【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及分子育种，尤其涉及一种rcwus1基因在调节月季再生中的应用。
技术介绍
0、技术背景
1、月季（rosa hybrida）是蔷薇科（rosaceae）蔷薇属（rosa）多年生常绿或者半常绿木本观赏植物。月季兼具花型端庄、花色艳丽、花香馥郁等特点，有很高的观赏和经济价值，位于世界四大切花之首，广泛应用于园林绿化、庭院装饰、盆花、香料和化妆品工业等方面。
2、月季育种目标主要聚焦在花色、花型、花香、抗病虫害等性状的改良上。目前月季的栽培品种约有3-3.5万个，由中国、中东、欧洲的8-20个蔷薇属植物反复杂交、回交而得，使得现代月季遗传背景相对狭隘，花香、抗性等优良性状逐步丧失，加之月季品种间遗传背景复杂，染色体数目和倍性的差异很难实现远缘杂交育种。因而月季育种工作迫在眉睫，但只通过传统的杂交育种技术很难改良其性状。
3、上世纪60年代兴起的植物基因工程技术可从基因层面快速实现品种的改良，为月季育种提供了一种新的思路和途径。在此背景下，月季再生体系和遗传转化体系的建立极为关键。然而，由于月季本身复杂的遗传背景和基因型的限制，体细胞胚萌发率低，遗传转化困难，现有研究主要针对特定品种且萌发率低，尚未建起各月季品种通用的再生体系。因此，要想通过基因工程技术实现月季品种改良，体细胞胚萌发难题的突破至关重要，寻找萌发相关的基因，采用基因技术实现月季再生体系和遗传转化体系的建立，目前鲜有报道。
技术实现思路
1、
2、本专利技术筛选出再
3、为实现以上目的，本专利技术提供以下技术方案：
4、如seq id no: 1所示的核苷酸序列，或其转录翻译的蛋白的如下任一应用：
5、a）调节月季腋芽萌发中的应用;
6、b）调节月季体胚再生中的应用；
7、c）月季基因编辑育种；
8、d）月季转基因育种。
9、基因编辑技术是指对基因组中的某些dna序列进行定点改造的遗传操作技术，其基本原理是通过人工构建能特异性切割dna序列的核酸酶，对目的基因片段进行精准的靶向剪切，使ｄｎａ双链断裂， 随后激发细胞内的dna修复机制，产生基因修改。常用的核酸酶主要有锌指核酸内切酶、类转录激活因子效应物核酸酶、crispr/cas9等，其中crispr/cas9技术系统以其简单、精确、高效和低成本而得到广泛应用。
10、转基因育种（genetically modified breeding, gmb）是指通过现代分子生物学技术将一个或多个基因添加到一个生物基因组，从而生产具有改良特征的生物的育种方法。
11、基于本专利技术筛选到的rcwus1基因的特性，可以通过现有技术手段基因编辑或转基因的方式，调控 rcwus1的表达，从而获得目的性状。
12、进一步的，本专利技术还提供一种含调控如seq id no: 1所示的核苷酸序列的产品的如下任一应用：
13、a）调节月季腋芽萌发中的应用;
14、b）调节月季体胚再生中的应用；
15、c）月季基因编辑育种；
16、d）月季转基因育种。
17、进一步的，所述产品为试剂盒。
18、进一步的，本专利技术提供了一种重组质粒的如下任一应用：
19、a）调节月季腋芽萌发中的应用;
20、b）调节月季体胚再生中的应用；
21、c）月季基因编辑育种；
22、d）月季转基因育种
23、所述重组质粒含rcwus1基因反向互补的编码区序列，所述rcwus1基因序列如seqid no: 1所示，编码区序列如seq id no: 2所示。
24、作为一种实施方式，本专利技术还提供一种促进月季腋芽萌发的方法，所述方法为过表达rcwus1基因或蛋白，提高月季中rcwus1基因或蛋白的表达量，所述rcwus1基因的核苷酸序列如seq id no: 1所示。
25、作为另一种实施方式，本专利技术提供一种调节月季体胚再生的方法，在体胚中过表达rcwus1基因或蛋白，提高月季体胚中rcwus1基因或蛋白的表达量，所述rcwus1基因的核苷酸序列如seq id no: 1所示。
26、本专利技术的有益效果：
27、本专利技术从月季品种‘月月粉’基因组中鉴定出一个再生候选基因rcwus1,发现该基因在月季组织部位顶芽和体胚中高表达，表达信号集中于根尖分生组织、茎尖分生组织区域以及体胚的边缘位置，在体胚内部和愈伤组织等已分化细胞中几乎无表达。在月季花枝不同位点芽中rcwus1的表达情况分析中，发现rcwus1的表达与腋芽活性呈正相关，在活性芽中表达量高，在休眠芽中表达量低。因此本申请推测rcwus1可能参与月季的再生。
28、本专利技术中根据rcwus1在月季花枝不同位点芽中的表达结果，瞬时沉默和过表达腋芽中的rcwus1，发现rcwus1的异常表达会影响腋芽的萌发和生长，过表达rcwus1能促进腋芽的生长，反正，沉默则会抑制生长。
29、本专利技术在月季生长状态良好、颗粒型紧密的体细胞胚中过表达rcwus1基因，研究结果也发现转化率提高了6.35%。过表达rcwus1的处理体细胞胚生长旺盛，出现增殖现象甚至可观察到诸多芽点，再生效率比对照高出35.47%。总之，rcwus1对月季的再生具有重要意义。
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1.如SEQ ID NO: 1所示的核苷酸序列，或其转录翻译的蛋白的如下任一应用：
2.一种促进月季腋芽萌发的方法，其特征在于，过表达RcWUS1基因或蛋白，提高月季中RcWUS1基因或蛋白的表达量，所述RcWUS1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO: 1所示。
3.一种调节月季体胚再生的方法，其特征在于，在体胚中过表达RcWUS1基因或蛋白，提高月季体胚中RcWUS1基因或蛋白的表达量，所述RcWUS1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO: 1所示。
【技术特征摘要】
1.如seq id no: 1所示的核苷酸序列，或其转录翻译的蛋白的如下任一应用：
2.一种促进月季腋芽萌发的方法，其特征在于，过表达rcwus1基因或蛋白，提高月季中rcwus1基因或蛋白的表达量，所述rcwus1基因的核苷酸序...
【专利技术属性】
技术研发人员：晏慧君，景维坤，白雪，王其刚，邱显钦，张颢，蹇洪英，王慧纯，陈敏，唐开学，
申请(专利权)人：云南省农业科学院花卉研究所，
类型：发明
国别省市：
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