【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物，特别是涉及一种艾美耳球虫的扩繁方法。
技术介绍
1、高原鼠兔(ochotona curzoniae)伴随青藏高原隆升形成的物种，隶属兔形目鼠兔科鼠兔属，是青藏高原的“关键物种”；2021年，全国草原有害生物危害7.77亿亩；其中严重危害面积3.67亿亩，同比上升10.05％，开展高原鼠兔生物防控技术，对草地鼠类种群的科学管理，降低种群数量。现在主流灭鼠药均以剧毒鼠药为主，此类鼠药毒性高，投放后使家畜或野生动物误食鼠药、及天敌误食死鼠造成动物中毒的报道更是屡见不鲜。
2、艾美耳球虫是高原鼠兔的主要寄生物；具有物种特异性，鼠、兔类球虫无法侵染鸟类，避免对非靶向生物(畜禽等)造成不良影响；球虫生活史包括体内和体外两部分。自然情况下，体外孢子在干燥、高温、强紫外线下会快速死亡，不能长期存活；球虫卵囊随粪便排出体外、孢子化后，经口进入鼠兔肠道进行裂殖生殖，完成生活史；高原鼠兔具有食粪行为，加快球虫在鼠兔种群的快速传播；球虫增加鼠兔的死亡率、降低繁殖力，控制鼠兔种群数量。
3、但是，通过高原鼠兔扩繁艾美耳球虫效率低，不利于大规模使用艾美耳球虫灭鼠。
技术实现思路
1、本专利技术目的是针对以上使用高原鼠兔扩繁存在的效率问题，本专利技术提供一种快速扩繁艾美耳球虫的方法，所述方法采用家兔进行扩繁，设计并控制接种过程，其扩繁速率是高原鼠兔扩繁效率的2.7倍～4倍。
2、本专利技术提供了一种艾美尔球虫扩繁方法，包括如下步骤：
3、(1)
4、(2)接种：使用免疫抑制剂处理家兔后，将艾美耳球虫卵囊接种于家兔体内。
5、进一步地，所述接种选自注射、灌胃；优选为灌胃。
6、进一步地，所述艾美耳球虫卵囊的浓度为2x 104个/ml。
7、进一步地，所述灌胃量为2～5ml，优选为4ml。
8、进一步地，所述漂浮溶液选自饱和尿素溶液、氯化钠溶液、硫酸镁溶液；优选为饱和氯化钠溶液。
9、进一步地，所述免疫抑制剂选自地塞米松、甲泼尼龙琥珀酸钠、氢化可的松、倍他米松、曲安奈德，优选为地塞米松、甲泼尼龙琥珀酸钠。
10、进一步地，在接种前还包括孵化步骤；更进一步地，重铬酸钾与艾美尔球虫溶液以3:1的比例在培养皿孵化，28℃恒温孵化16～24h。
11、进一步地，所述重铬酸钾的浓度为2％～6％；优选为2.5％。
12、在一些具体实施方案中，艾美尔球虫的扩繁方法，包括如下步骤：
13、(1)艾美尔球虫提取液的获取：捕获高原鼠兔，收集1-5天内新鲜粪便，4℃保存1-3天；
14、(2)艾美尔球虫提纯计数：粪便经纯净水研磨、过滤、离心后，使用饱和氯化钠溶液漂浮计数；
15、(3)艾美尔球虫孵化：按2.5％重铬酸钾与球虫溶液样品3:1的比例在培养皿孵化，28℃恒温孵化16-24h；
16、(4)艾美耳球虫快速扩繁：连续给家兔注射0.2ml地塞米松溶液3天后，每只灌喂4×104个球虫卵囊；
17、(5)艾美尔球虫收集：第5-10天，收集新鲜粪便，球虫提纯孵化后，加入2.5％重铬酸钾溶液长期保存。
18、本专利技术还提供了一种防控高原鼠兔的饵料，包括上述方法制备得到的艾美耳球虫。
19、进一步地，所述饵料含有1～6×104艾美尔球虫卵囊/粒。
20、进一步地，所述艾美耳球虫饵料的包括：艾美尔球虫卵囊、保水剂、饲料、edtn-k2、辅料。
21、进一步地，所述辅料包括胡萝卜汁、燕麦、植物油。
