几种高效再生GTP的多聚磷酸激酶及其应用制造技术

本发明专利技术公开了几种高效再生GTP的多聚磷酸激酶(PPK)及其应用，属于生物技术领域。本发明专利技术在大肠杆菌BL21(DE3)中表达并获得的多聚磷酸盐激酶，能以三聚磷酸盐、四聚磷酸盐和六偏磷酸盐等为磷酸供体，高效再生GTP。将本发明专利技术的PPK用于GTP再生，GDP‑L‑岩藻糖或GDP‑甘露糖及其衍生产品合成时(如岩藻糖基乳糖)，显著提高了反应的可持续性，降低反应成本。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及几种高效再生gtp的多聚磷酸激酶及其应用，属于生物。

技术介绍

1、核苷三磷酸(ntp)是细胞内能量转移和储存的重要分子，并参与体内的各种生化反应，具有重要作用。核苷三磷酸代谢过程在物种间是相当保守的，因此通常核苷三磷酸盐是从头合成的。gtp是三羧酸循环中琥珀酸辅酶a转变为琥珀酸过程中的能量载体，它可以和atp相互转换。同时gtp对神经、代谢和心血管等有重要的作用。目前，gtp合成是通过发酵法及酶法，利用一系列酶来进行反应合成的。所以，gtp价格仍然较为昂贵。而gtp在反应中通常被降解为gdp/gmp。因此，开发一种能够将gdp/gmp再转化为gtp的酶是十分有意义的。

2、多聚磷酸激酶(ppk)分为两种，最初从大肠杆菌中分离的ppk(现在命名为ppk1)可逆地催化atp的末端pi残基转移到短链多聚磷酸(polyp)上，生成长链polyp。ppk2与ppk1没有明显的序列相似性，优先催化polyp驱动的核苷酸磷酸化，需要金属离子激发活性。ppk2家族可分为三个亚家族(i类、ii类和iii类)，i类和ii类ppk2分别催化核苷二磷酸本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.几种高效再生GTP的多聚磷酸激酶及其应用，其特征在于，所述多聚磷酸激酶((PPK)的氨基酸序列选自以下其中一种：

2.几种PPK基因，其特征在于：所述基因编码权利要求1所述的PPK。

3.携带权利要求2所述基因的重组质粒载体。

4.根据权利要求3所述的重组质粒载体，其特征在于，所述质粒包括但不限于pET28a(+)。

5.表达权利要求1所述PPK的重组微生物。

6.根据权利要求5所述的重组微生物，其特征在于：所述重组微生物为大肠杆菌BL21(DE3)。

7.权利要求1所述的PPK利用聚磷酸盐在GTP再生，GDP-...

【技术特征摘要】

1.几种高效再生gtp的多聚磷酸激酶及其应用，其特征在于，所述多聚磷酸激酶((ppk)的氨基酸序列选自以下其中一种：

2.几种ppk基因，其特征在于：所述基因编码权利要求1所述的ppk。

3.携带权利要求2所述基因的重组质粒载体。

4.根据权利要求3所述的重组质粒载体，其特征在于，所述质粒包括但不限于pet28a(+)。

5.表达权利要求1所述ppk的重组微生物。

6.根据权利要求5所述的重组微生物，其特征在于：所述重组微生物为大肠杆菌bl21(de3)。

7.权利要求1所述的ppk利用聚磷酸盐在gtp再生，gdp-l-岩藻糖或gdp-甘露糖及其衍生产品合成中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，首先，利用gdp-l-岩藻糖合成相关酶在体外多酶级联催化合成gdp-l-岩藻糖，之后联合岩藻糖基转移酶催化gdp-l-岩藻糖和乳糖生产岩藻糖基乳糖...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘珞，曹晨琦，吴林博，王睿楷，刘晨媛，蒋林彤，
申请(专利权)人：北京化工大学，
类型：发明
国别省市：