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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于中药检测,具体涉及一种广枣特征图谱的建立方法及其黄酮类成分测定方法。
技术介绍
1、广枣是中成药冠心疏通胶囊的君药,主要功效为行气活血,养心,安神,用于气滞血瘀,胸痹作痛,心悸气短,心神不安。研究显示广枣中的黄酮类物质对心血管系统具有良好的保护做作用。金丝桃苷和槲皮素是广枣中黄酮类成分的代表性物质,金丝桃苷在抗心、脑损伤方面具有良好的作用,槲皮素在心血管疾病有良好效果。
2、现有技术中缺乏对广枣质量的系统研究,因此,提供一种能够体现广枣特征信息的特征图谱的建立方法以及测定其黄酮类成分含量的测定方法,成为亟待解决的问题。
技术实现思路
1、为了解决现有技术中存在的上述问题,本专利技术提供了一种广枣特征图谱的建立方法及其黄酮类成分测定方法。本专利技术要解决的技术问题通过以下技术方案实现:
2、本专利技术的第一方面提供了一种广枣特征图谱的建立方法,包括以下步骤:
3、将广枣供试品配制成供试品溶液;
4、将所述供试品溶液注入高效液相色谱仪,以乙腈为流动相a,以磷酸水溶液为流动相b,在目标时间段下以目标浓度进行梯度洗脱,得到供试品色谱图;
5、利用若干批次广枣供试品的供试品色谱图中的色谱峰构建广枣特征图谱。
6、在一个具体的实施例中,所述高效液相色谱仪的色谱柱为c18色谱柱,柱温为25~40℃,检测波长为360nm或370nm,流速为0.8~1.0ml/min。
7、在一个具体的实施例中,所述流
8、所述梯度洗脱的条件包括:
9、0~12min,流动相a的体积百分比为10%~26%,流动相b的体积百分比为74%~90%;
10、12~18min,流动相a的体积百分比为26%,流动相b的体积百分比为74%;
11、18~30min,流动相a的体积百分比为26%~30%,流动相b的体积百分比为70%~74%;
12、30~38min,流动相a的体积百分比为30%~50%,流动相b的体积百分比为50%~70%;
13、38~43min,流动相a的体积百分比为50%,流动相b的体积百分比为50%;
14、43~45min,流动相a的体积百分比为50%~10%,流动相b的体积百分比为50%~90%;
15、45~55min,流动相a的体积百分比为10%,流动相b的体积百分比为90%。
16、在一个具体的实施例中,利用若干批次广枣供试品的供试品色谱图中的色谱峰构建广枣特征图谱,包括:
17、以若干批次广枣供试品的供试品色谱图中均存在的色谱峰为共有峰构建广枣特征图谱。
18、在一个具体的实施例中,将广枣供试品配制成供试品溶液,包括:
19、将广枣药材粉碎得到广枣供试品,称取广枣供试品放置于容器中,向所述容器中加入甲醇,超声溶解后过滤,得到供试品溶液。
20、本专利技术的第二方面提供了一种广枣中黄酮类成分的测定方法,包括以下步骤:
21、将广枣供试品配制成供试品溶液;
22、将金丝桃苷对照品和槲皮素对照品配制成对照品溶液;
23、将所述供试品溶液注入高效液相色谱仪,以乙腈为流动相a,以磷酸水溶液为流动相b,在目标时间段下以目标浓度进行梯度洗脱,得到供试品色谱图;
24、将所述对照品溶液注入高效液相色谱仪,以乙腈为流动相a,以磷酸水溶液为流动相b,在目标时间段下以目标浓度进行梯度洗脱,得到对照品色谱图;
25、根据所述对照品色谱图中金丝桃苷色谱峰的峰面积得到金丝桃苷的线性回归方程,根据所述对照品色谱图中槲皮素色谱峰的峰面积得到槲皮素的线性回归方程;
26、根据所述供试品色谱图中金丝桃苷色谱峰的峰面积和所述金丝桃苷的线性回归方程,计算所述供试品溶液中金丝桃苷的含量;根据所述供试品色谱图中槲皮素色谱峰的峰面积和所述槲皮素的线性回归方程,计算所述供试品溶液中槲皮素的含量。
27、在一个具体的实施例中,所述高效液相色谱仪的色谱柱为c18色谱柱,柱温为25~40℃,流速为0.8~1.0ml/min,检测波长为360nm或370nm。
28、在一个具体的实施例中,所述流动相b为0.1%~0.5%的磷酸水溶液;
