本发明专利技术提供了一种SERS金属纳米粒子基底的修饰增强方法，包括如下步骤：S1.向SERS金属纳米粒子基底中先加入溶解性硫酸盐进行孵育，使SERS金属纳米粒子基底中金属纳米粒子被硫酸盐电离出的硫酸根离子包覆，形成阴离子壳层的SERS金属纳米粒子基底；S2.然后向阴离子壳层的SERS金属纳米粒子基底中加入溶解性铝盐，以电离出的Al<supgt;3+</supgt;诱导金属纳米粒子聚集，使待测分子和金属纳米粒子间隙形成增强的等离子体共振热点。本发明专利技术基于阴离子锚定的金纳米簇协同金属阳离子Al<supgt;3+</supgt;，增强了SERS信号，提高了表面增强拉曼光谱的分辨率和检测灵敏度；实现黄曲霉素B<subgt;1</subgt;无抗体高灵敏度检测。
1、表面增强拉曼光谱(surface-enhanced raman spectroscopy，sers)是一种快速，灵敏，高通量的分析方法，常用于分析检测蛋白质，核酸以及脂质等生物分子。其原理是检测过程中需要借助贵金属纳米粒子作为基底，利用粒子间隙形成的等离子体共振热点，待测分子需尽可能的靠近金银等贵金属纳米材料表面，可以有效地放大分子本身固有的拉曼横截面，使其产生的拉曼信号强度增加几个数量级，实现信号增强的目标。因此，如何对贵金属纳米材料进行修饰，来提高分子的拉曼信号强度是提升分子检测灵敏度的关键。
2、黄曲霉毒素b1(aflatoxin b1，afb1)在黄曲霉毒素家族中致癌性最强，它广泛分布在粮油及其制品中，世界卫生组织将其列为一级致癌物。其结构中包含了甲氧基、二呋喃环、香豆素、环戊烯酮，其呋喃环末端的双键易形成环氧化代谢产物使其拥有毒性，香豆素结构与其致癌性和致突变性高度相关。afb1具有热稳定性和酸稳定性，会在200-300℃或碱性条件下发生分解。在日常生活中afb1广泛存在于玉米、大豆和花生及他们的深加工产物中，极容易通过食物被人体摄入。根据摄入量的不同，人体会发出现急性中毒、生长障碍、急性肝炎和诱导基因突变致癌等不同程度的损伤，因此世界上许多国家和组织严格监管并限制其在食品中检出量。为了更好的从控制afb1对人体健康的影响，对afb1进行高灵敏的精确测量具有重要意义。
>3、公开号为cn111912929a的中国专利技术专利公开了一种黄曲霉毒素b1的提取方法及应用，具体公开了一种黄曲霉毒素b1的拉曼检测方法，直接将au粒子直径为40-100nm的au溶胶和含有黄曲霉毒素b1的待测溶液混合，通过拉曼光谱仪进行测定，该方法虽然测定迅速，但未对基底金纳米粒子进行修饰，从而使得测定含量较高的微克/千克级别的样品，即灵敏度不高。公开号为cn106442465a的中国专利技术专利公开了一种基于纳米银多孔硅非标记拉曼光谱检测黄曲霉毒素b1方法，其通过以多孔硅表面还原纳米银作为表面增强拉曼光谱传感基底，通过在基底表面物理吸附黄曲霉毒素b1的抗体对样品中的黄曲霉毒素b1富集，但该方法不仅需要复杂结构的多孔硅表面还原纳米银，还需要设计吸附黄曲霉毒素b1的抗体即将抗体固定在基底表面，较为繁琐。因此，需要开发一种贵金属基底修饰相对简单，且具有高灵敏度的黄曲霉素b1测定结果的方法。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是解决上述技术问题，提供一种sers金属纳米粒子基底的修饰增强方法，该方法可以显著提高使用sers金属纳米粒子基底测定待测分子时的灵敏度；本专利技术的另一个目的是提供了该方法在黄曲霉素b1测定中的应用。
2、为实现上述目的，本专利技术采用了如下技术方案：
3、一种sers金属纳米粒子基底的修饰增强方法，包括如下步骤：
4、s1.向sers金属纳米粒子基底中先加入溶解性硫酸盐进行孵育，使sers金属纳米粒子基底中金属纳米粒子被硫酸盐电离出的硫酸根离子包覆，形成阴离子壳层的sers金属纳米粒子基底；加入可溶性硫酸盐的目的是获取硫酸根离子，通过孵育与金纳米粒子表面的离子，特别是柠檬酸根离子进行交换取代，以形成阴离子壳层。
5、s2.然后向阴离子壳层的sers金属纳米粒子基底中加入溶解性铝盐，以电离出的al3+诱导金属纳米粒子聚集，使待测分子和金属纳米粒子间隙形成增强的等离子体共振热点，加入可溶性铝盐的目的是获取铝离子，使其与金纳米粒子表面的硫酸根离子通过库伦力相互吸引，从而聚集形成热点。
6、本专利技术通过该方法基于阴离子锚定的金纳米簇协同金属阳离子，提高了表面增强拉曼光谱的分辨率。在库仑力的作用下，金纳米簇以金属阳离子为核心，沿电场力方向收缩形成“热点”，从而增强了sers信号。
7、进一步地，所述sers金属纳米粒子基底中金属纳米粒子为金、银或铜金属。
8、进一步地，所述金属纳米粒子的粒径为15-25nm。
9、进一步地，所述sers金属纳米粒子基底中金属纳米粒子为金，其制备方法为：
10、p1.将浓度为0.5％-5％的haucl4加热至沸腾；
11、p2.向沸腾的haucl4中持续加入浓度为0.5％-5％的柠檬酸钠溶液，至溶液变为酒红色时停止加入，冷却、离心富集金纳米粒子，得到sers金属纳米粒子基底。
