【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
专利
本文提供的是共同在细胞内环境中自扩增的rna，其包含n1-甲基假尿苷类和尿苷类，并且具有一定的n1-甲基假尿苷类比尿苷类和n1-甲基假尿苷类的总量的摩尔百分比或摩尔比例或n1-甲基假尿苷类比尿苷类的摩尔比率。
技术介绍
1、自扩增信使(sam)核糖核酸(rna)分子和共同具有sam rna分子特性的多个信使rna(mrna)(本文中称为多个自动扩增信使(aam)rna)具有以下能力：提供用它们转染的细胞更长时间地暴露于外源或异源核酸，包括异源蛋白质，例如由其编码的抗原、抗体等。例如，sam rna平台可引起体内抗原表达约30天，而传统(非复制)mrna最多可引起几天的表达。然而，与所有外源性rna一样，sam rna和多个aam rna具有激活先天免疫系统的能力。除了与引入异源(或外源)核酸相关的影响之外，先天免疫激活可能会引起意想不到的影响。先天免疫激活还可以抑制由sam rna或多个aam rna引入的异源核酸的活性。例如，先天免疫激活可以抑制由sam rna或多个aam rna的异源核酸编码的抗原的表达。
2、用n1-甲基假尿苷类取代尿苷类已用于常规rna。然而，常规rna不需要复制酶来扩增分子，并且常规rna不具有超过上述时间最大值的持续表达。
技术实现思路
1、专利技术人发现，对于自扩增信使(sam)核糖核酸(rna)或多个自动扩增信使(aam)rna，存在两个对用n1-甲基假尿苷类(n1ψ)取代尿苷类(u)的摩尔百分比敏感的独立阈值。因此，专利技
2、一种自扩增信使(sam)核糖核酸(rna)，其包含n1-甲基假尿苷类、尿苷类、第一rna区段和第二rna区段；该第一rna区段包含异源核酸；该第二rna区段编码一个或多个能够在细胞内环境中复制该sam rna的蛋白质；该sam rna具有的n1-甲基假尿苷类比n1-甲基假尿苷类和尿苷类的总量的第一摩尔百分比为15％至75％。
3、一种sam rna，其包含n1-甲基假尿苷类、尿苷类、第一rna区段和第二rna区段；该第一rna区段包含异源核酸；该第二rna区段编码一个或多个能够在细胞内环境中复制该sam rna的蛋白质；该sam rna通过以下方法产生，该方法包括将rna聚合酶、n1-甲基假尿苷类、尿苷类和包含sam rna序列的模板核酸混合，从而获得混合物；该混合物具有的n1-甲基假尿苷类比n1-甲基假尿苷类和尿苷类的总量的第一摩尔百分比为15％至75％；该混合是在rna聚合酶从该模板核酸产生sam rna的条件下进行的。
4、多个自动扩增信使(aam)rna，其包含n1-甲基假尿苷类、尿苷类、第一rna和一个或多个第二rna；该第一rna包含异源核酸；该一个或多个第二rna编码一个或多个能够在细胞内环境中复制该sam rna的蛋白质；该多个aam rna具有的n1-甲基假尿苷类比n1-甲基假尿苷类和尿苷类的总量的第一摩尔百分比为15％至75％。
5、多个aam rna，其包含n1-甲基假尿苷类、尿苷类、第一rna和一个或多个第二rna；该第一rna包含异源核酸；该一个或多个第二rna编码一个或多个能够在细胞内环境中复制该多个aam rna的蛋白质；该多个aam rna通过以下方法产生，该方法包括以下的一个或多个混合：rna聚合酶、n1-甲基假尿苷类、尿苷类和一个或多个模板核酸，从而获得其中该一个或多个模板核酸包含该多个aam rna的序列的一个或多个混合物；该一个或多个混合物具有的n1-甲基假尿苷类比n1-甲基假尿苷类和尿苷类的总量的第一摩尔百分比为15％至75％；该一个或多个混合是在其中该rna聚合酶从该一个或多个模板核酸产生多个aam rna的条件下进行的。
6、一种组合物，其包含药学上可接受的递送媒介和sam rna，该sam rna包含n1-甲基假尿苷类、尿苷类、第一rna区段和第二rna区段；该第一rna区段包含异源核酸；该第二rna区段编码一个或多个能够在细胞内环境中复制该sam rna的蛋白质；该sam rna具有的n1-甲基假尿苷类比n1-甲基假尿苷类和尿苷类的总量的第一摩尔百分比为15％至75％。
7、一种组合物，其包含药学上可接受的递送媒介和sam rna，该sam rna包含n1-甲基假尿苷类、尿苷类、第一rna区段和第二rna区段；该第一rna区段包含异源核酸；该第二rna区段编码一个或多个能够在细胞内环境中复制该sam rna的蛋白质；该sam rna通过以下方法产生，该方法包括将rna聚合酶、n1-甲基假尿苷类、尿苷类和包含sam rna序列的模板核酸混合，从而获得混合物；该混合物具有的n1-甲基假尿苷类比n1-甲基假尿苷类和尿苷类的总量的第一摩尔百分比为15％至75％；该混合是在rna聚合酶从该模板核酸产生sam rna的条件下进行的。
