一种重组Fas相关死亡结构域蛋白的制备方法及其应用技术

本发明专利技术属生物技术领域，具体涉及一种全长ＦＡＤＤ蛋白质的制备方法。该制备方法利用重组ＤＮＡ技术表达和制备稳定性好、产量高、与野生型ＦＡＤＤ具有完全相同高级结构、具有诱导细胞凋亡活性的全长ＦＡＤＤ蛋白质。其分离纯化过程更加便利、快捷、产率高。本发明专利技术制备的全长ＦＡＤＤ蛋白质能够用于制备诱导细胞凋亡的药物，用于治疗肿瘤和类风湿性关节炎等疾病。本发明专利技术还提供了在原核表达系统表达一种全长ＦＡＤＤ蛋白质的表达方法，能够有效提高该全长ＦＡＤＤ蛋白质的产量。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属基因工程生物
二、
技术介绍
-FADD (Fas-associated death domain protein， Fas相关死亡结构域蛋白) 是Chinnaiyan、 Boldin等两个研究小组利用酵母双杂交系统于1995年同时筛选 得到的一个能够与死亡受体Fas胞浆区特异性作用的蛋白，由于其包含一个与 Fas蛋白质的死亡结构域高度同源的结构域，因而被命名为Fas相关死亡结构域 蛋白(Fas-associated death domain protein, FADD) [Boldin， M. P.等人，1995， J. Biol. Chem. 270:7795-7798; Chinnaiyan, A. M.等人，1995， Cell 81:505-512]。人FADD基因编码208个氨基酸，分子量为23kDa,可分为三个功能区域， 包括与凋亡相关的N端约76个氨基酸的DED (death effect domain,死亡效应 结构域)和C端70个氨基酸的DD (death domain,死亡结构域)，以及在非凋 亡中发挥作用的大约20个氨基酸的C末端片段。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种全长ＦＡＤＤ蛋白质的制备方法，其特征是利用基因工程技术制备一种第２５位Ｐｈｅ突变成Ｔｙｒ的全长ＦＡＤＤ蛋白质，其Ｎ端或Ｃ端可以分别融合具有帮助蛋白质纯化作用的融合蛋白或短肽标签。

【技术特征摘要】
1.一种全长FADD蛋白质的制备方法，其特征是利用基因工程技术制备一种第25位Phe突变成Tyr的全长FADD蛋白质，其N端或C端可以分别融合具有帮助蛋白质纯化作用的融合蛋白或短肽标签。2. 根据权利要求l所述的一种全长.FADD蛋白质的制备方法，其特征是合成或者克隆该全长FADD基因、构建该全长FADD表达质粒，在常见的基因工程表达体系中进行基因工程表达。3. 根据权利要求1所述的一种全长FADD蛋白质的制备方法，其特征是将该全长FADD蛋白质原核表达菌株在1...

【专利技术属性】
技术研发人员：华子春，陈媛，杜攀，黄启来，
申请(专利权)人：南京大学，
类型：发明
国别省市：84[中国|南京]