【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于功能基因，具体涉及一种影响植物对黑斑病抗性的转录因子ppcbp60b及其编码基因和应用。
技术介绍
1、
2、植物不能主动躲避不良环境的胁迫，因此植物进化出了一系列体内反应机制以应对各种不良环境的胁迫。植物有一套基因调控网络，在受到外界胁迫信号时，可以迅速诱导体内胁迫相关基因的表达，从而应对各种胁迫环境。转录因子是这一调控网络中至关重要的一环，它能相应各种外界信号，继而激活或者抑制下游基因的表达，从而调节植物对抗各种环境变化。
3、黑斑病是一类由黑斑菌侵染植物果实、叶片、花穗、枝干引致受侵染组织局部坏死的一类病害。其危害范围较广，对果树、蔬菜等农作物以及林木和花卉等由具有侵染致病性。黑斑菌的分生孢子可通过雨水、风、昆虫等传播，一年可频繁多次，并且黑斑菌可以在植物的叶片生长期、花期和果实期等不同生长阶段进行侵染，直接影响植物的生长和产量。因此，黑斑病的防治是农业种植中较为关注的问题。遗憾的是目前还未有关于如何调节转录因子表达来实现黑斑病的防治。
技术实现思路
1、针对
技术介绍
提出的技术问题，本专利技术的目的在于提供一种转录因子ppcbp60b及编码该转录因子ppcbp60b的转录因子基因ppcbp60b和应用。研究表明，过表达所述的转录因子基因ppcbp60b使植物对黑斑病提高抗性，而敲除或沉默该基因后，使植物对黑斑病具有敏感性。
2、本专利技术的目的可以通过以下技术方案实现：
3、第一方面，本专利技术请求保护一种转录因子
4、第二方面，本专利技术请求保护编码所述转录因子ppcbp60b的转录因子基因ppcbp60b，该转录因子基因ppcbp60b的核苷酸序列如seq id no:2所示。
5、第三方面，本专利技术请求保护用于扩增所述转录因子基因ppcbp60b的的引物，该引物包括核苷酸序列如seq in no:3所示的正向引物和核苷酸序列如seq in no:4所示的反向引物。
6、第四方面，本专利技术请求保护一种生物材料，该生物材料为含有所述转录因子基因ppcbp60b的生物材料，或用于干扰、抑制、沉默或敲除所述转录因子基因ppcbp60b的生物材料，所述生物材料为表达盒、质粒载体、病毒载体、工程菌或转基因细胞系。
7、进一步，所述的含有转录因子基因ppcbp60b的生物材料为(1)～(7)中的至少一种：
8、(1)含有所述转录因子基因ppcbp60b的表达盒；
9、(2)含有所述转录因子基因ppcbp60b的重组表达载体；
10、(3)含有(1)所述表达盒的重组表达载体；
11、(4)含有所述转录因子基因ppcbp60b的重组菌；
12、(5)含有(1)所述表达盒的重组菌；
13、(6)含有(2)所述重组表达载体的重组菌；
14、(7)含有(3)所述重组表达载体的重组菌。
15、进一步，所述的用于干扰、抑制、沉默或敲除转录因子基因ppcbp60b的生物材料为病毒沉默载体或包含该病毒沉默载体的重组菌。
16、第五方面，本专利技术请求保护上述转录因子ppcbp60b、上述的转录因子基因ppcbp60b、或上述的生物材料在(ⅰ)～(ⅳ)中的应用：
17、(ⅰ)提高植物黑斑病抗性；
18、(ⅱ)下调植物黑斑病抗性；
19、(ⅲ)培育抗黑斑病的植物新品种；
20、(ⅳ)培育对黑斑病敏感的植物新品种。
21、进一步，在目标植物中过表达或超表达权利要求2所述的转录因子基因ppcbp60b以提高植物黑斑病抗性或培育抗黑斑病的植物新品种；或者在目标植物中沉默或敲除权利要求2所述的转录因子基因ppcbp60b以下调植物黑斑病抗性或培育黑斑病敏感的植物新品种。
22、第六方面，本专利技术请求保护检测所述转录因子基因ppcbp60b表达水平的试剂在评估植物对黑斑病及其致病菌抗性中的应用。
23、第七方面，本专利技术请求保护一种提高植物黑斑病抗性或培育抗黑斑病的植物新品种的方法，在目标植物中过表达或超表达所述的转录因子基因ppcbp60b以提高植物黑斑病抗性或培育抗黑斑病的植物新品种。
24、本专利技术所述的植物为双子叶植物，优选为蔷薇科植物，更进一步优选为梨，但不限于此。
25、本专利技术的有益效果：
