一种食品中蛋白质含量快速检测方法技术

本发明专利技术提供一种食品中蛋白质含量快速检测方法，其特征在于：样品经前处理后，取１００μＬ检测试样与２４００μＬ自制的蛋白质光学检测试剂混合，样品中蛋白质与检测试剂起显色反应，反应产物在６１０ｎｍ处有最大吸收峰，通过比较不同浓度蛋白质标准样品的Ａｂｓ６１０（吸光度）值，制定标准曲线，根据待测样品的Ａｂｓ６１０值，获取待测物中蛋白质的含量。该检测方法具有检测方便、测量速度快、灵敏度高、且检测成本较低等优点，可以满足快速检测蛋白质的需要。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种快速测定食品中蛋白质含量的检测技术，属于食品安全检测领域。
技术介绍
蛋白质在生物体内占有特殊的地位，它和核酸是构成原生质的主要成分，是生命 现象的物质基础，在催化生命体内各种反应进行、调节代谢、抵御外来物质入侵及控制遗传 信息等方面都起着至关重要的作用，具有糖类和脂肪不可替代的作用。民以食为天，食品是人们生活的最基本必需品，而食物中的蛋白质是人体中氮 的唯一来源。因此，食品中蛋白质含量的多少，不仅表示食品的质量，而且也关系着人体的 健康。国家食品卫生标准也对部分食品中蛋白质的含量作了相应规定，其中，动物乳和动物 乳制品中蛋白质的测定是食物营养成分分析的必测项目。当前，日常消费者和质检部门现 场采用的奶粉品质判断方法主要依靠感官观察(手感、颜色、气味、味道等)，然后质检部门 抽查取样送交至技术中心检测，蛋白质的测定多采用国家标准方法——凯氏定氮法。然而 感官观察虽然易于操作，但主观性强、准确度低，只是一种初步的检测手段；而传统的凯氏 定氮法其基本原理是将食品与硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，分解的氨与硫 酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定， 根据酸的消耗量乘以换算系数，即为蛋白质含量。很明显，利用凯氏定氮法测得的结果不完 全是蛋白质，还包括一些非蛋白质类的含氮物质，如尿素氮、游离氨氮、无机氨盐等，致使不 法分子有机可乘，在原料中掺入大量蛋白精——三聚氰胺以提高奶粉蛋白质含量，以非法 牟取暴利，从而导致震惊全国的三鹿奶粉事件的爆发，给国家和人民造成了不可挽回的 损失。可见，传统方法难以解决牛奶中蛋白质的掺伪检验难题，同时也存在操作流程繁琐、 耗时费力等缺点，且在操作过程中会产生大量有害气体而污染环境，影响操作人员健康，不 能满足快速测定的需要。
技术实现思路
本专利技术的目的，就是针对上述测试方法的不足，向食品安全检测部门提供一种只 对食品中蛋白质特异性响应、反应速度快、显色稳定、干扰因素小、优于常规凯氏定氮法的 检测技术，从而建立一种快速简便的食品蛋白质快速检测方法，可解决大量的食品公共安 全问题。为了达到上述目的，本专利技术是这样实现的样品经前处理后，取100iiL检测试样 与2400yL自制的蛋白质光学检测试剂混合，样品中蛋白质与检测试剂起显色反应，反应 产物在610nm处有最大吸收峰，通过比较不同浓度蛋白质标准样品的Abs61。值，制定标准曲 线，根据待测样品的Abs61。值，获取待测物中蛋白质的含量，从而得到本专利技术。 自制的蛋白质光学检测试剂由直链醇、多环磺酞染料、十二烷基盐组合而成。 直链醇由乙醇、丙醇、丁醇、戊醇和己醇中的至少一种或一种以上组成。乙醇、丙醇、丁醇和戊醇是直链醇的优选，乙醇和丙醇为最优选。直链醇试剂，其待加入量的优选为 0. 5 10mM。 多环磺酞染料由四溴苯酚磺酞、酸性蓝90、苯酚红、甲酚红、二氯苯酚磺酰酞、溴酚 红和甲酚紫中一种或一种以上组成。四溴苯酚磺酞、酸性蓝90、二氯苯酚磺酰酞、溴酚红和 甲酚紫是多环磺酞染料的优选，四溴苯酚磺酞、酸性蓝90和溴酚红是多环磺酞染料的最优 选。多环磺酞染料，其待加入量的优选为100 200mM。 十二烷基盐由十二烷基硫酸钠、十二烷基苯磺酸钠、十二烷基三甲基氯化铵和 十二烷基三甲基溴化铵中一种或一种以上组成，十二烷基硫酸钠、十二烷基苯磺酸钠和 十二烷基三甲基氯化铵是十二烷基盐的优选，十二烷基硫酸钠和十二烷基苯磺酸钠是十二 烷基盐的最优选。十二烷基盐，其待加入量的优选为1 50mM。 