【技术实现步骤摘要】
本申请涉及生物医药，具体涉及一种促进毛细胞再生的组合物及其应用。
技术介绍
1、听力损失是影响全球超过4.66亿人的最常见的感觉缺陷疾病。听力损失可能由遗传缺陷、衰老和暴露于嘈杂的噪音或耳毒性药物等引起；毛细胞退化被认为是听力损失的主要长期原因。鸟类和两栖动物在耳毒性药物和噪声暴露的影响下，可以通过支持细胞转分化或周围支持细胞的不对称分裂来再生毛细胞，但哺乳动物耳蜗中的支持细胞和毛细胞是有丝分裂后细胞，无法再生毛细胞，因此会造成永久性的听力损失。
2、近年来的工作中，研究者尝试通过调控notch，wnt，bmp等信号通路及转录因子调控等来诱导支持细胞转分化形成毛细胞。但是目前这些方法再生的毛细胞仍然不够成熟并且最终死亡，无法实现听觉功能的恢复。故此，亟需寻找高效的毛细胞分化、成熟和存活的信号及途径，进而可为体内毛细胞的再生提供新的途径和潜在靶点。
技术实现思路
1、针对上述存在的技术局限性，本申请提出了一种促进毛细胞再生的组合物及其应用；其克服了
技术介绍
中提到的不足和缺陷。
2、为实现上述目的，本申请采用了以下技术方案：
3、本申请的专利技术点是提供一种促进毛细胞再生的组合物，所述组合物包括notch抑制剂和三羧酸循环代谢物。
4、可选地，上述的一种促进毛细胞再生的组合物，所述notch抑制剂为γ分泌酶抑制剂dapt(离体组织中)或γ分泌酶抑制剂ly411575(类器官中)。
5、可选地，上述的一种促进毛细胞再生的组合物，
6、可选地，上述的一种促进毛细胞再生的组合物，所述组合物为γ分泌酶抑制剂dapt和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸nad+的组合，或γ分泌酶抑制剂dapt和α-酮戊二酸的组合，或γ分泌酶抑制剂ly411575和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸nad+的组合，或γ分泌酶抑制剂ly411575和α-酮戊二酸的组合。
7、可选地，上述的一种促进毛细胞再生的组合物，所述notch抑制剂的使用浓度为2-10μmol；所述三羧酸循环代谢物中烟酰胺腺嘌呤二核苷酸nad+的使用浓度为100-600μmol，所述三羧酸循环代谢物中α-酮戊二酸的使用浓度为100-600μmol。
8、可选地，上述的一种促进毛细胞再生的组合物，所述notch抑制剂的使用浓度为5μmol；所述三羧酸循环代谢物中烟酰胺腺嘌呤二核苷酸nad+的使用浓度为500μmol，所述三羧酸循环代谢物中α-酮戊二酸的使用浓度为500μmol。
9、本申请的第二个专利技术点是提供了一种以非治疗目的促进内耳支持细胞群体再生的方法，所述方法是在体内或体外，将上述的促进毛细胞再生的组合物与内耳支持细胞群体接触。
10、可选地，上述的方法，包括以下步骤：
11、s1.获得内耳支持细胞群体的单细胞；
12、s2.将所述单细胞重悬在扩增/分化培养基中进行培养，所述的扩增/分化培养基中包括无血清的advanced dmem/f12，glutamax i，n2补充剂，b27补充剂，表皮生长因子，纤维母细胞生长因子，胰岛素样生长因子1，wnt激动剂chir99021，rock抑制剂616452，vpa，维生素c，基质胶和所述的促进毛细胞再生的组合物。
13、本申请的第三个专利技术点是提供了上述的促进毛细胞再生的组合物在制备促进耳蜗毛细胞再生药物中的应用。
14、可选地，上述的应用，所述促进耳蜗毛细胞再生药物中还包括有可与notch抑制剂和三羧酸循环代谢物联合使用的制剂/组分。
15、可选地，上述的应用，所述促进耳蜗毛细胞再生药物中，所述烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的使用浓度为500μm；α-酮戊二酸的使用浓度为500μm；γ分泌酶抑制剂的使用浓度为5μm。
16、与现有技术相对比，本申请具有以下优点：