26、本专利技术筛选了一种对黑斑病表现抗性的转录因子ppcbp60b，并提供了编码该转录因子ppcbp60b的转录因子基因ppcbp60b。研究过程中，本专利技术将所述转录因子基因ppcbp60b转入到梨愈伤组织中，所得的超表达转基因植物就表现出黑斑菌抵抗性状，基因ppcbp60b可作为黑斑菌抗性的标志物，预警植物的真菌感染。本专利技术敲除掉基因ppcbp60b或沉默基因ppcbp60b使其表达量降低，使植物表现出抗黑斑病感染性状。试验结果表明：基因ppcbp60b的转录水平在植物受到黑斑病菌处理后逐渐升高，表明转录因子基因ppcbp60b在植物抗黑斑病能力中起到重要作用。本专利技术将转录因子基因ppcbp60b转入到梨愈伤组织中，得到的转基因植物中转录因子基因ppcbp60b过量表达，所得的转基因愈伤组织与野生愈伤组织相比能够有效提高转基因植株的抗黑斑病能力，细胞损伤更小；同时将其进行基因沉默，所得的转基因植物与野生株相比能够降低转基因植株的抗黑斑病能力，病斑直径更大。可见，本专利技术提供的转录因子ppcbp60b及转录因子基因ppcbp60b对培育耐黑斑病新品种，以及植物对黑斑菌耐受性的研究具有重要意义。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种转录因子PpCBP60B，其特征在于，该转录因子PpCBP60B的氨基酸序列如SEQ IDNO:1所示。
2.编码权利要求1所述转录因子PpCBP60B的转录因子基因PpCBP60B，其特征在于，该转录因子基因PpCBP60B的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。
3.用于扩增权利要求2所述转录因子基因PpCBP60B的引物，其特征在于，该引物包括核苷酸序列如SEQ IN NO:3所示的正向引物和核苷酸序列如SEQ IN NO:4所示的反向引物。
4.一种生物材料，其特征在于，该生物材料为含有权利要求2所述转录因子基因PpCBP60B的生物材料，或用于干扰、抑制、沉默或敲除权利要求2所述转录因子基因PpCBP60B的生物材料，所述生物材料为表达盒、质粒载体、病毒载体、工程菌或转基因细胞系。
5.根据权利要求4所述的生物材料，其特征在于，所述的含有转录因子基因PpCBP60B的生物材料为(1)～(7)中的至少一种：
6.根据权利要求4所述的生物材料，其特征在于，所述的用于干扰、抑制、沉默或敲除转录因子基因PpC
7.权利要求1中所述转录因子PpCBP60B、权利要求2中所述的转录因子基因PpCBP60B、或权利要求4～6中任一所述的生物材料在(Ⅰ)～(Ⅳ)中的应用：
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，在目标植物中过表达或超表达权利要求2所述的转录因子基因PpCBP60B以提高植物黑斑病抗性或培育抗黑斑病的植物新品种；或者在目标植物中沉默或敲除权利要求2所述的转录因子基因PpCBP60B以下调植物黑斑病抗性或培育黑斑病敏感的植物新品种。
9.检测权利要求2所述转录因子基因PpCBP60B表达水平的试剂在评估植物对黑斑病及其致病菌抗性中的应用。
10.一种提高植物黑斑病抗性或培育抗黑斑病的植物新品种的方法，其特征在于，在目标植物中过表达或超表达权利要求2所述的转录因子基因PpCBP60B以提高植物黑斑病抗性或培育抗黑斑病的植物新品种。
...【技术特征摘要】
1.一种转录因子ppcbp60b，其特征在于，该转录因子ppcbp60b的氨基酸序列如seq idno:1所示。
2.编码权利要求1所述转录因子ppcbp60b的转录因子基因ppcbp60b，其特征在于，该转录因子基因ppcbp60b的核苷酸序列如seq id no:2所示。
3.用于扩增权利要求2所述转录因子基因ppcbp60b的引物，其特征在于，该引物包括核苷酸序列如seq in no:3所示的正向引物和核苷酸序列如seq in no:4所示的反向引物。
4.一种生物材料，其特征在于，该生物材料为含有权利要求2所述转录因子基因ppcbp60b的生物材料，或用于干扰、抑制、沉默或敲除权利要求2所述转录因子基因ppcbp60b的生物材料，所述生物材料为表达盒、质粒载体、病毒载体、工程菌或转基因细胞系。
5.根据权利要求4所述的生物材料，其特征在于，所述的含有转录因子基因ppcbp60b的生物材料为(1)～(7)中的至少一种：
6.根据权利要求4所述的生...
【专利技术属性】
技术研发人员：张绍铃，黄小三，林立锟，邢才华，谢智华，齐开杰，董慧珍，乔清海，王浩，
申请(专利权)人：南京农业大学，
类型：发明
国别省市：
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