一种用于自动化总RNA的提取方法和应用技术

本发明专利技术提供一种用于自动化总RNA的提取方法和应用，其目的在于根据RNA和DNA在盐溶液中的溶解度、带电性质的不同，以及磁珠的结合特性，使用DNA酶I并搭配特殊的DNA酶I缓冲液消化去除DNA，在该体系中，DNA酶I切割消化DNA，同时RNA仍然结合在磁珠表面，待DNA消化完全后，不需再往体系中添加溶液辅助RNA重新结合到磁珠表面，可直接转移磁珠到下一步反应液中，实现RNA的完全自动化提取，而且避免了提取反应过程中手动添加试剂造成的RNA降解风险，并且能够用于细胞、动物组织和细菌中总RNA的提取，由此解决现有磁珠法总RNA提取方法难以实现自动化的技术问题。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及rna提取，具体涉及一种用于自动化总rna的提取方法和应用。

技术介绍

1、核酸是所有生物体的遗传物质，包括脱氧核糖核酸(dna)和核糖核酸(rna)两类。rna是一个极为重要的生物分子，普遍存在于动物、植物、微生物及某些病毒和噬菌体内，能够在细胞内传递遗传信息，并且参与到生物体内各种代谢活动的调节和调控中。rna的转录和加工过程中存在很多调节机制，这些机制已经被广泛应用到基因工程和临床治疗中。

2、随着生物技术的发展，科学家们对rna的研究也越来越深入，以rna为研究对象的生物技术，包括全基因组rna测序、rna酶保护实验、rna干扰、rna递送等一系列技术，近年来飞速发展。而rna研究的第一步，就是要从各种生物样品中提取高质量的rna，rna的提取效率成为下游研究能否成功的制约因素。由于rna提取的重要地位，全球的科学家们开发了一系列rna提取方法，包括传统的酚/氯仿抽提法、主流的硅胶膜吸附柱法以及适用于自动化工作平台的磁珠法等。

3、临床上检出病毒遗传物质的rna可以作为rna病毒是否存在的依据，快速、有效、准确本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于自动化总RNA的提取方法，具体步骤包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述RNA来源于细胞、动物组织和细菌中的总RNA。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述裂解结合液，包括：1-6M异硫氰酸胍，10-50mM三羟甲基氨基甲烷，1-5mM乙二胺四乙酸二钠，0.1-1％曲拉通X-100，1-5％聚乙二醇8000，20-50％异丙醇，2％β-巯基乙醇。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述Wash I，包括0.1-1M盐酸胍，5-50mM乙酸钾，20-50％无水乙醇。

5.根据权利要求1所述...

【技术特征摘要】

1.一种用于自动化总rna的提取方法，具体步骤包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述rna来源于细胞、动物组织和细菌中的总rna。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述裂解结合液，包括：1-6m异硫氰酸胍，10-50mm三羟甲基氨基甲烷，1-5mm乙二胺四乙酸二钠，0.1-1％曲拉通x-100，1-5％聚乙二醇8000，20-50％异丙醇，2％β-巯基乙醇。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述wash i，包括0.1-1m盐酸胍，5-50mm乙酸钾，20-50％无水乙醇。

5.根据权利要求1所述的方法，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：沙晓姣，曹飞婷，方利，
申请(专利权)人：常州伯仪生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：