一种鸡产气荚膜梭菌Mbp基因及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种鸡产气荚膜梭菌Mbp基因及其应用，所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明专利技术通过从产气荚膜梭菌强毒株提取全基因组，设计引物扩增Mbp基因，利用原核表达方法制备得到重组Mbp蛋白；使用动物实验评估其免疫保护力，首次发现鸡产气荚膜梭菌蛋白Mbp具有良好的免疫反应性，可以显著减轻鸡产气荚膜梭菌引起的临床症状；本发明专利技术提供的具有免疫保护作用的鸡产气荚膜梭菌蛋白Mbp具有作为研制鸡产气荚膜梭菌亚单位疫苗的潜力。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种鸡产气荚膜梭菌mbp基因及其应用，属于基因工程领域。

技术介绍

1、产气荚膜梭菌(clostridium perfringens，cp)是一种革兰氏阳性、兼性厌氧、可以形成芽孢的杆状细菌，其中的g型产气荚膜梭菌可以导致禽的坏死性肠炎(necroticenteritis，ne)，其急性临床型会导致2-4周龄的肉鸡突然死亡，而亚临床型则常导致肠道粘膜损伤、出血，以及各项生产性能下降等。此外禽坏死性肠炎还容易受到球虫感染、高蛋白饲料、免疫抑制疾病等易感因素的影响，其对肠道的破坏可能导致其他禽类病原的继发感染，从而导致更严重的疾病和经济损失。

2、防控禽坏死性肠炎的策略主要通过在饲料中补充抗生素添加剂进行预防和治疗。然而，为了应对威胁人类和动物健康的抗生素耐药菌株的出现，1999年欧洲联盟(eu)禁止使用促生长抗生素，禽坏死性肠炎感染问题也随之日益严重，因此迫切需要替代抗生素的防控方法。设计开发新型疫苗如亚单位疫苗是目前研究的热点。

3、mbp是麦芽糖abc转运底物结合蛋白，在猪链球菌上被报道为具有免疫原性的蛋白，其在革兰本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种鸡产气荚膜梭菌Mbp基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

2.一种表达权利要求1所述鸡产气荚膜梭菌Mbp基因的蛋白，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。

3.一种重组质粒、表达盒或重组细胞，其特征在于，含有权利要求1所述的鸡产气荚膜梭菌Mbp基因。

4.一种构建权利要求3所述重组质粒的方法，其特征在于，包括以下步骤：将权利要求1所述的鸡产气荚膜梭菌Mbp基因插入表达载体pET28a，得到重组质粒pET28a-Mbp。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，利用同源重组方法将所述鸡产气荚膜...

【技术特征摘要】

1.一种鸡产气荚膜梭菌mbp基因，其特征在于，其核苷酸序列如seq id no.3所示。

2.一种表达权利要求1所述鸡产气荚膜梭菌mbp基因的蛋白，其特征在于，其氨基酸序列如seq id no.4所示。

3.一种重组质粒、表达盒或重组细胞，其特征在于，含有权利要求1所述的鸡产气荚膜梭菌mbp基因。

4.一种构建权利要求3所述重组质粒的方法，其特征在于，包括以下步骤：将权利要求1所述的鸡产气荚膜梭菌mbp基因插入表达载体pet28a，得到重组质粒pet28a-mbp。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，利用同源重组方法将所述鸡产气荚膜梭菌mbp基因插入表达载体pet28a；所述同源重组体系为：...

【专利技术属性】
技术研发人员：石火英，陈逸飞，李泽伟，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：