17、本申请提供了一种促进毛细胞再生的组合物及其应用，申请人结合小鼠耳蜗类器官、离体组织和在体模型，发现耳蜗毛细胞再生伴随着氧化还原能力的下调和活性氧的增加；通过代谢组学和线粒体功能检测，发现毛细胞的分化造成了耗氧量的增加和三羧酸循环代谢物的减少，进而确定了烟酰胺腺嘌呤二核苷酸nad+和α-酮戊二酸分别和dapt联用可以在体外促进毛细胞再生效果，并且在体内可以协同转录因子atoh1促进外毛细胞再生；这些药物用途以及其能够联合使用并对毛细胞的体外和体内再生产生实质性的促进效果，为寻找体内毛细胞再生提供了新的途径和潜在靶点。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种促进毛细胞再生的组合物，其特征在于，所述组合物包括Notch抑制剂和三羧酸循环代谢物。
2.根据权利要求1所述的一种促进毛细胞再生的组合物，其特征在于，所述Notch抑制剂为γ分泌酶抑制剂DAPT或γ分泌酶抑制剂LY411575。
3.根据权利要求2所述的一种促进毛细胞再生的组合物，其特征在于，所述三羧酸循环代谢物包括烟酰胺腺嘌呤二核苷酸NAD+或α-酮戊二酸。
4.根据权利要求3所述的一种促进毛细胞再生的组合物，其特征在于，所述组合物为γ分泌酶抑制剂DAPT和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸NAD+的组合，或γ分泌酶抑制剂DAPT和α-酮戊二酸的组合，或γ分泌酶抑制剂LY411575和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸NAD+的组合，或γ分泌酶抑制剂LY411575和α-酮戊二酸的组合。
5.根据权利要求1-4任意一项所述的一种促进毛细胞再生的组合物，其特征在于，所述Notch抑制剂的使用浓度为2-10μmol；所述三羧酸循环代谢物中烟酰胺腺嘌呤二核苷酸NAD+的使用浓度为100-600μmol，所述三羧酸循环代谢物中α-酮戊二酸的使用浓度为100
6.根据权利要求5所述的一种促进毛细胞再生的组合物，其特征在于，所述Notch抑制剂的使用浓度为5μmol；所述三羧酸循环代谢物中烟酰胺腺嘌呤二核苷酸NAD+的使用浓度为500μmol，所述三羧酸循环代谢物中α-酮戊二酸的使用浓度为500μmol。
7.一种以非治疗目的促进内耳支持细胞群体再生的方法，其特征在于，所述方法是在体内或体外，将权利要求1-6任意一项所述的促进毛细胞再生的组合物与内耳支持细胞群体接触。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，包括以下步骤：
9.权利要求1-6任意一项所述的促进毛细胞再生的组合物在制备促进耳蜗毛细胞再生药物中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述促进耳蜗毛细胞再生药物中还包括有可与Notch抑制剂和三羧酸循环代谢物联合使用的制剂/组分。
...【技术特征摘要】
1.一种促进毛细胞再生的组合物，其特征在于，所述组合物包括notch抑制剂和三羧酸循环代谢物。
2.根据权利要求1所述的一种促进毛细胞再生的组合物，其特征在于，所述notch抑制剂为γ分泌酶抑制剂dapt或γ分泌酶抑制剂ly411575。
3.根据权利要求2所述的一种促进毛细胞再生的组合物，其特征在于，所述三羧酸循环代谢物包括烟酰胺腺嘌呤二核苷酸nad+或α-酮戊二酸。
4.根据权利要求3所述的一种促进毛细胞再生的组合物，其特征在于，所述组合物为γ分泌酶抑制剂dapt和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸nad+的组合，或γ分泌酶抑制剂dapt和α-酮戊二酸的组合，或γ分泌酶抑制剂ly411575和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸nad+的组合，或γ分泌酶抑制剂ly411575和α-酮戊二酸的组合。
5.根据权利要求1-4任意一项所述的一种促进毛细胞再生的组合物，其特征在于，所述notch抑制剂的使用浓度为2-10μmol；所述三羧酸循环代谢物中烟酰胺腺嘌呤二...
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。