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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于微生物,尤其涉及一种抗生素溶杆菌lmt16及其应用。
技术介绍
1、目前,根癌病(crown gall)又名冠瘿病,是由土壤杆菌属(agrobacterium spp.)根癌土壤杆菌(agrobacterium tumefaciens)引起的一种世界范围内的细菌性病害。根癌土壤杆菌属于根瘤菌科土壤杆菌属,土壤杆菌根据致病性和寄主范围可分为放射土壤杆菌(agrobacterium radiobacter)、根癌土壤杆菌(agrobacterium tumefaciens)、发根土壤杆菌(agrobacterium rhizogenes)以及悬钩子土壤杆菌(agrobacterium rubi)。根癌土壤杆菌具有较广的寄主范围,可以侵染果树、观赏性植物等93个科331个属643种不同植物,其主要危害植物根部,引起植物根部产生瘿瘤,严重危害植物的正常生长,造成蓝莓产量下降和果实品质降低,发病严重时可使蓝莓整株死亡。
2、根际作为植物与土壤相互交换能量物质的主要场所,也是微生物繁殖与生存的主要场所之一,近年来根际微生物和植物之间的密切关系已成为全球研究人员关注和研究的重点。根际土壤中存在各种类型的微生物,某些微生物在植物生长过程中起到负面影响,会影响植株与根际土壤之间的能量转换进而造成植株生长缓慢,也会引起植株病害发生;同时也有部分微生物会对植株生长起到积极作用,可以促进植物根系对营养成分的吸收与转化,还可以抑制某些病原微生物的生长与繁殖,如木霉菌、溶杆菌、假单胞菌和芽孢杆菌等,这些能够促进植物生长,抑制病原菌
3、溶杆菌是一类在自然界中广泛存在的革兰氏阴性菌株,可降解多种多糖,对病原细菌、酵母菌、丝状真菌、线虫和卵菌具有溶解作用。
4、溶杆菌具有防治多种植物病害的能力,但经文献检索,尚未见抗生素溶杆菌可抑制根癌土壤杆菌引起蓝莓根癌病的发生,并应用于大田防治蓝莓根癌病。
5、通过上述分析,现有技术存在的问题及缺陷为:根癌病主要发生在植株根部,从感染病原菌到地上组织表现出症状需要很长一段。一旦植株发病就很难控制,严重时造成极大的经济损失。根癌病已成为危害我国蓝莓产业发展的重要病害,在云南多个蓝莓种植基地不同程度的发生,引起蓝莓果实品质下降或植株死亡,造成较大经济损失,蓝莓根癌病问题急需解决。当前蓝莓根癌病的防治主要是化学防治和农业防治,国内生物防治蓝莓根癌病的报道较少,根癌病的致病机理尚不明确,有报道的生防菌株试验研究均未在田间规模化应用,国内也未见登记新的防治根癌病的生防制剂,生防菌株具体的生防机制也不明确,后续还需继续研究,为蓝莓根癌病的绿色防控提供安全有效的技术支撑和理论依据。
技术实现思路
1、针对现有技术存在的问题,本专利技术提供了一种抗生素溶杆菌lmt16用于蓝莓根癌病的田间防治。
2、本专利技术的目的是提供一种抗生素溶杆菌(lysobacter antibioticus)lmt16,其特征在于,保藏编号为cgmcc no.27317。
3、本专利技术的另一目的在于提供一种所述抗生素溶杆菌lmt16在防治蓝莓根癌病中的应用。
4、本专利技术的另一目的在于提供一种所述抗生素溶杆菌lmt16在防治蓝莓根癌病中的应用的方法,所述抗生素溶杆菌lmt16在防治蓝莓根癌病中的应用的方法,包括以下步骤:
5、第一步,将抗生素溶杆菌lmt16活化后转接到固体平板培养基上,恒温培养48h,获得纯化菌种;
6、第二步,将获得的纯化菌种接种到液体培养基的三角瓶中,于恒温振荡培养箱中培养,获得种子液;
7、第三步,将种子液转接至装有液体培养基的三角瓶中,振摇培养,获得发酵液备用;
8、第四步,选择3年生蓝莓植株移栽至盆中,采用第三步备好的发酵液对植株进行灌根处理,用量为100ml/株,实现对蓝莓根癌病的防治;
9、所述第一步中的固体培养基配方为:甘露醇1%、酵母膏0.3%、牛肉膏0.1%、磷酸氢二钾0.05%、氯化钠0.02%、硫酸镁0.02%、琼脂粉2%,蒸馏水定容至1l,ph调至7.0。
10、所述第二步中的液体培养基配方为:甘露醇1%、酵母膏0.3%、牛肉膏0.1%、磷酸氢二钾0.05%、氯化钠0.02%、硫酸镁0.02%、琼脂粉2%,蒸馏水定容至1l,ph调至7.0。
11、所述第二步中,将获得的菌种接种到液体培养基的100ml三角瓶中,每瓶装50ml,于恒温振荡培养箱中28℃,150r/min培养24h。
12、所述第三步中的液体发酵培养基配方为:工业蔗糖1%、工业蛋白胨3%、磷酸氢二钾0.0023%、硫酸镁0.02%,蒸馏水定容至1l,ph调至6.0。
13、所述第三步中将种子液转接至装有500ml液体培养基的1000ml三角瓶中,28℃、150r/min振摇培养48h。
14、进一步,得到抗生素溶杆菌lmt16发酵液。
15、进一步,发酵液作为生防菌在蓝莓根癌病上的应用。
