【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于分析化学，尤其是一种鳕鱼基质的动物源性成分标准样品的制备方法。
技术介绍
1、目前，我国陆续发布了多种食品中动物源性成分检测鉴别的国家标准和行业标准，但是尚不完全，因此，积极开展动物源性成分检测相关标准样品的研制工作，填补该检测领域的空白，具有很重要的研究价值与现实意义。
2、本标准样品可为相关动物源性产品检测的质量控制、检测新方法研究、方法验证、试剂盒质量评价、试剂研发、能力验证等活动提供可靠实物保障，为实验室质量控制及溯源等提供技术支持。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于克服现有技术的不足之处，提供一种均匀性高，稳定性强，能够为动物源性成分的检测提供技术支持，为标准检测方法的建立提供实验支撑的鳕鱼基质的动物源性成分标准样品的制备方法。
2、本专利技术解决其技术问题是采取以下技术方案实现的：
3、一种鳕鱼基质的动物源性成分标准样品的制备方法，包括以下步骤：
4、步骤s1、选取鳕鱼片，置于-20℃冰箱中预冷冻24h，切成0.5×0.5×4cm细条状，蒸锅上汽蒸制20min，制得熟制样品；热水淋洗，洗去表面粘附脂肪，放凉至室温，移至无菌pet容器中；将熟制样品转移至无菌容器，置于烘箱中50℃下36h烘干至样品恒重，制得干燥样品；将干燥样品进行移至粉碎机粉碎，得到粗制肉粉；将粗制肉粉转移至经液氮冷却的单罐行星式球磨机研磨罐中细磨2-3min，过80目标准筛，得到细粉，将细粉移至50ml离心管，-20℃保存，标记标签，制
5、步骤s2、选取动物，去头、去皮、去骨，切取肌肉组织，洗去血污、剔除筋膜，置于-20℃冰箱中冷冻24h，切成0.5×0.5×4cm细条状，蒸锅上汽蒸制20min，制得熟制样品；热水淋洗，洗去表面残余的脂肪与血污，放凉，置于无菌pet容器中；将熟制样品转移至无菌容器，置于烘箱中50℃下36h烘干至样品恒重，制得干燥样品；将干燥样品进行粉碎机粉碎，得到粗制肉粉；将粗制肉粉转移至经液氮冷却的单罐行星式球磨机研磨罐中细磨2-3min，过80目标准筛，得到细粉，将细粉移至50ml离心管，-20℃保存，标记标签，制得动物样品添加物；
6、步骤s3、在恒温恒湿、无菌操作间中，将步骤s1中制得的鳕鱼基质与步骤s2中制得的动物样本添加物按质量比99:1进行混匀，制得标准样品，随后将标准样品分装于1ml西林瓶中封盖密封；
7、步骤s4、采用实时pcr方法测定标准样品的均匀性及稳定性。
8、优选地，所述的熟制样品在50℃烘箱时每3h称重一次。
9、优选地，所述的干燥样品在粉碎机中进行3次每次4秒的粉碎。
10、优选地，所述的粗制肉粉在单罐行星式球磨机研磨罐中进行3次研磨，且研磨转速为600rpm 2min。
11、优选地，在所述的单罐行星式球磨机研磨罐中，研磨前加入占原料的重量比为0.5％的蔗糖脂肪酸酯。
12、优选地，所述的液氮为浸没粗制肉粉的状态。
13、优选地，待液氮挥发15s后再对所述的粗制肉粉进行研磨。
14、优选地，鳕鱼基质及动物样品添加物的最小取样量为40mg。
15、优选地，所述的西林瓶需经160℃干热处理2h。
16、本专利技术的优点和积极效果是：
17、本专利技术在制备鳕鱼基质以及制备动物样品添加物时，在制备过程中通过将鳕鱼片或动物样品放置于-20℃的冰箱中预冷冻24h，从而达到对肉质彻底除油的目的，进一步避免了原材料处理不好导致实验数据不准确的问题，为动物源性成分的检测提供更加准确的技术支持。
18、本专利技术通过将粗制肉粉转移至单罐行星式球磨机研磨罐中研磨三次，以实现打粉的均匀性，并在研磨之前在研磨罐中放入液氮冷却15s,待液氮挥发后在进行研磨，以使粗制肉粉变脆，使得研磨更充分，同时还在研磨罐中加入了蔗糖脂肪酸酯，以消除粉末之间产生的静电，提高了打粉的均匀性。
19、本专利技术通过采用实时pcr方法对标准样品进行测试，从保存于-18--20℃低温条件下的标准样品中随机抽取样品，按照第一年每2个月、第二年每3个月的时间间隔点，在每个时间点、每次随机抽取2瓶样品(m＝2,n＝2)用于长期稳定性的评估；在模拟运输条件下检验标准样品的稳定性，采用同步设计方法在-20-50℃和极端高温65℃条件下，选择测试条件-20℃7d、0-4℃7d和14d、25℃7d、50℃7d、65℃3d，进行短期稳定性研究，最后通过方差分析方法评价样品稳定性。
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1.一种鳕鱼基质的动物源性成分标准样品的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种鳕鱼基质的动物源性成分标准样品的制备方法，其特征在于：所述的熟制样品在50℃烘箱时每3h称重一次。
3.根据权利要求1所述的一种鳕鱼基质的动物源性成分标准样品的制备方法，其特征在于：所述的干燥样品在粉碎机中进行3次每次4秒的粉碎。
4.根据权利要求1所述的一种鳕鱼基质的动物源性成分标准样品的制备方法，其特征在于：所述的粗制肉粉在单罐行星式球磨机研磨罐中进行3次研磨，且研磨转速为600rpm2min。
5.根据权利要求1所述的一种鳕鱼基质的动物源性成分标准样品的制备方法，其特征在于：在所述的单罐行星式球磨机研磨罐中，研磨前加入占原料的重量比为0.5％的蔗糖脂肪酸酯。
6.根据权利要求1所述的一种鳕鱼基质的动物源性成分标准样品的制备方法，其特征在于：所述的液氮为浸没粗制肉粉的状态。
7.根据权利要求1所述的一种鳕鱼基质的动物源性成分标准样品的制备方法，其特征在于：待液氮挥发15s后再对所述的粗制肉粉进行研磨。
8.根据权利要求1所述的一种鳕鱼基质的动物源性成分标准样品的制备方法，其特征在于：鳕鱼基质及动物样品添加物的最小取样量为40mg。
9.根据权利要求1所述的一种鳕鱼基质的动物源性成分标准样品的制备方法，其特征在于：所述的西林瓶需经160℃干热处理2h。
...【技术特征摘要】
1.一种鳕鱼基质的动物源性成分标准样品的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种鳕鱼基质的动物源性成分标准样品的制备方法，其特征在于：所述的熟制样品在50℃烘箱时每3h称重一次。
3.根据权利要求1所述的一种鳕鱼基质的动物源性成分标准样品的制备方法，其特征在于：所述的干燥样品在粉碎机中进行3次每次4秒的粉碎。
4.根据权利要求1所述的一种鳕鱼基质的动物源性成分标准样品的制备方法，其特征在于：所述的粗制肉粉在单罐行星式球磨机研磨罐中进行3次研磨，且研磨转速为600rpm2min。
5.根据权利要求1所述的一种鳕鱼基质的动物源性成分标准样品的制备方法，其特征在...
【专利技术属性】
技术研发人员：郑文杰，季超，刘伟，赵良娟，陈颖，徐香富，
申请(专利权)人：天津师范大学，
类型：发明
国别省市：
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