【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于医药生物，具体的，涉及一组靶向pcsk9的sgrna及其应用。
技术介绍
1、高脂血症是指血液中低密度脂蛋白胆固醇(ldl-cholesterol，ldl-c)、总胆固醇(total cholesterol，tc)或甘油三酯(triglycerides，tg)等水平的异常升高，其中尤以ldl-c的升高最为常见。血脂的异常升高会促进动脉粥样硬化性心血管疾病(atherosclerotic cardiovascular disease，ascvd)的发生和发展，这也是导致心血管疾病高发病率和高死亡率最主要的病因。临床实践表明ascvd预防的核心策略是降低ldl-c水平并终身维持。尽管以他汀类为主的降脂药可明显降低血脂水平并带来长期的临床获益，但部分患者降脂效果不理想，也有部分患者无法耐受长期他汀药物治疗。此外长期反复用药还会降低患者的依从性以及增加潜在的副作用。因此开发新型长效降低血脂策略具有重要意义。
2、大量研究证实前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶9型(proprotein convertasesubtilisin/kexin type 9，pcsk9)是治疗高脂血症的新靶点。机制上pcsk9通过与肝细胞表面的ldl受体(ldl-r)结合，介导其在细胞溶酶体中降解，从而降低了ldlr介导的肝脏分解代谢ldl-c的能力，导致血浆ldl-c水平升高。而抑制pcsk9表达或者抑制其功能将促进ldlr再循环到肝细胞表面，加快ldl-c的分解代谢，从而降低血浆ldl-c水平。靶向抑制pcsk9的sirna或单抗药物均被
3、单碱基编辑器(base editor，be)的出现为高效编辑基因组dna提供了新策略，如胞嘧啶碱基编辑器(cytosine base editors，cbe)，可以在不引起dna双链断裂的情况下，实现c到t的单碱基替换，因此更加安全和高效。
4、基于此，提出本专利技术。
技术实现思路
1、本专利技术首先涉及一组靶向人pcsk9基因的sgrna，所述sgrna的编码序列如seq idno.1～32所示；优选的，所述sgrna的序列如seq id no.4、15所示；更优选的，如seq idno.4所示。
2、本专利技术还涉及所述sgrna的如下应用：
3、(1)制备降低血脂的药物；
4、(2)制备抑制pcsk9表达的试剂；
5、(3)制备预防或治疗动脉粥样硬化性心血管疾病的药物。
6、本专利技术的有益效果在于，
7、本申请提供了靶向人pcsk9基因的sgrna，所述的sgrna可以利用已有的cbe编辑器靶向编辑人pcsk9基因。
8、首先，通过在体外系统评价sgrna的编辑效率获得了高效编辑的sgrna，其次利用aav8把高效sgrna和cbe编辑器递送到hpcsk9小鼠体内，编辑肝脏pcsk9基因的效率高达58％，伴随着pcsk9蛋白水平下降92％，血脂ldl-c水平下降了62％，同时未发现明显的副作用。
9、其次，本申请是在dna水平上编辑了人pcsk9基因，因此理论上可以实现长期调节pcsk9基因表达和降低血脂ldl-c水平。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一组靶向人PCSK9基因的sgRNA，所述sgRNA的编码序列为SEQ ID No.1～32所示序列；；优选的，所述sgRNA的序列如SEQ ID No.4、16所示；更优选的，如SEQ ID No.4所示。
2.权利要求1所述的sgRNA的如下应用：
【技术特征摘要】
1.一组靶向人pcsk9基因的sgrna，所述sgrna的编码序列为seq id no.1～32所示序列；；优选的，所述sgrna的序...
【专利技术属性】
技术研发人员：李玉琳，杜杰，高诗娟，方光明，
申请(专利权)人：北京市心肺血管疾病研究所，
类型：发明
国别省市：
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