16、结合上述的技术方案和解决的技术问题,本专利技术所要保护的技术方案所具备的优点及积极效果为:
17、第一、本专利技术涉及一株抗生素溶杆菌及其应用,属生物
,其生产菌株为抗生素溶杆菌(lysobacter antibioticus),命名为lmt16,已于2023年5月18日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为cgmcc no.27317。该菌株抑菌谱广、抑菌能力强,对蓝莓根癌病菌、水稻条斑病菌、常春藤叶斑病菌等病原细菌以及水稻稻瘟病菌、玉米小斑病菌、草莓灰霉病菌等病原真菌都表现广谱抑菌作用,抑制率均在50%以上,其中lmt16对蓝莓根癌病菌的致瘤有很好的抑制作用,抑制效果在82%以上,以上结果说明抗生素溶杆菌lmt16对多种病原细菌和病原真菌具有抑菌广谱性,应用潜力大。
18、本专利技术能够用于制备防治多种经济作物如蓝莓、草莓和水稻等病害的生防制剂,具有安全、高效的特点。
19、第二,本专利技术提供的抗生素溶杆菌可以用于蓝莓根癌病的防治,使得蓝莓根癌病的危害减轻并提高蓝莓产量和品质。
20、本专利技术中菌株lmt16对多种病原菌具有拮抗作用,易于进行产业化生产,lmt16能够用于制备大田防治蓝莓根癌病生物制剂。
21、本专利技术的抗生素溶杆菌lmt16生物制剂可通过灌根、喷雾的方式施用,防治蓝莓根癌病,且兼有增产增质的作用,可应用于田间病害防治工作。
22、本专利技术通过温本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种抗生素溶杆菌LMT16,其特征在于,所述抗生素溶杆菌LMT16,保藏编号为CGMCCNo.27317。
2.一种如权利要求1所述抗生素溶杆菌LMT16在防治蓝莓根癌病中的应用。
3.一种如权利要求2所述抗生素溶杆菌LMT16在防治蓝莓根癌病中的应用的方法,其特征在于,所述抗生素溶杆菌LMT16在防治蓝莓根癌病中的应用的方法,包括以下步骤:
4.如权利要求3所述的抗生素溶杆菌LMT16在防治蓝莓根癌病中的应用的方法,其特征在于,所述第一步中的固体培养基配方为:甘露醇1%、酵母膏0.3%、牛肉膏0.1%、磷酸氢二钾0.05%、氯化钠0.02%、硫酸镁0.02%、琼脂粉2%,蒸馏水定容至1L,pH调至7.0。
5.如权利要求3所述的抗生素溶杆菌LMT16在防治蓝莓根癌病中的应用的方法,其特征在于,所述第二步中的液体培养基配方为:甘露醇1%、酵母膏0.3%、牛肉膏0.1%、磷酸氢二钾0.05%、氯化钠0.02%、硫酸镁0.02%、琼脂粉2%,蒸馏水定容至1L,pH调至7.0。
6.如权利要求3所述的抗生素溶杆菌LMT16
7.如权利要求3所述的抗生素溶杆菌LMT16在防治蓝莓根癌病中的应用的方法,其特征在于,所述第三步中的液体发酵培养基配方为:工业蔗糖1%、工业蛋白胨3%、磷酸氢二钾0.0023%、硫酸镁0.02%,蒸馏水定容至1L,pH调至6.0。
8.如权利要求3所述的抗生素溶杆菌LMT16在防治蓝莓根癌病中的应用的方法,其特征在于,所述第三步中将种子液转接至装有500mL液体培养基的1000mL三角瓶中,28℃、150r/min振摇培养48h。
9.如权利要求3所述的抗生素溶杆菌LMT16在防治蓝莓根癌病中的应用的方法,其特征在于,得到抗生素溶杆菌LMT16发酵液。
10.如权利要求9所述的抗生素溶杆菌LMT16在防治蓝莓根癌病中的应用的方法,其特征在于,发酵液作为生防菌在蓝莓根癌病上的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种抗生素溶杆菌lmt16,其特征在于,所述抗生素溶杆菌lmt16,保藏编号为cgmccno.27317。
2.一种如权利要求1所述抗生素溶杆菌lmt16在防治蓝莓根癌病中的应用。
3.一种如权利要求2所述抗生素溶杆菌lmt16在防治蓝莓根癌病中的应用的方法,其特征在于,所述抗生素溶杆菌lmt16在防治蓝莓根癌病中的应用的方法,包括以下步骤:
4.如权利要求3所述的抗生素溶杆菌lmt16在防治蓝莓根癌病中的应用的方法,其特征在于,所述第一步中的固体培养基配方为:甘露醇1%、酵母膏0.3%、牛肉膏0.1%、磷酸氢二钾0.05%、氯化钠0.02%、硫酸镁0.02%、琼脂粉2%,蒸馏水定容至1l,ph调至7.0。
5.如权利要求3所述的抗生素溶杆菌lmt16在防治蓝莓根癌病中的应用的方法,其特征在于,所述第二步中的液体培养基配方为:甘露醇1%、酵母膏0.3%、牛肉膏0.1%、磷酸氢二钾0.05%、氯化钠0.02%、硫酸镁0.02%、琼脂粉2%,蒸馏水定容至1l,ph调至7.0。
6.如...
【专利技术属性】
技术研发人员:姬广海,何浩雯,刘学瑞,王菊香,何依璐,崔兴国,赵项武,
申请(专利权)人:云南农业大学,
类型:发明
国别省市:
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