诊断和治疗癌症的方法和用于其中的组合物技术

本发明专利技术涉及癌症的诊断，为此的组合物及治疗癌症的治疗方法。本发明专利技术提供诊断和治疗癌症的方法和用于其中的组合物。多核苷酸和多肽ＳＭＡＧＰ是肿瘤特异的。因此ＳＭＡＧＰ的诊断对肿瘤诊断是有价值的。除了其诊断价值外，抗ＳＭＡＧＰ的抗体也可作为治疗性试剂用于治疗肿瘤。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及癌症的诊断，为此的组合物及治疗癌症的治疗方法。
技术介绍
在欧洲和美国，癌症是继心脏病之后第二主要的死亡原因。癌症的特征表现为失控的细胞生长，从而导致对正常组织的局部侵入或异常生长的全身性扩散。特定类型的癌症或癌症发展的特定阶段可能涉及两个元素。 活体中发挥功能的各种组织的细胞分裂或生长通常以有序和可控的方式发生。这是通过精细的生长调控机制完成的，其中包括接触，发出信 号及邻近细胞间的其他通讯。在机能组织中，刺激型或抑制型生长信号通 常在细胞间进行交换。当没有刺激信号时，细胞通常不进行分裂，而当抑 制信号占主导地位时，细胞将停止分裂。然而，在癌细胞中，这种发出信 号或通讯是有缺陷的或完全被破坏。因此细胞将持续分裂；侵入邻近结构 中，并脱离原来的肿瘤块，在机体的其他部位形成新的生长点。其后转为 恶性的过程称为转移。癌症通常是指恶性肿瘤而非良性肿瘤。良性肿瘤细胞与正常的周围细 胞是一样的。这些类型的肿瘤几乎总是包裹在纤维囊中，不具有转移到机 体其他部分的能力。这些肿瘤影响局部器官但并不会损伤它们；它们通常 保持很小，多年后也不会产生症状。只有当肿瘤长的太大而干扰其他器官 时才有治疗的必要。相反，恶性肿瘤比良性肿瘤生长的更快；它们渗入并 破坏局部组织。 一些恶性肿瘤可以通过血液或淋巴系统扩散到全身。恶性 肿瘤的不可预测及失控生长，使其非常危险，而且在很多情况下是致命的。这些肿瘤在形态上是原组织的非典型形态，而且不被包裹。恶性肿瘤通常 会在手术切除后复发。因此，治疗通常针对的是恶性癌症或恶性肿瘤，专利技术一种癌症形成早 期征候的敏感标志物及鉴定与之相关的有效的生长抑制剂是非常重要的。转移过程是一个几个连续步骤均必须成功完成的级联过程。第一步包 括癌症细胞从原始肿瘤中脱离，随后降解并侵入到细胞外基质(ECM) 及周围组织中。 一旦肿瘤细胞成功地渗入并在淋巴和/或血管系统中存活， 它们将由于物理限制(如毛细血管的大小)而俘获一个次级位点，其生长 能力由细胞与器官环境(如化学因子激活)的分子间相互作用决定。最后，需要血管供应的补充而形成肉眼可见的转移瘤(Chambers, A.F.，等， Nat. Rev, Cancer 2 (2002) 563-572; Welch, D.R.， Clin. Exp. Metastasis 15(1997) 272-306)。根据转移中所涉及的大量不同的细胞和分子过程,转移的细胞通常表 现出大范围有助于其转移能力的基因改变。这包括致癌基因的激活，金属 蛋白酶和活动因子的补充，以及多种粘着分子的表达和/或功能性的改变(Hunter, K.W.，等，Cancer Res. 61 (2001) 8866-8872; Skubitz， A.P.， Cancer Treat, Res. 107 (2002) 305-329)。此外，已描述了8个己知作为 转移抑制子的基因(Steeg， P.S.， Nat. Rev. Cancer 3 (2003) 55-63)。 尽管对本领域的了解在逐步提高，但许多参与转移过程的关键遗传和生化 事件仍然需要确定。WO 02/08288描述了分泌的和跨膜多肽及其编码核酸。附图说明图130所示的 是SMAGP的多肽序列
技术实现思路
专利技术概述令人惊讶地发现，编码多肽SMAGP (小细胞粘附糖蛋白)的核酸在肿 瘤细胞，特别是在转移性肿瘤细胞中过量表达，而在正常细胞中的表达是 非常低的。因此，SMAGP是一种有价值的新型靶位点，用于诊断和治疗 癌症，优选的诊断和治疗结肠癌，肺癌，胰腺癌和乳腺癌以及转移瘤，优5选地为肝脏中的转移瘤。另外，SMAGP在肿瘤发展的早期和晚期发展阶段表现出不同的定位，因此也是一种有价值的用于区分肿瘤阶段的工具。因此本专利技术提供了一种确定在患者中癌症相关的SMAGP存在的方 法，包括(i) 从怀疑包含肿瘤细胞或其部分的患者中获得生物样品；(ii) 检测样品中编码SMAGP的核酸的量或SMAGP多肽的量；和(iii) 将所述核酸或多肽的量与预先测定的表明在所述细胞中癌症相 关的SMAGP表达或存在的校准线的标准值进行比较，从而确定所述患 者中癌症相关的SMGAP的表达或存在。本专利技术进一步提供了一种包含上述方法检测患者中存在或不存在癌症 的方法。另外，本专利技术提供了一种检测患者的组织或体液待测样品是否含有肿 瘤细胞或来源于肿瘤细胞的方法，其中使用了待测样品和第二个来源于同一个体或同一种族不同个体的非肿瘤细胞的样品，该方法包括以下步骤(a) 将每个样品在严谨杂交条件下与核酸探针进行温育，所述核酸探针选自由下述核酸序列组成的组(0 SEQIDNO: l的核酸序列，或其片段；(ii) 与(i)中的任何核酸序列互补的核酸序列；(iii) 在严谨条件下与(i)中的序列杂交的核酸序列；禾口 (W)在严谨条件下与(ii)中的序列杂交的核酸序列；和(b) 测定每份样品与所述探针杂交的大约量，和(c) 将待测样品杂交的大约量与所述第二个样品杂交的大约量进行 比较，从而鉴定待测样品是否比所述第二个样品含有更大量的特定核酸或 核酸混合物。本专利技术还包括一种检测肿瘤的方法，包括 a)将怀疑患有癌症的患者样品与核酸探针进行温育，所述样品选自体 液，细胞或所述细胞的细胞提取物或细胞培养物上清组成的组，由此所述 样品含有核酸，所述核酸探针选自由下述核酸组成的组(i) SEQIDN0:1所示的核酸或与所述序列互补的核酸，禾口(ii) 与(i)中核酸之一杂交的核酸，和b) 对杂交进行检测，优选地通过样品核酸和/或核酸探针的另外的结 合配偶体或通过X-射线放射显影进行检测。c) 将所述核酸杂交的量与预先测定的表明所述样品中癌症相关的SMAGP表达的校准线的标准值进行比较，从而确定所述患者是否患有癌症o所述癌症优选地是结肠癌，肺癌，胰腺癌或乳腺癌。优选地，通过与SMAGP核酸或多肽结合的结合试剂进行检测。更优 选地，结合试剂是指在严谨条件下与SMAGP核酸杂交的探针或抗体，优 选地是与SMAGP多肽，优选细胞外结构域结合的单克隆抗体。所有这些方法也可以通过使用抗体来实现，其中SMAGP多肽通过抗 体与多肽之间的相互作用进行检测。本专利技术还提供一种监测患者中癌症，特别是转移性癌症进程的方法。 在该方法中，在至少两个不同的时间点及时检测癌症患者的生物样品(例 如体液，如血液，细胞裂解物或RNA样品的反转录物)中SMAGP核酸或 多肽的量并进行比较。根据量的改变，可以推测出所述癌症的进程信息。特别是转移的形成 导致SMAGP的产生增加，例如mRNA的表达。本专利技术进一步包括诊断试剂盒，其含有一种或多种在使用样品的诊断 试验中用于与SMAGP核酸杂交的寡核苷酸探针或引物或抗体，所述样品 获自患有或怀疑患有癌症的患者。本专利技术进一步包括治疗有效量的抗SMAGP多肽的抗体在治疗癌症， 优选地治疗转移性癌症中的应用。优选地，对胰腺肿瘤局部给药该抗体。本专利技术进一步包括与多肽SMAGP结合的抗体在生产用于抑制肿瘤细 胞的增殖和/或侵入潜力的组合物中的应用。本专利技术进一步包括依照本发 明的抗体的应用，其中在体外对细胞培养物给药该组合物。本专利技术进一步包括依照本专利技术的抗体的应用，其中组合物是一种药本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种确定患者中与转移相关的ＳＭＡＧＰ存在的方法，其包含（ｉ）在来自怀疑含有肿瘤细胞或其部分的患者的生物样品中，检测编码ＳＭＡＧＰ的核酸的量或多肽ＳＭＡＧＰ的量；和　（ｉｉｉ）将所述核酸或多肽的量与预先测定的表明在所述细胞中转移相关的Ｓ ＭＡＧＰ表达或存在的校准线的标准值进行比较，从而确定所述患者中转移相关的ＳＭＡＧＰ的表达或存在。