12、进一步地，所述离心其离心速度为8000-12000rpm，离心时间为5-20min。
13、优选地，所述离心其离心速度为9000rpm，离心时间为10min。
14、进一步地，所述sers金属纳米粒子基底中金属纳米粒子其物质的量浓度为0.01-0.1mol/l。
15、进一步地，所述溶解性硫酸盐为硫酸钠、稀硫酸、硫酸钾中的一种。
16、进一步地，所述金纳米粒子和溶解性硫酸盐的物质的量比为16:10。
17、进一步地，所述孵育时间为10-40min。
18、优选地，所述孵育时间为25min。
19、进一步地，所述待测分子为黄曲霉毒素。
20、优选地，所述黄曲霉毒素为双呋喃环类黄曲霉毒素。
21、更优选地，所述双呋喃环类黄曲霉毒素为黄曲霉毒素b1。
22、进一步地，所述待测分子的质量浓度为10-3-10-15g/kg。
23、优选地，所述待测分子的质量浓度为10-9-10-15g/kg。
24、进一步地，所述溶解性铝盐为：氯化铝、硝酸铝或硫酸铝或的一种。
25、优选地，所述铝盐为硫酸铝。
26、进一步地，所述金纳米粒子和溶解性铝盐的物质的量比为16:1。
27、本专利技术请求保护上述的sers金属纳米粒子基底的修饰方法在黄曲霉素b1测定中的应用。
28、一种基于sers的黄曲霉素b1测定方法，包括如下步骤：
29、p1.首先将溶解性铝盐加入至sers金属纳米粒子基底中，而后加入不同浓度的黄曲霉素b1标准溶液进行sers测试，记录不同浓度的黄曲霉素b1标准溶液在sers金属纳米粒子基底上的sers响应值，并绘制得到黄曲霉素b1浓度与sers强度的线性关系曲线；
30、p2.首先将溶解性铝盐加入至sers金属纳米粒子基底中，而后加入待测的黄曲霉素b1溶液进行sers测试，记录其在sers金属纳米粒子基底上的sers响应值，并根据p1所述黄曲霉素b1浓度与sers强度的线性关系曲线计算待测的黄曲霉素b1溶液浓度；
31、所述sers金属纳米粒子基底为上述步骤s1所述阴离子壳层的sers金属纳米粒子基底。
32、利用上述sers金属纳米粒子基底能够将更多的afb1分子挤压靠进“热点”，即当使用溶解性硫酸盐对sers金属纳米粒子基底进行孵本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种SERS金属纳米粒子基底的修饰增强方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述SERS金属纳米粒子基底的修饰增强方法，其特征在于，所述SERS金属纳米粒子基底中金属纳米粒子为金或银金属，所述金属纳米粒子的粒径为15-25nm。
3.根据权利要求1所述SERS金属纳米粒子基底的修饰增强方法，其特征在于，所述SERS金属纳米粒子基底中金属纳米粒子为金，其制备方法为：
4.根据权利要求1所述SERS金属纳米粒子基底的修饰增强方法，其特征在于，所述SERS金属纳米粒子基底中金属纳米粒子其物质的量浓度为0.01-0.1mol/L。
5.根据权利要求1所述SERS金属纳米粒子基底的修饰增强方法，其特征在于，所述溶解性硫酸盐为硫酸钠、稀硫酸、硫酸钾中的一种。
6.根据权利要求1所述SERS金属纳米粒子基底的修饰增强方法，其特征在于，所述溶解性铝盐为：氯化铝、硝酸铝或硫酸铝的一种。
7.根据权利要求1所述SERS金属纳米粒子基底的修饰增强方法，其特征在于，所述金纳米粒子、溶解性硫酸盐和溶解性铝盐的物质的量比为16:10：1。
8.根据权利要求1所述SERS金属纳米粒子基底的修饰增强方法，其特征在于，所述待测分子为黄曲霉毒素B1。
9.权利要求1-8任一项所述的SERS金属纳米粒子基底的修饰增强方法在黄曲霉素B1测定中的应用。
10.一种基于SERS的黄曲霉素B1测定方法，其特征在于，
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【技术特征摘要】
1.一种sers金属纳米粒子基底的修饰增强方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述sers金属纳米粒子基底的修饰增强方法，其特征在于，所述sers金属纳米粒子基底中金属纳米粒子为金或银金属，所述金属纳米粒子的粒径为15-25nm。
3.根据权利要求1所述sers金属纳米粒子基底的修饰增强方法，其特征在于，所述sers金属纳米粒子基底中金属纳米粒子为金，其制备方法为：
4.根据权利要求1所述sers金属纳米粒子基底的修饰增强方法，其特征在于，所述sers金属纳米粒子基底中金属纳米粒子其物质的量浓度为0.01-0.1mol/l。
5.根据权利要求1所述sers金属纳米粒子基底的修饰增强方法，...
【专利技术属性】
技术研发人员：谢杉杉，张杰，苗雨，孟蕊杰，郭黎明，张加栋，
申请(专利权)人：淮阴工学院，
类型：发明
国别省市：
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