【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医药领域，尤其涉及一种非洲猪瘟mrna疫苗组合及其应用。
技术介绍
1、非洲猪瘟(asf)是由非洲猪瘟病毒(asfv)引起的一种感染家猪和野猪的急性出血热，传染性强、致死率高，是猪最重要、最严重的疾病之一。因此非洲猪瘟被世界动物卫生组织(oie)列为法定报告疫病，同时也被我国列为一类动物疫病和重点防范的外来动物疫病之一。自该病毒2018年进入我国后，累计引发137起疫情，导致我国2019年生猪产量相比2018年减少超过1亿头，同时以生猪为基础的交通运输业，肝素的供应以及用于食品和糖果的明胶的供应业也受到影响，给我国养猪业及相关产业造成了极大的损失。
2、目前在非洲猪瘟疫苗开发中主要通过两种方式：一、直接对原始非洲猪瘟病毒进行灭活；二、采用基因缺失手段，敲除毒力基因后获得重组病毒疫苗。然而由于非洲猪瘟为双链dna病毒，拥有超大基因组，免疫逃逸机制复杂，导致灭活疫苗的毒性作用大于预防效果，在接种灭活疫苗后，容易导致猪的死亡；通过基因敲除的方式制备疫苗，不仅操作复杂，成本高，成功率低，且不同毒株缺失同一基因产生的效果不同，容易引发安全性问题。因此，亟需开发安全、有效、可商业化的非洲猪瘟疫苗。
技术实现思路
1、为了克服现有技术的不足，本专利技术的第一个目的在于提供一种非洲猪瘟mrna疫苗组合，其能解决非洲猪瘟疫苗安全性不足，保护性抗原蛋白不清楚，疫苗的免疫效果不佳的问题。
2、本专利技术的第二个目的在于提供一种非洲猪瘟mrna疫苗的应用，其能解决
3、根据第一方面，在一实施例中，提供一种非洲猪瘟mrna疫苗，每种所述非洲猪瘟mrna疫苗由编码抗原蛋白的核糖核酸和mrna元件组成，所述抗原蛋白为b602l、cd2v、ep153r、p30、p54、p72中的至少一种。
4、在一实施例中，每种所述非洲猪瘟mrna疫苗的核糖核酸编码一种抗原蛋白。
5、在一实施例中，所述非洲猪瘟mrna疫苗包含6种非洲猪瘟mrna疫苗，每种所述非洲猪瘟mrna疫苗的核糖核酸编码一种抗原蛋白，所述抗原蛋白为b602l、cd2v、ep153r、p30、p54、p72中的任意一种。
6、在一实施例中，所述抗原蛋白还包括分子佐剂。
7、在一实施例中，所述分子佐剂为特夫素、h-2kd至少一种。
8、在一实施例中，所述p72蛋白c端可融合(即键连)t4噬菌体纤维蛋白(foldon)的三聚化基序标签。
9、在一实施例中，所述抗原蛋白的n端键连有信号肽。
10、在一实施例中，所述抗原蛋白的c端键连有his标签。
11、在一实施例中，所述信号肽为bm40信号肽或tpa信号肽。
12、在一实施例中，所述特夫素的氨基酸序列如seq id no.13所示。
13、在一实施例中，所述h-2kd的氨基酸序列如seq id no.14所示。
14、在一实施例中，所述t4噬菌体纤维蛋白三聚化基序的氨基酸序列如seq id no.15所示。
15、在一实施例中，所述抗原蛋白b602l的n端键连有信号肽，c端键连有his标签。
16、在一实施例中，所述抗原蛋白cd2v的n端信号肽、分子佐剂，c端键连有his标签。
17、在一实施例中，所述抗原蛋白ep153r的n端依次键连有分子佐剂、信号肽序列，c端依次键连有分子佐剂、his标签。
18、在一实施例中，所述抗原蛋白p30的n端依次键连有分子佐剂、信号肽序列，c端依次键连有分子佐剂、his标签。
19、在一实施例中，所述抗原蛋白p54的n端依次键连有分子佐剂、信号肽序列，c端依次键连有分子佐剂、his标签。
20、在一实施例中，所述抗原蛋白p72的n端依次键连有分子佐剂、信号肽序列，c端依次键连有分子佐剂、his标签。
21、在一实施例中，所述抗原蛋白b602l的氨基酸序列如seq id no.7所示。
22、在一实施例中，所述抗原蛋白cd2v的氨基酸序列如seq id no.8所示。
23、在一实施例中，所述抗原蛋白ep153r的氨基酸序列如seq id no.9所示。
24、在一实施例中，所述抗原蛋白p30的氨基酸序列如seq id no.10所示。
25、在一实施例中，所述抗原蛋白p54的氨基酸序列如seq id no.11所示。
26、在一实施例中，所述抗原蛋白p72的氨基酸序列如seq id no.12所示。
27、在一实施例中，所述mrna元件依序包括5’cap、5’utr、kozak序列、3’utr和poly a尾。编码抗原蛋白的核糖核酸位于kozak序列和3’utr之间。
