修饰酶和使用了所述修饰酶的咪唑二肽的制造方法技术

本发明专利技术提供对目标肽的制造有用的酶，所述目标肽的制造可以不需要AT P而生成目标肽。更具体而言，本发明专利技术提供一种修饰酶，其包含修饰氨基酸序列等的氨基酸序列，所述修饰氨基酸序列在SEQ ID NO.1的氨基酸序列中，包含选自E81、I127、I136、T139、F140、G142、W143、I147、I181、I201、Q219、T229、M244、A249、P255、E256、I260、S293、N294、Y295和I299中的一种以上的氨基酸残基的突变；并且，所述修饰酶具有与包含SEQ ID NO.1的氨基酸序列的酶相比得到了提高的下述特性(a)或(b)：(a)咪唑二肽生成活性；或(b)热稳定性。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】

本专利技术涉及修饰酶和使用了所述修饰酶的咪唑二肽的制造方法等。

技术介绍

1、肌肽(β-丙氨酰组氨酸)是由β-丙氨酸和组氨酸组成的咪唑二肽。肌肽大多存在于包含人类的哺乳动物的肌肉、脑、心脏中，已经报告ph调节作用、抗炎症作用、组织修复作用、免疫调节作用、抗氧化作用、抗蛋白糖化作用等作用。

2、作为肌肽的制造法，已知使用催化由β-丙氨酸和组氨酸生成β-丙氨酰组氨酸的反应(β-ala+his→β-ala-his)的酶的方法(非专利文献1、非专利文献2和专利文献1)。然而，这些酶在反应中需要atp。

3、另一方面，在专利文献2中，记载了多个微生物来源的一些酶可以不需要atp，由β-丙氨酰酯或β-丙氨酰胺、以及氨基酸或其衍生物生成β-丙氨酰氨基酸或其衍生物，并且记载了这样的酶的实例中包含小红酵母(rhodotorula minuta)来源的野生型rhdmpa3酶。

4、现有技术文献

5、专利文献

6、专利文献1：美国专利申请公开第2005/0287627号说明书

7、专利文献2：国际公开第20本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种修饰酶，其包含：

2.根据权利要求1所述的修饰酶，其中，

3.根据权利要求1所述的修饰酶，其中，

4.根据权利要求3所述的修饰酶，其中，

5.根据权利要求3所述的修饰酶，其中，

6.一种多核苷酸，其编码权利要求1～5中任一项所述的修饰酶。

7.一种表达载体，其包含权利要求6所述的多核苷酸。

8.一种宿主细胞，其包含：

9.一种咪唑二肽或其盐的制造方法，其包含：

10.根据权利要求9所述的方法，其中，

11.根据权利要求9所述的方法，其中，p>

12.根据...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.一种修饰酶，其包含：

2.根据权利要求1所述的修饰酶，其中，

3.根据权利要求1所述的修饰酶，其中，

4.根据权利要求3所述的修饰酶，其中，

5.根据权利要求3所述的修饰酶，其中，

6.一种多核苷酸，其编码权利要求1～5中任一项所述的修饰酶。

7.一种表达载体，...

【专利技术属性】
技术研发人员：田森瑞贵，田上宇乃，野崎博之，
申请(专利权)人：味之素株式会社，
类型：发明
国别省市：