一种细胞培养用温敏微载体及其制备方法以及培养细胞的方法技术

本发明专利技术提供了一种细胞培养用温敏微载体及其制备方法以及培养细胞的方法。本发明专利技术提供的制备方法，先对玻璃微球进行表面羟基活化，再利用氨基硅烷偶联剂进行氨基化改性，然后与式(1)所示丙炔醇改性的谷氨酸‑N‑羧基内酸酐进行反应，最后与式(2)所示巯基改性的聚(N‑异丙基丙烯酰胺)进行巯基‑烯烃点击反应，得到细胞培养用温敏微载体。本发明专利技术制得的细胞培养用温敏微载体，以聚谷氨酸作为表面聚合物的骨架，接枝式(2)所示巯基改性的聚(N‑异丙基丙烯酰胺)，所得温敏微载体表面接枝化合物分布均匀，生物相容性好，利于细胞的快速贴附和扩增；且其具有温敏性，通过控制温度能够实现室温温和脱落细胞，有利于大规模无损伤获取细胞。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生化工程领域，特别涉及一种细胞培养用温敏微载体及其制备方法以及培养细胞的方法。

技术介绍

1、微载体是指粒径为100～300μm，用于细胞黏附生长的基质。制备微载体的材料来源主要包括两大类合成高分子材料和天然聚合物及其衍生物。与二维细胞培养相比，微载体具有更高的比表面积，易用于大规模的细胞生产，获取多种生物制品，如疫苗、抗体、重组蛋白等。

2、传统的细胞收获方法，如酶水解和机械刮削法，会对膜蛋白和细胞功能有害，导致细胞活力的降低(参见majd h,wipff pj,buscemi l,et al.a novel method of dynamicculture surface expansion improves mesenchymal stem cell proliferation andphenotype.stem cells,2009,27,200–209.)。为了获取更高质量的细胞，通常采用非酶和非机械方法从培养基中回收细胞。因此，温度响应性微载体的开发有望取代传统的收获方法。使用温敏方法收获细胞是基于细胞生长表面亲/疏水本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种细胞培养用温敏微载体，其特征在于，包括：玻璃微球和接枝在所述玻璃微球表面的聚丙炔基谷氨酸-g-聚(N-异丙基丙烯酰胺)；所述聚丙炔基谷氨酸-g-聚(N-异丙基丙烯酰胺)的结构如式(H)所示：

2.根据权利要求1所述的细胞培养用温敏微载体，其特征在于，所述玻璃微球的粒径为180～250μm。

3.根据权利要求1所述的细胞培养用温敏微载体，其特征在于，所述聚丙炔基谷氨酸-g-聚(N-异丙基丙烯酰胺)在所述细胞培养用温敏微载体中的质量分数为0.2％～1.1％。

4.一种权利要求1～3中任一项所述的细胞培养用温敏微载体的制备方法，其特征在于，包括以下步...

【技术特征摘要】

1.一种细胞培养用温敏微载体，其特征在于，包括：玻璃微球和接枝在所述玻璃微球表面的聚丙炔基谷氨酸-g-聚(n-异丙基丙烯酰胺)；所述聚丙炔基谷氨酸-g-聚(n-异丙基丙烯酰胺)的结构如式(h)所示：

2.根据权利要求1所述的细胞培养用温敏微载体，其特征在于，所述玻璃微球的粒径为180～250μm。

3.根据权利要求1所述的细胞培养用温敏微载体，其特征在于，所述聚丙炔基谷氨酸-g-聚(n-异丙基丙烯酰胺)在所述细胞培养用温敏微载体中的质量分数为0.2％～1.1％。

4.一种权利要求1～3中任一项所述的细胞培养用温敏微载体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤a)中，所述氨基硅烷偶联剂为3-氨基丙基三乙氧基硅烷。

6.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：田华雨，罗智敏，郝凯，
申请(专利权)人：嘉庚创新实验室，
类型：发明
国别省市：