【技术特征摘要】
EP 2003-7-28 03016586.41.一种确定患者中与转移相关的SMAGP存在的方法，其包含(i)在来自怀疑含有肿瘤细胞或其部分的患者的生物样品中，检测编码SMAGP的核酸的量或多肽SMAGP的量；和(iii)将所述核酸或多肽的量与预先测定的表明在所述细胞中转移相关的SMAGP表达或存在的校准线的标准值进行比较，从而确定所述患者中转移相关的SMAGP的表达或存在。2. —种确定患者的组织或体液的待测样品是否包含具有转移潜能的肿瘤 细胞或来源于转移的肿瘤细胞的方法，其中使用了待测样品和第二种来源 于同一个体或同一种族不同个体的非肿瘤细胞的样品，该方法包含以下步骤(a) 将每个各自样品在严谨杂交条件下与核酸探针进行温育，所述核酸探针选自由下述核酸序列组成的组(i) SEQIDNO:5的核酸序列，或(ii) SEQIDNO:6的核酸序列，或(iii) SEQIDNO:9的核酸序列，或(iv) SE...

【专利技术属性】
技术研发人员：玛丽克里斯蒂娜里奥，内斯林塔贝尔德圣阿杜安，乌尔里希魏德勒，
申请(专利权)人：霍夫曼拉罗奇有限公司，
类型：发明
国别省市：CH[]