【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及微生物，尤其涉及一种球孢白僵菌bbzy230628菌株及其应用。
技术介绍
1、粗狭肋鳃金龟 holotrichia scrobiculata brenske属鞘翅目 (coleoptera)，鳃金龟科（melolonthidae），其成虫取食危害农作物和果树地上部分的叶片，幼虫在地下啃食农作物和果树根系，是我国农业上的重要害虫，我国广泛分布。近年来，该虫在银杏、蓝梅等种植区发生，危害近年来，随着种植结构的调整及全球环境气候的变化，粗狭肋鳃金龟的发生危害日趋严重，其成虫取食危害银杏地上部分叶片，幼虫取食危害作物和植物地下根系，引起银杏植株干枯死亡，给农业生产造成严重的经济损失，尤其是近年来随着全球气候变化及种植结构的调整，其危害日趋加重。目前，对粗狭肋鳃金龟的防治措施主要还是以农药防治为主的防治措施。然后，当前还没有防治粗狭肋鳃金龟的特效药剂，同时化学农药虽然具有见效快，但化学农药的施用不仅会造成农产品农药残留及严重的环境污染，而且易杀死粗狭肋鳃金龟的自然天敌，并使目标害虫产生抗药性，因而不符合害虫治理的可持续性及生态控制的要求。而生物防治措施具有生态、持续控制的特点，因而生物防治则是粗狭肋鳃金龟生态、持续控制的重要途径。
2、昆虫病原真菌因其具有自然流行性强、不染污环境、对人、畜、植物安全，害虫极少或不产生抗性，有利于环境保护的特点，成为害虫生物防治的重要措施。因此，研究粗狭肋鳃金龟的生防真菌，为粗狭肋鳃金龟的生物防治提供
3、球孢白僵菌( beauveria bassiana)属于子囊菌门(ascomycota)，盘菌亚门(pezizomycotina)，粪壳菌纳(sordariomycetes)，肉座菌目(hypocreales)，虫草科(cordycipitaceae)，白僵菌属(beauveria)。球孢白僵菌作为一种优良的生防菌，具有致病性强、寄主范围广、生产成本低、无环境污染等特点，被广泛用于鳞翅目、鞘翅目及同翅目等农林业病虫害防治。然而，遗憾的是目前还未见有自然感染粗狭肋鳃金龟成虫的报道，也未见有从自然罹病粗狭肋鳃金龟上分离到的球孢白僵菌原始菌株。再加上由于球孢白僵菌有着丰富的遗传多样性及一定的寄主专一性，因而筛选出对防治靶标高毒高效的菌株是应用的基础。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种球孢白僵菌bbzy2308菌株及其应用，旨在克服现有球孢白僵菌未发现能在自然条件下感染致死粗狭肋鳃金龟 holotrichia scrobiculata brenske的不足，通过生物技术手段防治粘虫，避免或减少因不合理使用化学农药所带来的抗药性问题。
2、为了解决现有技术的问题，本专利技术提供了如下技术方案：本专利技术的一种球孢白僵菌bbzy230628菌株，球孢白僵菌bbzy230628菌株为球孢白僵菌，保藏名称为球孢白僵菌 beauveria bassiana；保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏单位地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号；保藏日期：2023年11月17日；保藏编号：cgmccno.40927。
3、进一步地，球孢白僵菌bbzy230628菌株的its 基因序列为seq id no.1所示的核苷酸序列。
4、进一步地，菌株在sday培养基上于25℃下培养至第10d时，菌落直径9.25~10.34mm，菌落正面白色，具绒毛，菌落中央呈略凸起，菌落背面颜色从边缘到中心由浅至深，从黄褐色到中心1/2处变为黑褐色；该菌菌丝光滑，菌丝具有分隔，菌丝直径2~3 μm；分生孢子梗直立呈葡萄穗状；生孢子呈椭圆形，表面光滑一端尖，一端钝圆，大小为4.65 μm×2.15μm。
5、本专利技术从罹病粗狭肋鳃金龟成虫上分离获得球孢白僵菌bbzy2308野生菌株，将野生菌株回接于粗狭肋鳃金龟成虫上复壮得到球孢白僵菌bbzy2308菌株，对该菌株采用按常规方法进行单孢分离、培养得到纯的、致病力强的球孢白僵菌。
6、在sday培养基上，球孢白僵菌bbzy230628菌株菌落生长初期呈不规则圆形，中央微隆起，初期多呈白色。产孢后，菌落表面呈浅灰色，后来变成淡黄色，背面无色或淡黄色至粉红色。分生孢子梗直立，生于营养菌丝顶端或其分枝上，分生孢子近球形或卵圆形，无色透明，大小为（2.0～5.8）μｍ×(1.9～6.0）μｍ。
7、本专利技术球孢白僵菌bbzy230628菌株制备的球孢白僵菌bbzy230628菌剂。
8、进一步地，其活性成分为如下（a）（b）（c）中的至少一种：
9、（a）球孢白僵菌bbzy230628菌株的分生孢子悬浮液；
10、（b）所得球孢白僵菌bbzy230628菌株培养物的发酵液初提物；