28、在一实施例中，所述5’cap结构包括cap0、cap1、cap2中的至少一种。
29、在一实施例中，所述5’utr核苷酸序列如seq id no.16所示。
30、在一实施例中，所述3’utr核苷酸序列seq id no.17所示。
31、在一实施例中，所述poly a尾长度为50-150nt。
32、在一实施例中，编码所述抗原蛋白b602l的核苷酸序列如seq id no.1所示。
33、在一实施例中，编码所述抗原蛋白cd2v的核苷酸序列如seq id no.2所示。
34、在一实施例中，编码所述抗原蛋白ep153r的核苷酸序列如seq id no.3所示。
35、在一实施例中，编码所述抗原蛋白p30的核苷酸序列如seq id no.4所示。
36、在一实施例中，编码所述抗原蛋白p54的核苷酸序列如seq id no.5所示。
37、在一实施例中，编码所述抗原蛋白p72的核苷酸序列如seq id no.6所示。
38、根据第二方面，在一实施例中，提供一种编码第一方面所述的非洲猪瘟mrna疫苗的dna片段。
39、根据第三方面，在一实施例中，提供一种含有第一方面所述的非洲猪瘟mrna疫苗或第二方面所述的dna片段的重组质粒。
40、根据第四方面，在一实施例中，提供一种含有第一方面所述的非洲猪瘟mrna疫苗、第二方面所述的dna片段或第三方面所述的重组质粒的重组细胞。
41、根据第五方面，在一实施例中，提供一种非洲猪瘟抗原蛋白组合物，所述非洲猪瘟抗原蛋白组合物包括来源于非洲猪瘟病毒的6种蛋白，所述6种抗原蛋白为b602l、cd2v、ep153r、p30、p54和p72。可以将6种蛋白中的每一种单独表达，取其中的一种，或取其中的至少两种蛋白以形成组合物，作为预防或治疗非洲猪瘟病毒的药物。
42、根据第六方面，在一实施例中，提供一种非洲猪瘟融合蛋白，所述非洲猪瘟表融合蛋白包括来源于非洲猪瘟病毒的本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种非洲猪瘟mRNA疫苗，其特征在于，一种非洲猪瘟信使核糖核酸(mRNA)疫苗，其特征在于，所述疫苗编码至少一种非洲猪瘟病毒抗原蛋白，所述抗原蛋白为B602L、CD2V、EP153R、P30、P54、P72中的至少一种。
2.如权利要求1所述的非洲猪瘟mRNA疫苗，其特征在于，每种所述疫苗编码一种非洲猪瘟抗原蛋白；
3.如权利要求2所述的非洲猪瘟mRNA疫苗，其特征在于，所述抗原蛋白还包括信号肽；
4.如权利要求1所述的非洲猪瘟mRNA疫苗，其特征在于，所述抗原蛋白B602L的氨基酸序列如SEQ ID No.7所示；
5.一种编码权利要求1-4任一项所述的非洲猪瘟mRNA疫苗中mRNA的DNA片段。
6.一种含有权利要求1-4任一项所述的非洲猪瘟mRNA疫苗或权利要求5所述的DNA片段的重组质粒。
7.一种含有权利要求1-4任一项所述的非洲猪瘟mRNA表位疫苗、权利要求5所述的DNA片段或权利要求6所述的重组质粒的重组细胞。
8.一种非洲猪瘟蛋白组合物，其特征在于：所述非洲猪瘟蛋白组合物包括来
9.一种非洲猪瘟融合蛋白，其特征在于：所述非洲猪瘟表位融合蛋白包括来源于非洲猪瘟病毒的6种抗原蛋白，所述6种抗原蛋白为B602L、CD2V、EP153R、P30、P54和P72。
10.一种含有权利要求1-4任一项所述的非洲猪瘟mRNA疫苗、权利要求5所述的DNA片段、权利要求6所述的重组质粒、权利要求7所述的重组细胞、权利要求8所述的非洲猪瘟蛋白组合物或权利要求9所述的非洲猪瘟融合蛋白的非洲猪瘟疫苗。
...【技术特征摘要】
1.一种非洲猪瘟mrna疫苗，其特征在于，一种非洲猪瘟信使核糖核酸(mrna)疫苗，其特征在于，所述疫苗编码至少一种非洲猪瘟病毒抗原蛋白，所述抗原蛋白为b602l、cd2v、ep153r、p30、p54、p72中的至少一种。
2.如权利要求1所述的非洲猪瘟mrna疫苗，其特征在于，每种所述疫苗编码一种非洲猪瘟抗原蛋白；
3.如权利要求2所述的非洲猪瘟mrna疫苗，其特征在于，所述抗原蛋白还包括信号肽；
4.如权利要求1所述的非洲猪瘟mrna疫苗，其特征在于，所述抗原蛋白b602l的氨基酸序列如seq id no.7所示；
5.一种编码权利要求1-4任一项所述的非洲猪瘟mrna疫苗中mrna的dna片段。
6.一种含有权利要求1-4任一项所述的非洲猪瘟mrna疫苗或权利要求5所述的dna片段的重组质粒...
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