【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及aie分子的，具体涉及一种对未折叠蛋白具有响应的aie分子及其合成方法与应用。
技术介绍
1、聚集诱导发光(aie)分子在分散性良好的溶剂中不发光或弱发光，而在聚集态时发出强烈的荧光，为荧光成像及相关生物医学应用带来新的机遇。分子内运动限制(rim)是aie分子目前较为公认的发光机理，rim越强发光越强，因此也可以用于设计激活成像的荧光探针。蛋白质合成是细胞繁衍复制所必须的过程，其在肿瘤细胞中更为旺盛，往往增殖活性越高的肿瘤，蛋白质合成越旺盛，具有普适性。未折叠蛋白在内质网中被加工成折叠蛋白，前者的含量更加能够反应蛋白质合成的水平，因此检测它的水平具有重要意义。
2、随着精准外科理念的提出，术中导航技术逐渐被应用于临床，让外科手术有了“地图”的指引，不再“盲切”。而利用荧光术中导航技术进行的荧光引导手术，其荧光分子探针能在术中实时点亮癌细胞，突破了传统手术治疗的精度极限。但目前的荧光探针大部分都是针对特定的蛋白、酶或者其他条件进行响应成像，虽然它们特异性非常高，但不具有泛用性，从而抬高了探针的开发成本、降低了利用率。肿瘤的增殖活性通常都比较高，蛋白质合成旺盛，未折叠蛋白含量高。设计一款针对未折叠蛋白的检测探针，可以解决手术探针泛用性差的难题。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于克服上述
技术介绍
的不足，提供一种对未折叠蛋白具有响应的aie分子及其合成方法与应用。本专利技术的对未折叠蛋白具有响应的aie分子可以靶向细胞的内质网，并与未折叠蛋白中的巯基反应，
2、为实现上述目的，本专利技术提供一种对未折叠蛋白具有响应的aie分子，其结构式如下：
3、
4、本专利技术还提供一种上述对未折叠蛋白具有响应的aie分子的合成方法，其合成路线如下：
5、
6、进一步地，所述对未折叠蛋白具有响应的aie分子的合成方法，包括如下步骤：
7、1)中间产物1的合成：
8、称取zn粉末、4-氨基二苯甲酮和4-溴二苯甲酮放入双口烧瓶，置换氮气，并加入超干四氢呋喃，在0℃下缓慢逐滴添加ticl4，然后恢复至室温，随后混合物在90-100℃回流条件下过夜；待反应完成后，用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭反应，用乙酸乙酯萃取，并用无水硫酸镁干燥，旋转蒸发仪减压除去溶剂得到粗产物；粗产物通过柱层析色谱柱纯化，洗脱剂为石油醚与乙酸乙酯，得到深黄色油状物即为中间产物1；
9、2)中间产物2的合成：
10、在双口烧瓶中加入中间产物1和thf，然后加入boc酸酐和et3n；混合物在90-100℃回流条件下搅拌3-4小时；待反应结束后，加入盐酸；水相用二氯甲烷萃取，合并有机相，并继续用二氯甲烷萃取；萃取液用饱和食盐水洗涤，并用无水硫酸镁干燥，旋转蒸发仪减压除去溶剂得到粗产物；粗产物通过柱层析色谱柱纯化，洗脱剂为石油醚与乙酸乙酯，得到黄色固体即为中间产物2；
11、3)中间产物3的合成：
12、在双口烧瓶中加入中间产物2、双(频哪醇合)二硼、pd(dppf)cl2和koac，注入二恶烷后，通过冷冻-泵-解冻循环对系统进行脱气，并在105-110℃回流条件下将混合物搅拌过夜；待反应结束后，旋转蒸发仪减压除去二恶烷，并将混合物重新溶解在二氯甲烷中；接着加入盐酸，水相用二氯甲烷萃取，合并有机相，并继续用二氯甲烷萃取；萃取液用饱和食盐水洗涤，并用无水硫酸镁干燥，旋转蒸发仪减压除去溶剂得到粗产物；粗产物通过柱层析色谱柱纯化，洗脱剂为石油醚与乙酸乙酯，得到黄色粉末即为中间产物3；
13、4)中间产物4的合成：
14、在双口烧瓶中加入中间产物3、4,7-二溴苯并[c]-1,2,5-噻二唑、pd(pph3)4和k2co3；在系统中安装回流冷凝器并密封，然后注入thf/h2o混合物；通过冷冻-泵-解冻循环对系统进行脱气，并在90-100℃回流条件下搅拌混合物过夜；待反应结束后，旋转蒸发仪减压除去thf，并将混合物重新溶解在二氯甲烷中；接着加入盐酸，水相用二氯甲烷萃取，合并有机相，并继续用二氯甲烷萃取；萃取液用饱和食盐水洗涤，并用无水硫酸镁干燥，旋转蒸发仪减压除去溶剂得到粗产物；粗产物通过柱层析色谱柱纯化，洗脱剂为石油醚与乙酸乙酯，得到橙色固体即为中间产物4；
15、5)中间产物5的合成：
16、在双口烧瓶中加入中间产物4、4-(甲氧羰基)苯硼酸、pd(pph3)4和k2co3，然后注入的thf/h2o混合物；通过冷冻-抽气-解冻循环对系统进行脱气，然后在90-100℃回流条件下搅拌混合物过夜；待反应结束后，旋转蒸发仪减压除去thf，并将混合物重新溶解在二氯甲烷中。紧接着加入盐酸，水相用二氯甲烷萃取，合并有机相，并继续用二氯甲烷萃取；萃取液用饱和食盐水洗涤，并用无水硫酸镁干燥，旋转蒸发仪减压除去溶剂得到粗产物；粗产物通过柱层析色谱柱纯化，洗脱剂为石油醚与乙酸乙酯，最终得到橙色固体即为中间产物5；
