【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及小麦抗性淀粉含量预测，尤其是涉及一种小麦抗性淀粉含量水平的鉴定方法。
技术介绍
1、抗性淀粉(rs)作为小麦面粉在健康饮食方面的重要指标，获得小麦面粉中与抗性淀粉有关的物化性质对于筛选高抗性淀粉含量的小麦种质资源有很大帮助。由于抗性淀粉具有与膳食纤维相似的生理功能，可以促进肠道中有益细菌的生长,有降低餐后血糖和胰岛素应答、提高机体对胰岛素敏感性、预防便秘和结肠癌发生等重要生理功能，是近年来功能食品领域和作物遗传领域的研究热点之一。
2、现有技术不足之处在于：小麦抗性淀粉含量相关的理化性质没有全面研究，对小麦面粉抗性淀粉含量和小麦理化性质关系的研究大部分围绕着物理、化学改性对制作小麦面粉rs含量的影响，针对小麦籽粒rs含量相关的理化性质暂时缺少成体系的研究与分析。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种通过淀粉颗粒精细结构判断小麦抗性淀粉含量水平的方法，以解决上述
技术介绍
中提出的问题。
2、根据本专利技术的一个目的，本专利技术提供上述一种小麦抗性淀粉含量水平的鉴定方法，以指标小麦籽粒支链淀粉fb3链含量和指标小麦籽粒淀粉颗粒表观形态为指标的鉴定方法。
3、进一步地，所述指标小麦籽粒淀粉颗粒表观形态通过离子溅射仪喷金后入电子显微镜扫描和摄影。
4、进一步地，所述指标小麦籽粒淀粉颗粒表观形态的鉴定方法，使用电子显微镜对小麦淀粉颗粒形态进行扫描，包括以下步骤：
5、s01，将目标小麦种质资源进行脱粒，去除杂质
6、s02，水分平衡一周后研磨粉碎，过100目样品筛，低湿柜储存；
7、s03，称取样品100mg于2ml旋口管中；
8、s04，加入1ml 4％sds-washbuffer，涡旋混匀，10000rpm离心1min，弃上清，重复2次；
9、s05，加1ml去离子水，涡旋混匀，10000rpm离心1min，弃上清，重复5次；最终加入1ml无水乙醇，涡旋混匀；
10、s06，用200μl移液枪吸取制备好的淀粉悬浮液，滴在铜台的导电胶上，铺匀，放37℃过夜；
11、s07，离子溅射仪喷金后使用merlin compactzeiss入镜观察和摄影，放大倍率为3000倍。
12、进一步地，所述指标小麦籽粒支链淀粉fb3链含量通过高效阴离子交换法测定，将峰面积除以dp6-dp76样品的峰总面积得到不同链长的比例。
13、进一步地，所述指标小麦籽粒支链淀粉fb3链含量的鉴定方法，使用高效阴离子交换法对小麦支链淀粉链长分布进行鉴定，包括以下步骤：
14、s01，将目标小麦种质资源进行脱粒，去除杂质，脱去麦壳；
15、s02，水分平衡一周后研磨粉碎，过100目样品筛，低湿柜储存；
16、s03，称取低聚糖标准品套装的dp4-dp7各5mg，重悬于5ml双蒸水中，沸水浴60min，间断涡旋混匀；
17、s04，吸取2.5ml的标准品溶液至新离心管，加入125μl醋酸钠，5μl叠氮化钠和10μl异淀粉酶，38℃恒温放置24h；
18、s05，取600μl于离心管中，室温氮吹干燥；
19、s06，溶于600μl流动相中，8000rpm离心5min，取上清上样；
20、s07，称取已纯化淀粉5mg，重悬于5ml双蒸水中，沸水浴60min，间断涡旋混匀；
21、s08，取2.5ml的糊化样品，加入125μl醋酸钠(0.1m，ph6.0)，5μl nan3(1％)和10μl异淀粉酶(2000μ/μl)，38℃放置24h；
22、s09，取600μl于离心管中，室温氮吹干燥；
23、s10，溶于600μl流动相中，12000rpm离心5min，取上清上样；
24、s11，将配制的标准品与样品上机测定；
25、色谱系统采用thermo ics5000+离子色谱系统(ics500+，thermo fisherscientific，μsa)，采用dionextmcarbopactmpa10(250*4.0mm，10μm)液相色谱柱，进样量为20μl；
26、流动相a相：200mm naoh；b相：200mm naoh/200mm naac，柱温为30℃，利用电化学检测器对组分进行分析检测；
27、数据在ics5000(thermo scientific)上采集，并使用chromeleon 7.2cds(thermoscientific)进行处理；将峰面积除以dp6-dp76样品的峰总面积，求得不同链长长度占比。
28、本专利技术小麦抗性淀粉含量的评价筛选指标，判断小麦抗性淀粉含量水平，小麦籽粒去除杂质，将未脱麸皮的小麦籽粒水分平衡后研磨粉碎，通过高效阴离子置换法测定支链淀粉的链长分布，通过电子显微镜观测小麦淀粉颗粒表观形态。支链淀粉fb3链(dp≥37)量更大，淀粉颗粒表面更光滑的小麦抗性淀粉含量更高。
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1.一种小麦抗性淀粉含量水平的鉴定方法，其特征在于，以小麦籽粒支链淀粉fb3链含量和小麦籽粒淀粉颗粒表观形态为指标的鉴定方法。
2.根据权利要求1所述的小麦抗性淀粉含量水平的鉴定方法，其特征在于，所述指标小麦籽粒淀粉颗粒表观形态通过离子溅射仪喷金后入电子显微镜扫描和摄影。
3.根据权利要求2所述的小麦抗性淀粉含量水平的鉴定方法，其特征在于，所述指标小麦籽粒淀粉颗粒表观形态的鉴定方法，使用电子显微镜对小麦淀粉颗粒形态进行扫描，包括以下步骤：
4.根据权利要求1所述的小麦抗性淀粉含量水平的鉴定方法，其特征在于，所述指标小麦籽粒支链淀粉fb3链含量通过高效阴离子交换法测定，将峰面积除以DP6-DP76样品的峰总面积得到不同链长的比例。
5.根据权利要求4所述的小麦抗性淀粉含量水平的鉴定方法，其特征在于，所述指标小麦籽粒支链淀粉fb3链含量的鉴定方法，使用高效阴离子交换法对小麦支链淀粉链长分布进行鉴定，包括以下步骤：
6.根据权利要求5所述的小麦抗性淀粉含量水平的鉴定方法，其特征在于，采用斯皮尔曼相关性分析对小麦淀粉fb3量和R
...【技术特征摘要】
1.一种小麦抗性淀粉含量水平的鉴定方法，其特征在于，以小麦籽粒支链淀粉fb3链含量和小麦籽粒淀粉颗粒表观形态为指标的鉴定方法。
2.根据权利要求1所述的小麦抗性淀粉含量水平的鉴定方法，其特征在于，所述指标小麦籽粒淀粉颗粒表观形态通过离子溅射仪喷金后入电子显微镜扫描和摄影。
3.根据权利要求2所述的小麦抗性淀粉含量水平的鉴定方法，其特征在于，所述指标小麦籽粒淀粉颗粒表观形态的鉴定方法，使用电子显微镜对小麦淀粉颗粒形态进行扫描，包括以下步骤：
4.根据权利要求1所述的小麦...
【专利技术属性】
技术研发人员：杨宝菊，刘星辰，王蕙羽棠，孔一淅，罗建飞，杜庭庭，乔梁，陈晓杰，薛飞，李仕金，
申请(专利权)人：云南农业大学，
类型：发明
国别省市：
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