充分的效果。

5、在此，本专利技术人进行深入研究后结果发现，对于mdr2 ko小鼠，除上述2种药剂之外，进一步并用给药t细胞生长因子(例如il-2)时，表现出肿瘤尺寸缩小的倾向。通过免疫检查点抑制剂和il-2这2种药剂的并用，确认了肿瘤尺寸增大的倾向，不能获得充分的治疗效果。通过并用该3种药剂，相较于任意的2种药剂的并用，作为肿瘤标志物的甲胎蛋白(afp)的血清水平都显著降低。此外，通过并用该3种药剂，抗肿瘤性细胞因子(干扰素-γ(ifn-γ)、肿瘤坏死因子-α(tnf-α))的产生显著增大，相较于任意的2种药剂的并用，都表现出产量增大的倾向。

6、由于并用该3种药剂引起的肿瘤缩小、afp值降低、ifn-γ/tnf-α产量增大的效果可因抗cd8抗体的给药而被无效化，因此对于3种药剂并用的治疗效果而言，至少cd8阳性t细胞被认为是重要的。此外，由于3种药剂并用的肿瘤缩小效果可因抗asialogm1抗体的给药而被无效化，因此对于3种药剂并用的治疗效果而言，也暗示了nk细胞的参与。

7、在研究暗示il-18引起癌症治疗障碍的il-18bp在mdr2 ko小鼠中的表达时，血清中的il-18bp的蛋白质水平在抗pd-l1抗体和il-18的2种药剂并用中无变化，相对于在抗pd-l1抗体和il-2的2种药剂并用中反而增加，与此相对地，在并用3种药剂中显著降低il-18bp的表达。在调查肝细胞癌患者以及肝内胆管癌患者的血清中的il-18bp蛋白水平时，虽然相较于健康人，在肝细胞癌患者中il-18bp水平在上升，但在患者之间也发现了最大4倍以上的差异，因此3种药剂并用疗法暗示了可能il-18bp的血清水平上升对癌症患者有效。

8、本专利技术人基于这些知识进行进一步深入研究的结果，完成了本专利技术。

9、即，本专利技术提供以下内容。

10、[1]一种癌症治疗剂，将免疫检查点抑制剂、白细胞介素-18(il-18)和t细胞生长因子组合而成。

11、[2]根据[1]所述的药剂，t细胞生长因子为由白细胞介素-2(il-2)、白细胞介素-15(il-15)和白细胞介素-7(il-本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种癌症治疗剂，将免疫检查点抑制剂、白细胞介素-18即IL-18和T细胞生长因子组合而成。

2.根据权利要求1所述的药剂，T细胞生长因子为由白细胞介素-2即IL-2、白细胞介素-15即IL-15和白细胞介素-7即L-7所构成的群中选择的1种以上的细胞因子。

3.根据权利要求2所述的药剂，包含IL-2作为T细胞生长因子。

4.根据权利要求1～3中任一项所述的药剂，免疫检查点抑制剂为由抗PD-L1抗体、抗PD-1抗体、抗CTLA4抗体、抗LAG-3抗体和抗TIM-3抗体所构成的群中选择的1种以上的抗体。

5.根据权利要求1～4中任一项所述的药剂，其面向对免疫检查点抑制剂的单独疗法或免疫检查点抑制剂和IL-18的并用疗法具有抗性的癌症。

6.根据权利要求1～5中任一项所述的药剂，其向血清IL-18结合蛋白即IL-18BP水平为10pg/mL以上的对象给药。

7.根据权利要求1～6中任一项所述的药剂，所述癌症为炎症相关性癌症。

8.根据权利要求7所述的药剂，所述炎症相关性癌症为消化道癌症。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.一种癌症治疗剂，将免疫检查点抑制剂、白细胞介素-18即il-18和t细胞生长因子组合而成。

2.根据权利要求1所述的药剂，t细胞生长因子为由白细胞介素-2即il-2、白细胞介素-15即il-15和白细胞介素-7即l-7所构成的群中选择的1种以上的细胞因子。

3.根据权利要求2所述的药剂，包含il-2作为t细胞生长因子。

4.根据权利要求1～3中任一项所述的药剂，免疫检查点抑制剂为由抗pd-l1抗体、抗pd-1抗体、抗ctla4抗体、抗lag-3抗体...

【专利技术属性】
技术研发人员：田中义正，木村公则，
申请(专利权)人：国立大学法人长崎大学，
类型：发明
国别省市：