8、一种组合物，其包含药学上可接受的递送媒介和多个aam rna，该aam rna包含n1-甲基假尿苷类、尿苷类、第一rna和一个或多个第二rna；该第一rna包含异源核酸；该一个或多个第二rna编码一个或多个能够在细胞内环境中复制该sam rna的蛋白质；该多个aamrna具有的n1-甲基假尿苷类比n1-甲基假尿苷类和尿苷类的总量的第一摩尔百分比为15％至75％。
9、一种组合物，其包含药学上可接受的递送媒介和多个aam rna，该aam rna包含n1-甲基假尿苷类、尿苷类、第一rna和一个或多个第二rna；该第一rna包含异源核酸；该一个或多个第二rna编码一个或多个能够在细胞内环境中复制该多个aam rna的蛋白质；该多个aam rna通过以下方法产生，该方法包括以下的一个或多个混合：rna聚合酶、n1-甲基假尿苷类、尿苷类和一个或多个模板核酸，从而获得其中该一个或多个模板核酸包含该多个aamrna的序列的一个或多个混合物；该一个或多个混合物具有的n1-甲基假尿苷类比n1-甲基假尿苷类和尿苷类的总量的第一摩尔百分比为15％至75％；该一个或多个混合是在其中该rna聚合酶从该一个或多个模板核酸产生多个aam rna的条件下进行的。
10、一种在受试者中引发针对免疫原的免疫应答的方法，该方法包括向该受试者施用有效量的sam rna，该sam rna包含n1-甲基假尿苷类、尿苷类、第一rna区段和第二rna区段；该第一rna区段包含至少编码免疫原或针对该免疫原的抗体的异源核酸；该第二rna区段编码一个或多个能够在细胞内环境中复制该sam rna的蛋白质；该sam rna具有的n1-甲基假尿苷类比n1-甲基假尿苷类和尿苷类的总量的第一摩尔百分比为15％至75％。
11、一种在受试者中引发针对免疫原的免疫应答的方法，该方法包括向该受试者施用有效量的sam rna，该sam rna包含n1-甲基假尿苷类、尿苷类、第一rna区段和第二rna区段；该第一rna区段包含至少编码免疫原或针对该免疫原本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种自扩增信使(SAM)核糖核酸(RNA)，其包含N1-甲基假尿苷类、尿苷类、第一RNA区段和第二RNA区段；所述第一RNA区段包含异源核酸；所述第二RNA区段编码能够在细胞内环境中复制所述SAM RNA的一个或多个蛋白质；所述SAM RNA具有15％至75％的所述N1-甲基假尿苷类比所述N1-甲基假尿苷类和所述尿苷类的总量的第一摩尔百分比。
2.如权利要求1所述的SAM RNA，所述第一摩尔百分比最大至70％。
3.如权利要求1所述的SAM RNA，所述第一摩尔百分比最大至65％。
4.如权利要求1所述的SAM RNA，所述第一摩尔百分比最大至60％。
5.如权利要求1所述的SAM RNA，所述第一摩尔百分比最大至55％。
6.如权利要求1所述的SAM RNA，所述第一摩尔百分比最大至50％。
7.如权利要求1-6中任一项所述的SAM RNA，所述第一摩尔百分比最小是20％。
8.如权利要求1-6中任一项所述的SAM RNA，所述第一摩尔百分比最小是25％。
9.如权利要求1-8
10.如权利要求1-9中任一项所述的SAM RNA，所述异源核酸编码异源蛋白质。
11.如权利要求10所述的SAM RNA，所述异源蛋白质包括免疫原、抗体或免疫治疗分子。
12.如权利要求10所述的SAM RNA，所述异源蛋白质包括免疫原或针对所述免疫原的抗体。
13.如权利要求1-12中任一项所述的SAM RNA，其进一步包含聚腺苷一磷酸(聚(A))尾。
14.如权利要求1-13中任一项所述的SAM RNA，其进一步包含5’非翻译区(5’UTR)，所述5′UTR在所述第一RNA区段和所述第二RNA区段的5’。
15.如权利要求1-14中任一项所述的SAM RNA，其进一步包含3’非翻译区(3’UTR)，所述3’UTR在所述第一RNA区段和所述第二RNA区段的3’，并且任选地在所述聚(A)尾的5’。
16.如权利要求1-15中任一项所述的SAM RNA，其进一步包含5’帽。
17.如权利要求16所述的SAM RNA，所述5’帽是帽-0、帽-1或帽-2。
