一种神经毒性β-淀粉样蛋白二聚体及其制备方法与应用技术

本发明专利技术提供了一种神经毒性β‑淀粉样蛋白二聚体及其制备方法与应用。所述方法包括使β淀粉样蛋白单体即Aβ单体在酸性环境下生成亚稳态Aβ聚合物1，调pH至中性环境生成Aβ聚合物2。本发明专利技术将通过模拟AD患者脑组织中的细胞与组织微环境酸碱度变化，在不引入序列突变或添加催化剂的条件下，提出一种适用于不同Aβ氨基酸序列或长度的Aβ二聚体制备技术，通过诱导Aβ单体之间自发形成多种共价键，以获得结构稳定、毒性强、接近AD患者脑源的Aβ二聚体。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种神经毒性β-淀粉样蛋白二聚体及其制备方法与应用，属于生物。

技术介绍

1、β淀粉样蛋白(aβ)二聚体在阿尔茨海默病(ad)患者脑组织、脑脊液和血液中均有分布，它能够引起神经元的电生理功能紊乱、神经突断裂等毒性作用，因此是一个潜在的诊断和干预靶点。由于ad患者脑组织中的aβ二聚体的形成机制不明，目前仅能通过人为引入突变位点或采用酶催化的方式，制备具有特定共价键的、特定氨基酸序列的aβ二聚体。实际上，尚无证据显示这些突变位点或酶催化事件能够在患者脑部发生。同时，ad患者脑组织中的aβ二聚体具有高度多样性的氨基酸序列和共价键形成方式，目前的aβ二聚体制备技术无法达到这一需求。本专利技术要解决的技术问题是，开发一种适用于不同aβ氨基酸序列或长度的aβ二聚体制备技术，并通过模拟细胞和组织微环境的酸碱度变化，引起aβ单体之间自发形成多种共价键，以获得接近ad患者脑源的aβ二聚体。

2、本专利技术提供一种在体外制备神经毒性aβ二聚体的方法，为研究aβ聚集机理及其影响ad发生的分子病理学机制提供基础，并为靶向药物和检测技术的开发提供关键技术支本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种神经毒性β-淀粉样蛋白二聚体的制备方法，所述方法包括使β淀粉样蛋白单体即Aβ单体在酸性环境下生成亚稳态Aβ聚合物1，调pH至中性环境生成Aβ聚合物2。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述酸性环境的pH值为4.5-6.5，优选为4.7-6，更优选为4.9-5.8；

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述中性环境的pH值包括7.2-7.4，优选为7.3。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中，使Aβ单体在酸性环境下生成亚稳态Aβ聚合物1包括将Aβ单体稀释后，在35-40℃孵育，优选37℃孵育；

5.根据权利要求1-...

【技术特征摘要】

1.一种神经毒性β-淀粉样蛋白二聚体的制备方法，所述方法包括使β淀粉样蛋白单体即aβ单体在酸性环境下生成亚稳态aβ聚合物1，调ph至中性环境生成aβ聚合物2。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述酸性环境的ph值为4.5-6.5，优选为4.7-6，更优选为4.9-5.8；

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述中性环境的ph值包括7.2-7.4，优选为7.3。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中，使aβ单体在酸性环境下生成亚稳态aβ聚合物1包括将aβ单体稀释后，在35-40℃孵育，优选37℃孵育；

5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中，所述调节至中性环境生成aβ聚合物2的过程包括将aβ聚合物1置于中性环境中孵育6-96小时，优选12-48小时，进一步优选24小时。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其中，所述方法还包括aβ聚合物2的变性；

7.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，其中，所述方法还包括产物分离纯化的过程；

8.根据权利要求1-7中任一项所述的方法，其中，所述方法还包括将获得的aβ二聚体冻干；

9.根据权利要求1-8中任一项所述的方法，其中，所述方法还包括aβ单体的制备过程；所述aβ单体的制备过程包括将通过化学合成或重组表达方式得到的aβ单体加...

【专利技术属性】
技术研发人员：洪伟，陈平，陶敏，陈瑞香，刘琰，
申请(专利权)人：深圳先进技术研究院，
类型：发明
国别省市：