【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物，更具体的说是涉及一种增强树突状细胞疫苗效能的佐剂及其应用。
技术介绍
1、肿瘤是全球最严重的公共医疗卫生问题之一，极大地危害着人类健康和生命。传统的肿瘤疗法如手术治疗、化学药物治疗和放射疗法都是直接针对肿瘤本身，在发挥有限疗效的同时均具有不同程度的副作用。近年来兴起的免疫治疗旨在通过增强或诱导机体对肿瘤细胞的特异性免疫反应来治疗癌症，具有适应症广、疗效全面持久、安全性高等优点，有巨大的应用潜力。其中，树突状细胞(dendritic cell，dc)疗法是应用最为广泛的一种免疫细胞疗法，这主要得益于dc作为功能最强大的抗原提呈细胞能高效诱导效应性t细胞持续稳定地靶向性清除癌细胞并预防癌症复发。并有诸多研究表明，放疗、检查点抑制剂、过继性t细胞治疗、溶瘤病毒等癌症治疗在缺乏dc的情况下是无效的。因而，dc疫苗的单独使用或与免疫检查点抑制剂联合使用有望成为癌症免疫治疗的新突破。目前，由于获得体内来源dc的技术以及数量限制，dc疫苗都是通过体外培养诱导分化而来。因而，在dc疫苗的制备过程中，如何提高dc的免疫原性并增强其诱导效应性t细胞的能力一直是本领域技术人员研究的重点。
2、因此，提供一种增强树突状细胞疫苗效能的佐剂及其应用是本领域技术人员亟需解决的问题。
技术实现思路
1、有鉴于此，本专利技术提供了一种增强树突状细胞疫苗效能的佐剂及其应用。
2、氨氧乙酸半盐酸盐(aminooxyacetic acid hemihydrochloride，a
3、为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
4、一种增强树突状细胞疫苗效能的佐剂，所述佐剂为氨氧乙酸半盐酸盐。
5、进一步，氨氧乙酸半盐酸盐在制备提高树突状细胞免疫原性并增强树突状细胞疫苗免疫治疗效果制剂中的应用。
6、进一步，氨氧乙酸半盐酸盐作为免疫佐剂在制备树突状细胞疫苗中的应用。
7、进一步，在树突状细胞疫苗的制备过程中用氨氧乙酸半盐酸盐处理树突状细胞，具体步骤如下：
8、1)取单个骨髓细胞，重悬于含细胞因子gm-csf和il-4的树突状细胞培养基中，置于37℃含5％二氧化碳的细胞培养箱中培养7天，期间根据细胞的生长情况更换含细胞因子的新鲜树突状细胞培养基；7天后得到免疫原性很弱的未成熟树突状细胞；
9、2)用新鲜的树突状细胞培养基重悬步骤1)获得的未成熟树突状细胞，在lps诱导树突状细胞成熟前提前1小时加入佐剂氨氧乙酸半盐酸盐，氨氧乙酸半盐酸盐处理1小时后再加入lps继续刺激5小时，获得免疫原性强的成熟树突状细胞。
10、进一步，所述gm-csf和il-4的终浓度分别为10ng/ml和5ng/ml；所述氨氧乙酸半盐酸盐的终浓度为0.1～0.8mm；所述lps的终浓度为100ng/ml。
11、进一步，所述树突状细胞培养基为含胎牛血清、双抗青霉素-链霉素以及谷氨酰胺的rpmi 1640培养基；所述胎牛血清浓度为体积比10％；所述双抗中青霉素和链霉素的终浓度分别为100u/ml和100g/ml；所述谷氨酰胺的终浓度为2mm。
12、进一步，氨氧乙酸半盐酸盐在制备增强树突状细胞促炎因子编码基因il6、il12p40、il12p35、il23p19、tnfa表达制剂中的应用。
13、进一步，氨氧乙酸半盐酸盐在制备增强树突状细胞中cd80和cd86表达量制剂中的应用。
14、进一步，氨氧乙酸半盐酸盐在制备增强树突状细胞介导cd4+t细胞和cd8+t细胞向ifnγ分泌型效应性t细胞分化制剂中的应用。
15、进一步，氨氧乙酸半盐酸盐在制备增强树突状细胞疫苗抗肿瘤制剂中的应用。