该检测方法具有检测方便、测量速度快、灵敏度高、且检测成本较低等优点，很适合进行食品中蛋白质含量的快速检测，准确度高，为食品检验检疫部门的检测工作提高了 工作效率，同时也为人们的食品安全保障提升了一个台阶。具体实施例方式本专利技术提供，具体实施过程是样品经前处 理后，取100i!L检测试样与2400 PL自制的蛋白质光学检测试剂混合，样品中蛋白质与检 测试剂起显色反应，反应产物在610nm处有最大吸收峰，通过比较不同浓度蛋白质标准样 品的Abs,值，制定标准曲线，根据待测样品的Abs,值，获取待测物中蛋白质的含量。 在本专利技术的自制蛋白质光学检测试剂中，所述检测试剂是由直链醇、多环磺酞染 料、十二烷基盐组合而成。 所述直链醇由乙醇、丙醇、丁醇、戊醇和己醇中 一种或一种以上组成，其中乙醇、 丙醇、丁醇和戊醇是直链醇的优选，乙醇和丙醇是最优选的。待加入直链醇的量为0. 5 100mM，优选为0. 5 10mM。 所述多环磺酞染料从四溴苯酚磺酞、酸性蓝90、苯酚红、甲酚红、二氯苯酚磺酰酞、 溴酚红和甲酚紫中至少选取一种组成，其中四溴苯酚磺酞、酸性蓝90、二氯苯酚磺酰酞、溴 酚红和甲酚紫是优选的，并且四溴苯酚磺酞、酸性蓝90和溴酚红是最优选的。待加入多环 磺酞染料的量为100 500mM，优选为100 200mM。 所述十二烷基盐是由十二烷基硫酸钠、十二烷基苯磺酸钠、十二烷基三甲基氯化铵和十二烷基三甲基溴化铵中一种或一种以上组成，其中十二烷基硫酸钠、十二烷基苯磺酸钠和十二烷基三甲基氯化铵是十二烷基盐的优选，十二烷基硫酸钠和十二烷基苯磺酸钠是最优选的。待加入十二烷基盐的量为1 100mM，优选为1 50mM。 下面结合具体实施例对本专利技术进行描述 实施例1 :蛋白质标准样品Abs61。值——浓度标准曲线 1、取石英比色皿； 2、用移液器准确移取100ii L标准蛋白质样品至比色皿中； 3、用移液器准确移取2400iiL自制的蛋白质光学检测试剂至比色皿中，混合均 匀，室温下反应2分钟； 4、在紫外分光光度计下测定610nm下的吸光值(Abs值)； 5、绘制蛋白质标准样品Abs61。值——浓度标准曲线(附图说明图1)。 实施例2 :奶粉样品的快速检测方法 1、准确称取100mg奶粉样品，溶于1000 ii L pH7. 8的磷酸盐缓冲液中，离心，用移 液器准确移取100 ii L上清液至比色皿中； 2、用移液器准确移取2400iiL自制的蛋白质光学检测试剂至比色皿中，混合均 匀，室温下反应2分钟； 3、在紫外分光光度计下测定610nm下的吸光值(Abs值)； 4 、与标准曲线比较，判断奶粉样品中蛋白质的含量。 以上实施例只是为了说明本专利技术，而不是对本专利技术的限制。在上述说明的基础上， 可以对本专利技术作许多改进和改变。在所附权利要求书的范围内，本专利技术可以有不同于上述 的其它实现方式，选用其它试剂、改变试剂浓度等方法均在本专利技术专利要求范围之内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种食品中蛋白质含量快速检测方法，其特征在于：样品经前处理后，取１００μＬ检测试样与２４００μＬ自制的蛋白质光学检测试剂混合，样品中蛋白质与检测试剂起显色反应，反应产物在６１０ｎｍ处有最大吸收峰，通过比较不同浓度蛋白质标准样品的Ａｂｓ↓［６１０］值，制定标准曲线，根据待测样品的Ａｂｓ↓［６１０］值，获取待测物中蛋白质的含量。

【技术特征摘要】
一种食品中蛋白质含量快速检测方法，其特征在于样品经前处理后，取100μL检测试样与2400μL自制的蛋白质光学检测试剂混合，样品中蛋白质与检测试剂起显色反应，反应产物在610nm处有最大吸收峰，通过比较不同浓度蛋白质标准样品的Abs610值，制定标准曲线，根据待测样品的Abs610值，获取待测物中蛋白质的含量。2. 根据权利要求l所述的自制蛋白质光学检测试剂，其特征在于该试剂由直链醇、多 环磺酞染料、十二烷基盐组合而成。3. 根据权利要求2所述的试剂配方，其特征在于直链醇由乙醇、丙醇、丁醇、戊醇和己 醇中的至少一种或一种以上组成，乙醇、丙醇、丁醇和戊醇是直链醇的优选，乙醇和丙醇为 最优选，直链醇待加入量的优选为0. 5 10mM。4. 根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：何保山，王金水，李小艳，韩小贤，薛运侠，
申请(专利权)人：河南工业大学，
类型：发明
国别省市：41[中国|河南]