黑翅土白蚁OfArgonaute1基因及其应用制造技术

本发明专利技术公开了黑翅土白蚁OfArgonaute1基因及其应用，包括通过黑翅土白蚁OfArgonaute1(OfAgo1)获得的dsRNA，所述OfAgo1的核苷酸序列如SEQ ID N0:1所示。本发明专利技术针对该基因设计了dsRNA（dsOfAgo1），进一步构建dsRNA‑HT115工程菌株。黑翅土白蚁用dsOfAgo1处理后，再使用粘质沙雷氏菌处理，会导致死亡率显著提高，说明dsOfAgo1提高了生防菌的毒力，为进一步提高防治黑翅土白蚁的生物防治或化学防治的效果提供理论依据。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物，具体涉及黑翅土白蚁ofargonaute1基因及其应用。

技术介绍

1、白蚁是世界性害虫，危害面涉及房屋建筑物、水利堤坝、管线设施以及农林植物等方面，每年造成极大的经济损失。黑翅土白蚁odontotermes formosanus(shiraki)属蜚蠊目白蚁科大白蚁亚科土白蚁属的土栖性白蚁，是为害农林植物最严重的白蚁之一，可危害多种农作物和林木。此外，黑翅土白蚁还是水利堤坝的重要害虫，为害严重时可造成崩堤垮坝。该白蚁分布范围广，主要以树根、皮层、幼苗、幼树、庄稼秸杆、甘蔗、竹根、草根、水稻等为取食对象，也能取食牛粪，食性很杂。黑翅土白蚁在同一群体内由于所处的地位不同，分工不同，有不同的品级分化，包括蚁王与蚁后、有翅成虫、兵蚁、工蚁4个品级。从外部形态和生理机能上可将白蚁个体分为生殖型和非生殖型两大类。黑翅土白蚁的防治手段主要包括物理防治、生物防治和化学防治等。物理防治主要利用物理屏障如砂砾、防水薄膜、惰性粉或塑料挡板等，保护建筑物等不受白蚁危害。化学药剂防治黑翅土白蚁是目前最主要的防治手段，但是化学药剂对环境产生较大的负面影响。生物防本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种防治黑翅土白蚁的试剂，其特征在于，包括通过黑翅土白蚁OfAgo1获得的dsRNA，所述黑翅土白蚁OfAgo1的核苷酸序列如SEQ ID N0:1所示。

2.如权利要求1所述的试剂，其特征在于，还包括生防菌。

3.如权利要求2所述的试剂，其特征在于，所述生防菌为粘质沙雷氏菌。

4.一种如权利要求1所述试剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）以OfAgo1基因序列的ORF框为基础，通过在线网站（http://sidirect2.rnai.jp/）预测可能的RNAi位点，使用在线网站(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/...

【技术特征摘要】

1.一种防治黑翅土白蚁的试剂，其特征在于，包括通过黑翅土白蚁ofago1获得的dsrna，所述黑翅土白蚁ofago1的核苷酸序列如seq id n0:1所示。

2.如权利要求1所述的试剂，其特征在于，还包括生防菌。

3.如权利要求2所述的试剂，其特征在于，所述生防菌为粘质沙雷氏菌。

4.一种如权利要求1所述试剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）以ofago1基因序列的orf框为基础，通过在线网站（http://sidirect2.rnai.jp/）预测可能的rnai位点，使用在线网站(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/tools/primer-blast/index.cgi?link_loc=blast%20home)设计特异性扩增引物，并在引物两端加上酶切位点，最终dsrna合成引物的序列。以提取的黑翅土白蚁rna反转录后得到的cdna为模版，利用上游引物（5’-3’）ctagctagccagtctgtgaggccttccca和下游引物（5’-3’）ccgctcgagctgagcgggctgttgctt，进行pcr扩增，得到目的条带；（2）将所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：汤方，王志强，
申请(专利权)人：南京林业大学，
类型：发明
国别省市：