17、6)中间产物6的合成：
18、称取中间产物5注入thf/meoh混合物中，持续搅拌下加入naoh水溶液，混合物在80-90℃条件下回流搅拌1-2小时；待反应结束后，旋转蒸发仪减压除去有机溶剂，紧接着加入盐酸，水相用二氯甲烷萃取，合并有机相，并继续用二氯甲烷萃取；萃取液用饱和食盐水洗涤，并用无水硫酸镁干燥，旋转蒸发仪减压除去溶剂得到粗产物；粗产物通过柱层析色谱柱纯化，洗脱剂为甲醇、乙酸与二氯甲烷，最终得到橙色固体即为中间产物6；
19、7)中间产物7的合成：
20、在双口烧瓶中加入中间产物6和10ml的tfa/dcm混合物，将溶液搅拌1-2小时，然后在氮气保护下进行真空浓缩，得到的黄色固体直接使用，无需分离或纯化；向固体中加入纯乙酸和马来酸酐，混合物在100-110℃下搅拌过夜；冷却至室温后，加入甲苯，旋转蒸发仪减压除去溶剂得到粗产物；粗产物通过柱层析色谱柱纯化，洗脱剂为乙酸与二氯甲烷，得到黄色固体产物即为中间产物7；
21、8)mi-aie-tsg的合成：
22、将合成的中间产物7溶于干燥的dmf中，然后将hbtu直接加入溶液中；静置后，向混合物中加入的n-(2-氨乙基)-4-甲基苯磺酰胺，并滴加diea以调节溶液ph至8-8.5，然后继续搅拌8-10小时；待反应结束后，把溶剂风干，将剩余的油状产物溶于甲醇中，并通过高效液相色谱进行纯化，冻干产物，得到黄色粉末即为mi-aie-tsg；
23、其中，所述中间产物1的结构式为：
24、
25、所述中间产物2的结构式为：
26、
27、所述中间产物3的结构式为：
28、
29、所述中间产物4的结构式为：
30、
31、所述中间产物5的结构式为：
32、
33、所述中间产物6的结构本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种对未折叠蛋白具有响应的AIE分子，其特征在于：所述对未折叠蛋白具有响应的AIE分子的结构式如下：
2.一种权利要求1所述对未折叠蛋白具有响应的AIE分子的合成方法，其特征在于：其合成路线如下：
3.根据权利要求2所述的合成方法，其特征在于：包括如下步骤：
4.根据权利要求3所述的合成方法，其特征在于：所述步骤1)中，Zn粉末、4-氨基二苯甲酮、4-溴二苯甲酮与TiCl4的摩尔比为(4-6):1:1:(4-6)；洗脱剂为石油醚:乙酸乙酯＝(5-8):1；
5.根据权利要求3所述的合成方法，其特征在于：所述步骤3)中，中间产物2、双(频哪醇合)二硼、Pd(dppf)Cl2与KOAc的摩尔比为(2.1-3):(2.5-3):0.1:(8.4-9)；洗脱剂为石油醚:乙酸乙酯＝(20-22):1；
6.根据权利要求3所述的合成方法，其特征在于：所述步骤5)中，中间产物4、4-(甲氧羰基)苯硼酸、Pd(PPh3)4与K2CO3的摩尔比为(0.93-1):(1.9-2):(0.09-0.1):(9.3-10)；
7
8.根据权利要求3所述的合成方法，其特征在于：所述步骤7)中，中间产物6、TFA/DCM混合物的摩尔体积比为(0.32-0.4)mmol/10mL；
9.根据权利要求3所述的合成方法，其特征在于：所述步骤8)中，中间产物7、HBTU、N-(2-氨乙基)-4-甲基苯磺酰胺的摩尔比为0.1:(0.12-0.2):(0.12-0.2)。
10.权利要求1所述的对未折叠蛋白具有响应的AIE分子用于制备肿瘤手术导航工具的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种对未折叠蛋白具有响应的aie分子，其特征在于：所述对未折叠蛋白具有响应的aie分子的结构式如下：
2.一种权利要求1所述对未折叠蛋白具有响应的aie分子的合成方法，其特征在于：其合成路线如下：
3.根据权利要求2所述的合成方法，其特征在于：包括如下步骤：
4.根据权利要求3所述的合成方法，其特征在于：所述步骤1)中，zn粉末、4-氨基二苯甲酮、4-溴二苯甲酮与ticl4的摩尔比为(4-6):1:1:(4-6)；洗脱剂为石油醚:乙酸乙酯＝(5-8):1；
5.根据权利要求3所述的合成方法，其特征在于：所述步骤3)中，中间产物2、双(频哪醇合)二硼、pd(dppf)cl2与koac的摩尔比为(2.1-3):(2.5-3):0.1:(8.4-9)；洗脱剂为石油醚:乙酸乙酯＝(20-22):1；
6.根据权利要求3所述的合成方法，...
【专利技术属性】
技术研发人员：戴俊，王世宣，吴梦，
申请(专利权)人：华中科技大学同济医学院附属同济医院，
类型：发明
国别省市：
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