【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及光学探针，尤其涉及一种磷酸烯醇式丙酮酸光学探针及其制备方法和应用。
技术介绍
1、磷酸烯醇式丙酮酸(phosphoenolpyruvate，pep)作为糖酵解途径中的高能中间物质，是连接糖酵解与糖异生途径的关键代谢物。pep含有的高能磷酸键使其在细菌、植物及哺乳动物细胞中均扮演了磷酸供体的角色，在维持胞内atp含量、葡萄糖稳态、糖代谢调控、肿瘤免疫和细胞保护方面等均发挥着重要作用。
2、目前最常用的检测pep的方法有高效液相色谱法、液相色谱质谱联用法(ho p c等.cell,2015,162(6),1217-1228)、同位素标记法(heiden m g v等，science,2010,329(5998),1492-1499)和酶活检测方法等。高效液相色谱法和液相色谱质谱联用法可以高效并精准地测定样品中pep的含量变化，但其中涉及细胞内代谢物的提取，实验步骤繁琐且周期较长。同位素标记法和酶活检测法均不能实时监控活细胞内pep的变化，因此亟需开发出能够原位监测活细胞内pep动态变化的遗传编码荧光探针。
<...【技术保护点】
1.一种磷酸烯醇式丙酮酸结合蛋白变体，其：
2.一种磷酸烯醇式丙酮酸光学探针，包含磷酸烯醇式丙酮酸敏感多肽和光学活性多肽，其中，光学活性多肽位于磷酸烯醇式丙酮酸敏感多肽的序列内，并且
3.如权利要求2所述的光学探针，其中，光学活性多肽位于磷酸烯醇式丙酮酸敏感多肽的残基68-71，168-173和/或253-257中或置换其中的残基。
4.如权利要求2所述的光学探针，其中，
5.一种核酸分子，其包含：
6.包含权利要求5所述的核酸分子的核酸构建物，
7.一种宿主细胞，所述宿主细胞：
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【技术特征摘要】
1.一种磷酸烯醇式丙酮酸结合蛋白变体，其：
2.一种磷酸烯醇式丙酮酸光学探针，包含磷酸烯醇式丙酮酸敏感多肽和光学活性多肽，其中，光学活性多肽位于磷酸烯醇式丙酮酸敏感多肽的序列内，并且
3.如权利要求2所述的光学探针，其中，光学活性多肽位于磷酸烯醇式丙酮酸敏感多肽的残基68-71，168-173和/或253-257中或置换其中的残基。
4.如权利要求2所述的光学探针，其中，
5.一种核酸分子，其包含：
6.包含权利要求5所述的核...
【专利技术属性】
技术研发人员：杨弋，赵玉政，孙玉莹，刘书宁，张莉娟，李写，邹叶君，
申请(专利权)人：华东理工大学，
类型：发明
国别省市：
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