一种高产淫羊藿素的重组工程菌及其制备方法和应用技术

技术编号:41450489 阅读:16 留言:0更新日期:2024-05-28 20:39
本发明专利技术公开了一种高产淫羊藿素的重组工程菌及其制备方法和应用,属于生物工程技术领域。本发明专利技术以能合成淫羊藿素的前体山柰酚的解脂耶氏酵母为出发菌株,导入改造后的异戊二烯基转移酶tEsPT*和氧甲基转移酶OsOMTm,成功在解脂耶氏酵母中构建了合成淫羊藿素的代谢通路。本发明专利技术利用多种代谢工程手段进一步地提高淫羊藿素的产量,目前最高可达1212mg/L。本发明专利技术实现了淫羊藿素在解脂耶氏酵母中的首次合成,构建的解脂耶氏酵母工程菌的淫羊藿素产量是迄今为止报道的通过微生物发酵生产的最高水平,为实现解脂耶氏酵母商业化生产淫羊藿素奠定了重要基础,具有重大的应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物工程,特别是涉及一种高产淫羊藿素的重组工程菌及其制备方法和应用


技术介绍

1、淫羊藿素(icaritin)是从传统中草药淫羊藿中提取的一种前炔类黄酮化合物。据报道,淫羊藿素对人类健康具有许多积极的药理和生物活性,包括神经保护、肺部保护、抗炎,或用于治疗各种病症,其中包括骨质疏松症、心血管疾病和类风湿性关节炎等。此外,淫羊藿素还能抑制肝细胞癌(hcc)的发生以及肿瘤的恶性生长,目前已被批准作为治疗肝癌的药物出售。

2、淫羊藿素可以从一些草本植物中提取,尤其是淫羊藿。然而,由于植物中的淫羊藿素浓度极低,要确保其纯度需要使用价格较为昂贵的色谱提取技术,因此不适于大规模生产。此外,过量采摘淫羊藿可能会对生态环境造成破坏,影响生态平衡。化学合成法生产淫羊藿素也存在一定弊端。具体而言,该过程需要添加强酸、强碱和有毒的有机试剂,还需要高温条件和大量水资源的浪费——所有这些都与当前政府所提倡的绿色环保背道而驰。由于合成生物学和代谢工程具有可持续、环境友好和成本效益高的优势,微生物生产已成为生产高附加值植物衍生化合物的可行替代方法。

<本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种高产淫羊藿素的重组工程菌,其特征在于,其是采用如下任一种方法制备:

2.如权利要求1所述的高产淫羊藿素的重组工程菌,其特征在于,所述改造后的异戊二烯基转移酶为在截断前55个氨基酸的异戊二烯基转移酶的基础上,对截断后的氨基酸序列中的第101位、第108位和第164位中至少一位的氨基酸残基进行替换,或者同时对第164位和第175位,或者第164位和第247位的氨基酸残基进行替换得到。

3.如权利要求2所述的高产淫羊藿素的重组工程菌,其特征在于,所述改造后的异戊二烯基转移酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.5-9所示,编码基因的序列如SEQ ID NO.13-1...

【技术特征摘要】

1.一种高产淫羊藿素的重组工程菌,其特征在于,其是采用如下任一种方法制备:

2.如权利要求1所述的高产淫羊藿素的重组工程菌,其特征在于,所述改造后的异戊二烯基转移酶为在截断前55个氨基酸的异戊二烯基转移酶的基础上,对截断后的氨基酸序列中的第101位、第108位和第164位中至少一位的氨基酸残基进行替换,或者同时对第164位和第175位,或者第164位和第247位的氨基酸残基进行替换得到。

3.如权利要求2所述的高产淫羊藿素的重组工程菌,其特征在于,所述改造后的异戊二烯基转移酶的氨基酸序列如seq id no.5-9所示,编码基因的序列如seq id no.13-17任一项所示的序列。

4.如权利要求1所述的高产淫羊藿素的重组工程菌,其特征在于,所述氧甲基转移酶的编码基因的序列如seq id no:2所示,所述透明颤菌血红蛋白的编码基因如seq id no.3所示,所述3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶a还原酶的编码基因的序列如seq id no.10所示,所述异戊...

【专利技术属性】
技术研发人员:叶邦策刘卫兵孙文卓巩家宏魏文平
申请(专利权)人:华东理工大学
类型:发明
国别省市:

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