一种地枫皮叶片基因组DNA提取方法技术

本发明专利技术公开了一种地枫皮叶片基因组DNA提取方法，其技术要点为：取叶片研磨，加入山梨醇缓冲液洗涤，常温离心，弃上清液；加入预热的4％SDS提取液溶解，水浴后冷却，再加入乙酸钠溶液，冰浴后常温离心，取上清液；加入氯仿/异戊醇混合液进行抽提，常温离心，取上清液；加入预冷的异丙醇，‑20℃条件下放置；挑出DNA沉淀，用75％乙醇洗涤2次，低温离心，弃上清液；晾干后加入TE缓冲液，并加入RNA酶消化，再加入氯仿/异戊醇混合液抽提，常温离心，取上清液；加入预冷的无水乙醇，低温离心，弃上清液；用75％乙醇洗涤2次，低温离心，弃上清液；晾干后加入已灭菌的超纯水溶解DNA，置于‑20℃冰箱中保存。本发明专利技术适用于地枫皮叶片基因组DNA的提取。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术专利涉及分子生物学，具体而言，涉及一种地枫皮叶片基因组dna提取方法。

技术介绍

1、地枫皮(illicium difengpi k.i.b.&k.i.m.ex b.n.chang)系五味子科(schisandraceae)八角属(illicium)多年生常绿灌木，为喀斯特特有植物，主要生长在石山山顶的裸岩及半裸岩山上，被历版《中国药典》收载的经典壮药，具祛风除湿，行气止痛等功效。地枫皮野生资源薀藏量很小，多以隔离的小种群形式存在。目前，该物种正处于濒危状态，《国家重点保护野生植物名录》(2021版)(https://www.forestry.gov.cn/main/3954/20210908/163949170374051.html)和《中国植物红皮书》将其列为国家二级重点保护植物。采用分子标记技术对地枫皮进行遗传变异、遗传结构和种群动态分析，可为地枫皮的保护和合理利用提供指导，但由于地枫皮生境的特殊性，使其叶片中富含多糖、蛋白质、莽草酸、维生素等次生代谢物，严重影响了地枫皮基因组dna提取的效果。

2、基因组dna的提取是本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种地枫皮叶片基因组DNA提取方法，其特征在于，所述方法具体包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种地枫皮叶片基因组DNA提取方法，其特征在于，在S7步骤之后，若DNA呈现果冻状，则还包括以下步骤：

3.根据权利要求1所述的一种地枫皮叶片基因组DNA提取方法，其特征在于，所述山梨醇洗涤缓冲液的成分为：0.005mol/L EDTA、0.1mol/L Tris-HCl、1％PVP40(w/v)、0.35mol/L山梨醇、1％β-巯基乙醇。

4.根据权利要求1所述的一种地枫皮叶片基因组DNA提取方法，其特征在于，所述4％SDS提取液的成分为：0.0...

【技术特征摘要】

1.一种地枫皮叶片基因组dna提取方法，其特征在于，所述方法具体包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种地枫皮叶片基因组dna提取方法，其特征在于，在s7步骤之后，若dna呈现果冻状，则还包括以下步骤：

3.根据权利要求1所述的一种地枫皮叶片基因组dna提取方法，其特征在于，所述山梨醇洗涤缓冲液的成分为：0.005mol/l edta、0.1mol/l tris-hcl、1％pvp40(w/v)、0.35mol/l山梨醇、1％β-巯基乙醇。

4.根据权利要求1所述的一种地枫皮叶片基因组dna提取方法，其特征在于，所述4％sds提取液的成分为：0.05mol/l edta、0.1mo...

【专利技术属性】
技术研发人员：张秀姣，甘翔，黄夕洋，杨小丽，李虹，王雨坤，王满莲，唐辉，
申请(专利权)人：广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所，
类型：发明
国别省市：