18.如权利要求16所述的SAM RNA，所述5’帽是帽-1。
19.如权利要求16所述的SAM RNA，所述5’帽是帽-0。
20.一种组合物，其包含如权利要求1-19中任一项所述的SAM RNA和药学上可接受的递送媒介。
21.如权利要求20所述的组合物，所述药学上可接受的递送媒介包括脂质纳米颗粒(LNP)。
22.如权利要求21所述的组合物，所述LNP封装所述SAM RNA。
23.一种在受试者中引发针对免疫原的免疫应答的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的如权利要求12-19中任一项所述的SAM RNA或如权利要求20-22中任一项所述的组合物。
24.如权利要求23所述的方法，所述免疫应答是保护性免疫应答。
25.如权利要求23所述的方法，所述免疫应答是治疗性免疫应答。
26.如权利要求23-25中任一项所述的方法，所述免疫原包括毒液、毒物、过敏原、癌抗原、细菌抗原、病毒抗原、真菌抗原、寄生虫抗原或其片段。
27.如权利要求23-26中任一项所述的方法，所述异源蛋白质包括针对所述免疫原的抗体。
28.如权利要求23-26中任一项所述的方法，所述异源蛋白质包括所述免疫原。
29.如权利要求23-28中任一项所述的方法，所述受试者是人类。
30.一种制造如权利要求1-15中任一项所述的SAM RNA的方法，所述方法包括将RNA聚合酶、所述N1-甲基假尿苷类、所述尿苷类和包含所述SAM RNA的序列的模板核酸混合，从而获得混合物；所述混合物具有所述N1-甲基假尿苷类比所述N1-甲基假尿苷类和所述尿苷类的总量的第二摩尔百分比；所述第二摩尔百分比与所述第一摩尔百分比相同；所述混合是在其中所述RNA聚合酶从所述模板核酸产生所述SAM RNA的条件下进行的。
31.一种制造如权利要求16-19中任一项所述的SAM RNA的方法，所述方法包括：
32.如权利要求30或权利要求31所述的方法，所述RNA聚合酶是T7RNA聚合酶。
...【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种自扩增信使(sam)核糖核酸(rna)，其包含n1-甲基假尿苷类、尿苷类、第一rna区段和第二rna区段；所述第一rna区段包含异源核酸；所述第二rna区段编码能够在细胞内环境中复制所述sam rna的一个或多个蛋白质；所述sam rna具有15％至75％的所述n1-甲基假尿苷类比所述n1-甲基假尿苷类和所述尿苷类的总量的第一摩尔百分比。
2.如权利要求1所述的sam rna，所述第一摩尔百分比最大至70％。
3.如权利要求1所述的sam rna，所述第一摩尔百分比最大至65％。
4.如权利要求1所述的sam rna，所述第一摩尔百分比最大至60％。
5.如权利要求1所述的sam rna，所述第一摩尔百分比最大至55％。
6.如权利要求1所述的sam rna，所述第一摩尔百分比最大至50％。
7.如权利要求1-6中任一项所述的sam rna，所述第一摩尔百分比最小是20％。
8.如权利要求1-6中任一项所述的sam rna，所述第一摩尔百分比最小是25％。
9.如权利要求1-8中任一项所述的sam rna，能够在细胞内环境中复制所述sam rna的所述一个或多个蛋白质包括甲病毒非结构蛋白-1(nsp1)、甲病毒nsp2、甲病毒nsp3和甲病毒nsp4。
10.如权利要求1-9中任一项所述的sam rna，所述异源核酸编码异源蛋白质。
11.如权利要求10所述的sam rna，所述异源蛋白质包括免疫原、抗体或免疫治疗分子。
12.如权利要求10所述的sam rna，所述异源蛋白质包括免疫原或针对所述免疫原的抗体。
13.如权利要求1-12中任一项所述的sam rna，其进一步包含聚腺苷一磷酸(聚(a))尾。
14.如权利要求1-13中任一项所述的sam rna，其进一步包含5’非翻译区(5’utr)，所述5′utr在所述第一rna区段和所述第二rna区段的5’。
15.如权利要求1-14中任一项所述的sam rna，其进一步包含3’非翻译区(3’utr)，所述3’utr在所述第一rna区段和所述第二rna区段的3’，并且任选地在所述聚(a)尾的5’。
16.如权利要求1...
【专利技术属性】
技术研发人员：孔琼曼，G·马鲁吉，V·罗伊，余东，张萌，
申请(专利权)人：葛兰素史克生物有限公司，
类型：发明
国别省市：
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