鸡肉风味物质基因诊断试剂盒及使用方法技术

技术编号:4150151 阅读:298 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术涉及一种鸡肉风味物质基因诊断试剂盒及使用方法,属于分子生物学技术领域,本发明专利技术试剂盒包括ADSL基因PCR扩增的上下游引物混合物P1、ADSL基因LDR反应的探针的混合物L1、A-FABP基因PCR扩增上下游引物混合物P2、A-FABP基因LDR反应的探针的混合物L2及Tag酶、DNA连接酶;所述的方法以LDR方法检测这两个基因的基因型,PCR扩增SNP位点所在片段,PCR产物的连接酶检测反应;ADSL基因第二外显子C3484T突变对IMP有显著影响,TT基因型个体的IMP含量最高且显著高于CC和CT;A-FABP基因第一外显子C51T突变对IMF有显著影响,TT基因型个体的IMP含量最高显著高于CC和CT,TTTT基因型组合为鸡肉风味物质含量最高的肉鸡个体。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种,属于分子生物学

技术介绍
优质肉鸡业是我国的特色产业,越来越多的消费者开始追求鸡肉的风味,2008 年生产量超过42亿只,市场份额已占到肉鸡总产量55%以上,并呈逐年上升趋势。以往 只针对肉鸡生长性能和体组成的传统选育,降低了鸡肉风味物质下降,而仅凭传统选育 手段,很难达到肉鸡产量、生长性能与鸡肉风味物质同时提高的目标。目前,随着分子 生物学技术的发展,利用分子遗传标记来辅助选育既具有良好肉品质风味,又不影响肉 鸡生长速度和体重的优质肉鸡品种已成为现代家禽育种的发展方向。 优质肉鸡育种中肉质性状的选育是关键环节,而肉质的风味是肉质性状的一个 非常重要的指标。肌肉肌苷酸(IMP)含量是影响肉质风味的重要因素,而腺苷琥珀酸裂 解酶(ADSL)是IMP合成过程中的关键酶之一,对于最终肌肉肌苷酸含量具有重要的影 响。肌内脂肪(IMF)与肉质和口感呈正相关,影响肉质的嫩度、剪切力、风味和多汁性, 而脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白基因(A-FABP)的遗传变异对肌内脂肪(IMF)的含量有显著 影响。近几年的研究表明,ADSL基因(季从亮等,2004;束婧婷等,2007本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种鸡肉风味物质基因诊断试剂盒,其特征是,所述的试剂盒包括ADSL基因PCR扩增的上下游引物混合物P1、ADSL基因LDR反应的探针的混合物L1、A-FABP基因PCR扩增上下游引物混合物P2、A-FABP基因LDR反应的探针的混合物L2及Tag酶和DNA连接酶。

【技术特征摘要】
一种鸡肉风味物质基因诊断试剂盒,其特征是,所述的试剂盒包括ADSL基因PCR扩增的上下游引物混合物P1、ADSL基因LDR反应的探针的混合物L1、A-FABP基因PCR扩增上下游引物混合物P2、A-FABP基因LDR反应的探针的混合物L2及Tag酶和DNA连接酶。2. 根据权利要求1所述的鸡肉风味物质基因诊断试剂盒,其特征是,ADSL基因PCR 扩增的上下游引物混合物Pl表示的信息为ADSL上游引物序列5' -CACTGCTGTCCCAAAGCTG-3', ADSL下游引物序列5' -GCAGGCAGGAAAATGAAAGT-3'。3. 根据权利要求1所述的鸡肉风味物质基因诊断试剂盒,其特征是,ADSL基因LDR 反应的探针的混合物L1表示三根探针,三根探针表示的信息为A探针ADSL_MODIFY序列B探针ADSL_C序列 C探针ADSL_T序列5' -TTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTACCGTGTTATCCCCTACGTAACA^4. 根据权利要求1所述的鸡肉风味物质基因诊断试剂盒,其特征是, PCR扩增上下游引物混合物P2表示的信息为A-FABP上游引物序列 5' -GACCAGTTTGTGGGCACCT-3', A-FABP下游弓I物序歹lj 5' -TTTCTCACCCAGCTCTTTCA-3'。5. 根据权利要求1所述的鸡肉风味物质基因诊断试剂盒,其特征是,A-FABP基因 LDR反应的探针的混合物L2表示三根探针,三根探针表示的信息为D探针A-FABP_MODIFY序列E探针A-FABP_C序列 F探针A-FABP_T序列6. —种使用权利要求1所述诊断试剂盒的方法,其特征是,所述方法包括下列步骤1) 、 PCR扩增SNP位点所在片段;2) 、 PCR产物的连接酶检测反应。7. 根据权利要求6所述的使用权利要求1诊断试剂盒的方法,其特征是,所述的PCR 扩增SNP位点所在片段有以下步骤1)、 PCR扩增反应体系准备,在200iU的PCR薄壁管中,加入20iiL PCR反应体 系,充分混匀后短暂离心,最后加入20iU石蜡油;20iiL PCR反应体系由liU 50ng/ iUDNA模板、2ii 1 IOXPCR反应缓冲液、0.6 ii 1 lOOmM Mg2+、 2 ii 1 20mM dNTP、 4 ii 1 5XQ-solution、 0.2 y 1 5U/y 1 Tag酶、9.8ul d胆20、 0.4 y 1 5pM/y 1上下游引物混合物Pl 或P2组成;2)...

【专利技术属性】
技术研发人员:李慧芳朱文奇陈宽维束婧婷宋卫涛韩威徐文娟汤青萍章明
申请(专利权)人:江苏省家禽科学研究所
类型:发明
国别省市:32[]

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1