16、经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本专利技术公开提供了一种增强树突状细胞疫苗效能的佐剂及其应用，dc作为功能最强大的抗原提呈细胞，摄取加工抗原提呈给t细胞后，主要通过上调共刺激分子以及细胞因子的表达促进t细胞的增殖和分化。aoaa是一种小分子化合物，化学式为c2h5no3·1/2hcl，分子量为109.3g/mol，易溶于水。实验证实，aoaa能显著增强dc的免疫原性，上调dc中促炎因子il-6、il-12、il-23、tnfα的表达以及共刺激分子cd80、cd86的表达，促进dc介导cd4+t细胞和cd8+t细胞向ifnγ分泌型效应性t细胞分化的能力。并且，aoaa可以在制备dc疫苗中使用，增强dc疫苗的抗肿瘤效应。本专利技术提供了一种将小分子化合物aoaa作为免疫佐剂促进dc疫苗效能的方法，为肿瘤防治提供新思路。
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1.一种增强树突状细胞疫苗效能的佐剂，其特征在于，所述佐剂为氨氧乙酸半盐酸盐。
2.氨氧乙酸半盐酸盐在制备提高树突状细胞免疫原性并增强树突状细胞疫苗免疫治疗效果制剂中的应用。
3.氨氧乙酸半盐酸盐作为免疫佐剂在制备树突状细胞疫苗中的应用。
4.根据权利要求3所述的氨氧乙酸半盐酸盐作为免疫佐剂在制备树突状细胞疫苗中的应用，其特征在于，在树突状细胞疫苗的制备过程中用氨氧乙酸半盐酸盐处理树突状细胞，具体步骤如下：
5.根据权利要求4所述的氨氧乙酸半盐酸盐作为免疫佐剂在制备树突状细胞疫苗中的应用，其特征在于，所述GM-CSF和IL-4的终浓度分别为10ng/ml和5ng/ml；所述氨氧乙酸半盐酸盐的终浓度为0.1～0.8mM；所述LPS的终浓度为100ng/ml。
6.根据权利要求4所述的氨氧乙酸半盐酸盐作为免疫佐剂在制备树突状细胞疫苗中的应用，其特征在于，所述树突状细胞培养基为含胎牛血清、双抗青霉素-链霉素以及谷氨酰胺的RPMI 1640培养基；所述胎牛血清浓度为体积比10％；所述双抗中青霉素和链霉素的终浓度分别为100U/m
7.氨氧乙酸半盐酸盐在制备增强树突状细胞促炎因子编码基因Il6、Il12p40、Il12p35、Il23p19、Tnfa表达制剂中的应用。
8.氨氧乙酸半盐酸盐在制备增强树突状细胞中CD80和CD86表达量制剂中的应用。
9.氨氧乙酸半盐酸盐在制备增强树突状细胞介导CD4+T细胞和CD8+T细胞向IFNγ分泌型效应性T细胞分化制剂中的应用。
10.氨氧乙酸半盐酸盐在制备增强树突状细胞疫苗抗肿瘤制剂中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种增强树突状细胞疫苗效能的佐剂，其特征在于，所述佐剂为氨氧乙酸半盐酸盐。
2.氨氧乙酸半盐酸盐在制备提高树突状细胞免疫原性并增强树突状细胞疫苗免疫治疗效果制剂中的应用。
3.氨氧乙酸半盐酸盐作为免疫佐剂在制备树突状细胞疫苗中的应用。
4.根据权利要求3所述的氨氧乙酸半盐酸盐作为免疫佐剂在制备树突状细胞疫苗中的应用，其特征在于，在树突状细胞疫苗的制备过程中用氨氧乙酸半盐酸盐处理树突状细胞，具体步骤如下：
5.根据权利要求4所述的氨氧乙酸半盐酸盐作为免疫佐剂在制备树突状细胞疫苗中的应用，其特征在于，所述gm-csf和il-4的终浓度分别为10ng/ml和5ng/ml；所述氨氧乙酸半盐酸盐的终浓度为0.1～0.8mm；所述lps的终浓度为100ng/ml。
6.根据权利要求4所述的氨...
【专利技术属性】
技术研发人员：黄功华，郑婷婷，张露文，尚佳文，
申请(专利权)人：广东医科大学，
类型：发明
国别省市：
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