11、（c）所得球孢白僵菌bbzy230628菌株细胞的超声裂解上清。
12、本专利技术的球孢白僵菌bbzy230628菌剂的制备方法，包括如下步骤：
13、（1）从采集到的罹病粗狭肋鳃金龟 holotrichia scrobiculata brenske体上分离获得球孢白僵菌bbzy230628，在sday培养基上培养，将分生孢子转接到新配制的sday培养基上进行纯化；
14、（2）然后进行单孢分离获得纯化的球孢白僵菌bbzy230628；
15、（3）取球孢白僵菌bbzy230628分生孢子，放入含0.05%吐温-80的无菌水中，配制成浓度为1.0×108个孢子/ml的球孢白僵菌bbzy230628孢子悬浮液，制得球孢白僵菌bbzy230628菌剂。
16、（4）取配制的球孢白僵菌bbzy230628菌剂，对粗狭肋鳃金龟进行喷雾接种，每头幼虫喷施2-3ml菌剂。
17、本专利技术的球孢白僵菌bbzy230628菌株或球孢白僵菌bbzy230628菌剂在制备粗狭肋鳃金龟 holotrichia scrobiculata brenske防治制剂中的应用。
18、有益效果：本专利技术提供的球孢白僵菌bbzy230628是一种能用于防治农作物重大害虫粗狭肋鳃金龟 holotrichia scrobiculata brenske的生防真菌，具有对粗狭肋鳃金龟成虫致病性强、对环境安全、不易使害虫产生抗药性的特点，可以用于生物防治粗狭肋鳃金龟。
19、与现有技术相比，本专利技术具有如下优点：（1）本本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种球孢白僵菌Bbzy230628菌株，其特征在于：所述球孢白僵菌Bbzy230628菌株为球孢白僵菌，保藏名称为球孢白僵菌Beauveria bassiana；保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏单位地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号；保藏日期：2023年11月17日；保藏编号：CGMCC No.40927。
2.根据权利要求1所述的球孢白僵菌Bbzy230628菌株，其特征在于：所述球孢白僵菌Bbzy230628菌株的ITS 基因序列为SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。
3.根据权利要求1所述的球孢白僵菌Bbzy230628菌株，其特征在于：所述菌株在SDAY培养基上于25℃下培养至第10d时，菌落直径9.25 ~10.34 mm，菌落正面白色，具绒毛，菌落中央呈略凸起，菌落背面颜色从边缘到中心由浅至深，从黄褐色到中心1/2处变为黑褐色；该菌菌丝光滑，菌丝具有分隔，菌丝直径2~3 μm；分生孢子梗直立呈葡萄穗状；生孢子呈椭圆形，表面光滑一端尖，一端钝圆，大小为4.65 μm×2.15μm。
4.权利要求1所述的
5.根据权利要求4所述的球孢白僵菌Bbzy230628菌剂，其活性成分为如下（a）（b）（c）中的至少一种：
6.权利要求4所述的球孢白僵菌Bbzy230628菌剂的制备方法，其特征在于包括如下步骤：
7.权利要求1所述的球孢白僵菌Bbzy230628菌株或权利要求4所述的球孢白僵菌Bbzy230628菌剂在制备粗狭肋鳃金龟Holotrichia scrobiculata Brenske防治制剂中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种球孢白僵菌bbzy230628菌株，其特征在于：所述球孢白僵菌bbzy230628菌株为球孢白僵菌，保藏名称为球孢白僵菌beauveria bassiana；保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏单位地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号；保藏日期：2023年11月17日；保藏编号：cgmcc no.40927。
2.根据权利要求1所述的球孢白僵菌bbzy230628菌株，其特征在于：所述球孢白僵菌bbzy230628菌株的its 基因序列为seq id no.1所示的核苷酸序列。
3.根据权利要求1所述的球孢白僵菌bbzy230628菌株，其特征在于：所述菌株在sday培养基上于25℃下培养至第10d时，菌落直径9.25 ~10.34 mm，菌落正面白色，具绒毛，菌落中央呈略凸起，菌落背面颜色从边缘到...
【专利技术属性】
技术研发人员：张立敏，陈杰，陈斌，曹易蓉，孙淦琳，蔡浩升，金思彤，
申请(专利权)人：云南农业大学，
类型：发明
国别省市：
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