29、所述梯度洗脱的条件包括:
30、0~12min,流动相a的体积百分比为10%~26%,流动相b的体积百分比为74%~90%;
31、12~18min,流动相a的体积百分比为26%,流动相b的体积百分比为74%;
32、18~30min,流动相a的体积百分比为26%~30%,流动相b的体积百分比为70%~74%;
33、30~38min,流动相a的体积百分比为30%~50%,流动相b的体积百分比为50%~70%;
34、38~43min,流动相a的体积百分比为50%,流动相b的体积百分比为50%;
35、43~45min,流动相a的体积百分比为50%~10%,流动相b的体积百分比为50%~90%;
36、45~55min,流动相a的体积百分比为10%,流动相b的体积百分比为90%。
37、在一个具体的实施例中,将金丝桃苷对照品和槲皮素对照品配制成对照品溶液,包括:
38、称取金丝桃苷对照品放置于第一容器中,向所述第一容器中加入甲醇,得到浓度为150~250μg/ml的金丝桃苷母液;
39、称取槲皮素对照品放置于第二容器中,向所述第二容器中加入甲醇,得到成浓度为200~300μg/ml的槲皮素母液;
40、按照所述金丝桃苷母液和所述槲皮素母液体积比为1~20:1量取所述金丝桃苷母液和所述槲皮素母液并进行混合,得到对照品溶液。
41、与现有技术相比,本专利技术的有益效果:
42、1、本专利技术通过高效液相色谱仪构建了广枣的特征图谱,以乙腈为流动相a,以磷酸水溶液为流动相b,在目标时间段下以目标浓度进行梯度洗脱,得到的特征图谱中的色谱峰分离度好,该方法稳定、精密度高、重复性良好,通过该方法得到的广枣特征图谱能够全面体现广枣的特征信息;
43、2、本专利技术提供的广枣中黄酮类成分的测定方法,能够快速、准确的测量广枣中金丝桃苷和槲皮素的含量,通过广枣中黄酮类成分作为广枣的质量评价指标,能够更好的评价广枣药材的质量。
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1.一种广枣特征图谱的建立方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的一种广枣特征图谱的建立方法,其特征在于,所述高效液相色谱仪的色谱柱为C18色谱柱,柱温为25~40℃,检测波长为360nm或370nm,流速为0.8~1.0ml/min。
3.根据权利要求2所述的一种广枣特征图谱的建立方法,其特征在于,所述流动相B为0.1%~0.5%的磷酸水溶液;
4.根据权利要求1所述的一种广枣特征图谱的建立方法,其特征在于,利用若干批次广枣供试品的供试品色谱图中的色谱峰构建广枣特征图谱,包括:
5.根据权利要求1所述的一种广枣特征图谱的建立方法,其特征在于,将广枣供试品配制成供试品溶液,包括:
6.一种广枣中黄酮类成分的测定方法,其特征在于,包括以下步骤:
7.根据权利要求6所述的一种广枣中黄酮类成分的测定方法,其特征在于,所述高效液相色谱仪的色谱柱为C18色谱柱,柱温为25~40℃,流速为0.8~1.0ml/min,检测波长为360nm或370nm。
8.根据权利要求7所述的一种广枣中黄酮类
9.根据权利要求6所述的一种广枣中黄酮类成分的测定方法,其特征在于,
...【技术特征摘要】
1.一种广枣特征图谱的建立方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的一种广枣特征图谱的建立方法,其特征在于,所述高效液相色谱仪的色谱柱为c18色谱柱,柱温为25~40℃,检测波长为360nm或370nm,流速为0.8~1.0ml/min。
3.根据权利要求2所述的一种广枣特征图谱的建立方法,其特征在于,所述流动相b为0.1%~0.5%的磷酸水溶液;
4.根据权利要求1所述的一种广枣特征图谱的建立方法,其特征在于,利用若干批次广枣供试品的供试品色谱图中的色谱峰构建广枣特征图谱,包括:
5.根据权利要求1所述的...
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