一种基于Chelex-100法和碱裂解法的细菌裂解方法技术

本发明专利技术公开了一种基于Chelex‑100法和碱裂解法的细菌裂解方法，包括如下步骤：S1、配制裂解液，裂解液中Chelex‑100∶NaOH＝0～0.5∶0.5～1；S2、使用步骤S1配置的裂解液进行革兰氏阳性菌和/或革兰氏阴性菌的核酸的粗提取。本发明专利技术采用上述一种基于Chelex‑100法和碱裂解法的细菌裂解方法，本发明专利技术的细菌裂解方法能够适用于革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的核酸的提取，具有广泛的应用价值；本发明专利技术的细菌裂解方法可以实现细菌的快速裂解，且提取的粗核酸样本能够满足PCR和LAMP检测需求；细菌于80℃加热5min即可快速提取核酸，整个提取过程在10min即可完成。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及细菌裂解，尤其是涉及一种基于chelex-100法和碱裂解法的细菌裂解方法。

技术介绍

1、核酸提取的主要步骤为细胞裂解和核酸纯化，其中细胞裂解是提取的前提，不同病原微生物的结构组成会影响细胞裂解的效果。细菌为典型原核微生物，其细胞壁主要成分是肽聚糖，具有保持细胞外形、抑制机械和渗透损伤、防止大分子入侵等功能。革兰氏阴性细菌的细胞壁肽聚糖含量较少(仅1～2层)，而革兰氏阳性细菌的细胞壁主要由厚达40～80nm的多层肽聚糖(15～50层)组成，裂解的难度也更高。

2、研究表明食品微生物的污染主要是细菌和真菌，病毒携带较少，其中细菌污染的比例为7成。为适应高效、快速的现场化检测需求，针对致病微生物开发创新的核酸提取技术或快捷的核酸提取装置，将极大缩短核酸提取的步骤，从而加快核酸诊断测试的速度。

技术实现思路

1、本专利技术的目的是提供一种基于chelex-100法和碱裂解法的细菌裂解方法，以适用于革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌的同时，实现细菌的快速裂解，且提取的粗核酸样本能够满足pcr和la本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于Chelex-100法和碱裂解法的细菌裂解方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种基于Chelex-100法和碱裂解法的细菌裂解方法，其特征在于，步骤S1中，裂解液为：100％40mg/mL Chelex-100、50％40mg/mL Chelex-100+50％0.05mol/L NaOH、50％40mg/mL Chelex-100+50％0.1mol/LNaOH。

3.根据权利要求2所述的一种基于Chelex-100法和碱裂解法的细菌裂解方法，其特征在于，步骤S1中，裂解液为：50％40mg/mL Chelex-100+50％...

【技术特征摘要】

1.一种基于chelex-100法和碱裂解法的细菌裂解方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种基于chelex-100法和碱裂解法的细菌裂解方法，其特征在于，步骤s1中，裂解液为：100％40mg/ml chelex-100、50％40mg/ml chelex-100+50％0.05mol/l naoh、50％40mg/ml chelex-100+50％0.1mol/lnaoh。

3.根据权利要求2所述的一种基于chelex-100法和碱裂解法的细菌裂解方法，其特征在于，步骤s1中，裂解液为：50％40mg/ml chelex-100+50％0....

【专利技术属性】
技术研发人员：方海田，刘慧燕，魏晓博，田云，
申请(专利权)人：宁夏大学，
类型：发明
国别省市：