【技术实现步骤摘要】
：本专利技术涉及一种双极电极电化学发光(bpe-ecl)生物传感器的制备，以及所述生物传感器检测四环素和林可霉素的方法应用。
技术介绍
0、
技术介绍
：
1、电化学发光(ecl)技术结合了电化学的可控性和化学发光的灵敏性，作为一种强有力的分析技术被广泛应用于各个领域[li,h.k.；cai,q.q.et,al.biosensbioelectron.,2024,245,115835.]。双极电极(bpe)是一种置于溶液电场中的电导体，当电场达到一定强度时，溶液中的电活性物质会在电导体两端发生氧化还原反应[beladi-mousavi,s.m.；salinas,g.et,al.chem.sci.,2022,13,14277.]。近年来，研究者将bpe与ecl技术相结合，构建出bpe-ecl传感器，以其高通量、低成本、高灵敏度成为研究热点[cho,y.k.；kim,h.et,al.sci.adv.,2022,8,eabq4022.]。四环素、林可霉素等抗生素的过度使用可导致高水平的有毒残留物，并且人类从环境中过量摄入可引起严重的副作用[wang,x.y.；rong,x.j.et,al.anal.chem.2022,94,3735–3742.]。因此本专利技术构建了一种新型的bpe-ecl生物传感器，实现对四环素和林可霉素的超灵敏同时检测及成像。
技术实现思路
0、
技术实现思路
：
1、本专利技术的目的是提供一种bpe-ecl生物传感器的制备方法，以及所述生物传感器对四
2、具体包括以下步骤：
3、步骤1.cumoox的制备：0.15g单宁酸和0.125g两水合钼酸钠超声溶解到10ml二次水中(溶液a)，0.03g两水合氯化铜溶解到1ml二次水中(溶液b)，将溶液b逐滴加入到溶液a中，搅拌10分钟，然后往溶液中加入50μl浓盐酸，搅拌1小时，然后转移至20ml高压反应釜中，在180℃下反应10小时，产物用二次水纯化多次，60℃真空干燥。
4、步骤2.hof-101的制备：将300mg 1,3,6,8-四(4-羧基苯)芘溶于45mln,n-二甲基甲酰胺中，然后往上述溶液中加入180ml甲醇搅拌1分钟，室温静置12小时，得到hof-101黄色块状晶体。
5、步骤3.cdse qds的制备：1.6ml 0.1m的氯化铬溶液加入到50ml二次水中，然后将72.5mg六偏磷酸钠和34.6μl巯基丙酸加入到上述溶液中，利用6m氢氧化钠将溶液ph调至9，然后将0.8ml 0.02m的亚硒酸钠加入到上述溶液中，溶液在100℃下回流10分钟后加入3.7ml水合肼，溶液继续回流10小时得到cdse qds，产物利用异丙醇纯化，重新分散到二次水中备用。
6、步骤3.制备cumoox-aptamerⅱ(tet)and cumoox-aptamer(lin)探针:将aptamerⅱ(tet)and aptamer(lin)链提前用三(2-羧乙基)膦(tcep)预处理消除二硫键,100μl 200μg·ml-1cumoox分别与100μl 5μm tetaptamer、100μl 5μm lin aptamer链混合，在37℃下孵育5小时，产物离心，二次水纯化，最后重新分散到0.1m pbs。
7、aptamerⅱ(tet)序列：sh–ttt tgg gtt ggt ccc act gcg cgt gga tcc gag ctccac gtg
8、aptamer(lin)序列：sh–ttt tcg cgt gat gtg gtc gat gcg ata cgg tga gtcgcg ccacgg ctacacacg tct cag cga
9、步骤4.检测tet和lin：对于通道1，将20μl 5μm的tetaptamerⅰ链加入到左槽的双极电极孔中，并在37℃下孵育3小时，然后加入20μl 1％的牛血清蛋白(bsa)，在37℃下孵育1小时用于去除非特异性吸附，然后加入不同浓度的tet，在37℃下孵育1小时，然后加入20μl cumoox-aptamerⅱ(tet)探针，在37℃下孵育1小时，右槽的双极电极孔加入20μl 1mg/mlhof-101，自然干燥，上述每一步都需要用pbs润洗去除非特异性吸附，然后在左槽中加入100μl 0.1m pbs含有0.1m h2o2，右槽中加入100μl 0.1m pbs含有0.1m三正丙胺(tpra)用于检测tet。
10、aptamerⅰ(tet)序列：nh2–ttt tcg tac gga att cgc tag ccc ccc ggc aggccacgg ctt
11、对于通道2，将20μl 0.5mg/ml mxene加入到左槽驱动电极孔，自然干燥，然后加入20μlcumoox-aptamer(lin)探针，在37℃下孵育2小时，然后加入20μl不同浓度的lin，在37℃下孵育1小时，将20μl纯化的cdse qds加入到右槽的双极电极孔，自然干燥，上述每一步都用pbs润洗去除非特异性吸附，然后在左槽中加入100μl 0.1m pbs含有0.1mh2o2，右槽中加入100μl 0.1m pbs含有0.1m过硫酸钾用于检测lin。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种双极电极电化学发光用于四环素和林可霉素传感检测及成像分析的方法，其特征是：利用CuMoOx电催化剂调控HOF-101和CdSe QDs的电化学发光信号，构建空间-电位-颜色同时分辨的生物传感器，实现对四环素TET和林可霉素LIN的同时检测及成像分析；
【技术特征摘要】
1.一种双极电极电化学发光用于四环素和林可霉素传感检测及成像分析的方法，其特征是：利用cumoox电催化剂调控hof-101和cd...
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。