22、进一步地，所述保水剂、饲料、edtn-k2的质量比为2～5：0.5～2：0.1～0.3。
23、在一些具体实施方案中，所述保水剂、饲料、edtn-k2的质量比为3：1：0.1。
24、进一步地，艾美耳球虫卵囊溶液包埋进保水剂中。
25、本专利技术提供了上述方法制备得到的艾美耳球虫在防控高原属兔中的应用。
26、本专利技术还提供了一种利用艾美耳球虫防控高原鼠兔的方法，包括如下步骤：
27、(1)选定防控目标区域；
28、(2)每年4月和6月，投放艾美尔球虫饵料于目标区域，每月1次。
29、进一步地，所述目标区域为鼠兔活动洞口，每个洞口投放1～5粒艾美尔球虫饵料；优选为2粒。
30、本专利技术的有益效果是：本专利技术利用家兔扩繁艾美耳球虫的效率比高原鼠兔扩繁艾美耳球虫的效率高，能够快速高效扩繁艾美耳球虫，采用家兔高效扩繁艾美耳球虫的方法，比鼠兔扩繁球虫技术增加2.7倍～4倍以上。
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1.一种艾美尔球虫扩繁方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的艾美尔球虫扩繁方法，其特征在于，所述接种选自注射、灌胃；优选为灌胃。
3.根据权利要求2所述的艾美尔球虫扩繁方法，其特征在于，所述艾美耳球虫卵囊的浓度为2x 104个/mL。
4.根据权利要求3所述的艾美尔球虫扩繁方法，其特征在于，所述灌胃量为2～5mL，优选为4mL。
5.根据权利要求1所述的艾美尔球虫扩繁方法，其特征在于，所述漂浮溶液选自饱和尿素溶液、氯化钠溶液、硫酸镁溶液；优选为饱和氯化钠溶液。
6.根据权利要求1所述的艾美尔球虫扩繁方法，其特征在于，所述免疫抑制剂选自地塞米松、甲泼尼龙琥珀酸钠、氢化可的松、倍他米松、曲安奈德；优选为地塞米松、甲泼尼龙琥珀酸钠。
7.根据权利要求1所述的艾美尔球虫扩繁方法，其特征在于，在接种前还包括孵化步骤；进一步地，重铬酸钾与艾美尔球虫溶液以3:1的比例在培养皿孵化，28℃恒温孵化16～24h。
8.根据权利要求1所述的艾美尔球虫扩繁方法，其特征在于，所述重铬酸钾的浓度为2％～
9.根据权利要求1～8任意一项所述的方法得到的艾美耳球虫在防控高原属兔中的应用。
10.一种防控高原鼠兔的饵料，其特征在于，所述饵料包括权利要求1～9任一项所述方法制备得到的艾美耳球虫。
...【技术特征摘要】
1.一种艾美尔球虫扩繁方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的艾美尔球虫扩繁方法，其特征在于，所述接种选自注射、灌胃；优选为灌胃。
3.根据权利要求2所述的艾美尔球虫扩繁方法，其特征在于，所述艾美耳球虫卵囊的浓度为2x 104个/ml。
4.根据权利要求3所述的艾美尔球虫扩繁方法，其特征在于，所述灌胃量为2～5ml，优选为4ml。
5.根据权利要求1所述的艾美尔球虫扩繁方法，其特征在于，所述漂浮溶液选自饱和尿素溶液、氯化钠溶液、硫酸镁溶液；优选为饱和氯化钠溶液。
6.根据权利要求1所述的艾美尔球虫扩繁方法，其特征在于，所述免疫抑制...
【专利技术属性】
技术研发人员：曲家鹏，王蓉，谈昭贤，姚宝辉，王苏芹，冯见卓，张妍，王义弘，陈欣扬，周华坤，林方舟，
申请(专利权)人：中国科学院西北高原生物研究所，
类型：发明
国别省市：
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