高密度脂蛋白芯片电泳方法技术

本发明专利技术公开了一种高密度脂蛋白芯片电泳方法，包括选择缓冲体系、选择电泳芯片、血清标本及标记、电泳等步骤。本发明专利技术基于芯片电泳技术结合激光诱导荧光检测系统，在４分钟内分离了血清ＨＤＬ的两种亚类，弥补了血液生化常规分析方法无法对ＨＤＬ亚类进行分析的不足。芯片电泳对脂蛋白所表现出来的高分辨、快速的分离分析能力，使它有希望成为快速、简便、高效分离检测ＨＤＬ亚类的分析手段之一。

【技术实现步骤摘要】

-本专利技术涉及一种。
技术介绍
脂蛋白是纳米大小的颗粒，根据超速离心法可将其主要分为三类高密度脂蛋白(High Density Lipoprotein, HDL)、低密度脂蛋白(low dense lipoprotein, LDL)和极低密度月旨蛋白(Very Low Density Lipoprotein, VLDL)。 HDL是一种由脂质和蛋白构成的，在形状、密度、 颗粒大小、电荷和理化特性等方面都具有较大的异质性的脂蛋白，主要 分为HDU和HDU两种亚类。目前国内外报道已从多个侧面对HDL亚类进行了分析，方法主要有 密度梯度超速离心(Density Gradient Ultracentrifugation， DGUC)法、 梯度凝胶电泳法(Gradient Gel Electrophoresis, GGE)、质子核磁共 振(Nuclear Magnetic Resonance, 丽R)光谱法、免疫亲和层析法 (I醒noaff inity Chromatography)、 双向电泳 - 免疫印迹法(Two Dimensional Electrophoresis-I鹏unob本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种高密度脂蛋白芯片电泳方法，其特征是：包括下列步骤：　（１）选择缓冲体系：缓冲液为：由４０ｍｍｏｌ／ＬＴｒｉｃｉｎｅ、５０ｍｍｏｌ／Ｌ甲基葡胺、０．０２ｍｍｏｌ／Ｌ十二烷基硫酸钠组成，ｐＨ８．５；　（２）选择电泳芯片：芯片包括十字管道 ，十字管道的横臂左右两端分别向垂直方向延伸，并分别与缓冲液废液池及缓冲液池相通，十字管道的纵臂上端与样品池相通，十字管道的纵臂下端与通过横向延伸段后与样品废液池相通；在十字管道的交叉处与缓冲液废液池之间的横臂上设置检测点；　（３）血清标本 及标记：受试者清晨空腹采血３ｍＬ，以３０００ｒ／ｍｉｎ离心１０ｍｉｎ分离血清，所取血清标本加入同体积由０．０５ｍｏ...

【技术特征摘要】
1、一种高密度脂蛋白芯片电泳方法，其特征是包括下列步骤(1)选择缓冲体系缓冲液为由40mmol/LTricine、50mmol/L甲基葡胺、0.02mmol/L十二烷基硫酸钠组成，pH8.5；(2)选择电泳芯片芯片包括十字管道，十字管道的横臂左右两端分别向垂直方向延伸，并分别与缓冲液废液池及缓冲液池相通，十字管道的纵臂上端与样品池相通，十字管道的纵臂下端与通过横向延伸段后与样品废液池相通；在十字管道的交叉处与缓冲液废液池之间的横臂上设置检测点；(3)血清标本及标记受试者清晨空腹采血3mL，以3000r/min离心10min分离血清，所取血清标本加入同体积由0.05mol/L氯化镁和1.52mmol/L磷钨酸组成的PH为6.1的沉淀剂，混匀，置室温15min后3000r/min离心15min，离心后的上清液供测定；取离心后的6μL上清液加入2μL去离子水，再加入经乙二醇∶甲醇＝9∶1混合液预先溶解的4μ...

【专利技术属性】
技术研发人员：王惠民，郑慧斐，金庆辉，丛辉，
申请(专利权)人：南通大学附属医院，
类型：发明
国别省市：32[中国|江苏]