【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及荧光检测，具体涉及一种eu3+络合物在荧光检测羟基吲哚乙酸的应用。
技术介绍
1、人体中的神经递质及其代谢物参与许多生物和生理过程，通常与多种疾病有关，如类癌肿瘤、阿尔茨海默症、帕金森氏症和精神分裂症。类癌肿瘤是一种罕见的、生长缓慢的神经内分泌肿瘤，起源于肠嗜铬细胞，可参与任何器官。在过去的几十年里，类癌肿瘤的发病率有所增加，大约10-50％的类癌肿瘤患者可发展为类癌综合症，并伴有潮红和腹泻的特征。手术是一种治疗方法，但复发是常见的。因此开发一种类癌肿瘤的早期诊断是非常重要的。
2、血清素(5-ht)是一种中枢神经系统的神经递质，在多种生物学功能中起着关键作用，是检测类癌肿瘤的最具鉴别性的生物标志物。其代谢产物为羟基吲哚乙酸(hiaa)，随尿液排出。因此，可以通过检测尿液中hiaa的含量，早期诊断和监测类癌综合症患者。在过去的几年中，已经发现了检测hiaa的分析技术，如液相色谱质谱、液相色谱发光光谱和电化学分析。然而，这些方法通常需要昂贵的仪器和复杂的预处理过程、有毒的试剂和较长的分析时间。选择荧光检测法能够提高检测速度、简化仪器。
3、由于镧系离子具有独特的光谱性质如荧光寿命长、大斯托克斯位移和来源于f-f禁带跃迁的尖发射带，基于镧系离子的检测平台已经被广泛应用于生物检测。目前有研究表明通过“天线效应”即作为天线分子的发色团与镧系金属离子配位时，发色团能够将吸收的能量转移到镧系金属离子上，使镧系金属离子的特征荧光发生敏化，一旦破坏发色团的“天线效应”，镧系金属离子被敏化的荧光将发生猝灭，这
技术实现思路
1、为了克服上述现有技术存在的问题，本专利技术的目的之一在于提供一种eu3+络合物在荧光检测羟基吲哚乙酸的应用。本专利技术的目的之二在于提供一种羟基吲哚乙酸的荧光检测方法。该方法是利用被dpa敏化的eu3+对羟基吲哚乙酸进行荧光强度检测，具有检测速度快、特异性好、成本低的特点，为血清素代谢物hiaa的精准有效检测提供新的思路。
2、为了实现上述目的，本专利技术所采取的技术方案是：
3、本专利技术第一方面提供了一种eu3+络合物在荧光检测羟基吲哚乙酸的应用，所述eu3+络合物为eu3+-dpa复合探针，其中dpa为吡啶二羧酸。
4、优选地，所述eu3+-dpa复合探针是由如下步骤的制备方法制得：将eu3+溶液与dpa溶液混合，制得复合探针。
5、本专利技术第二方面提供了一种羟基吲哚乙酸的荧光检测方法，包括如下步骤：
6、s1、将eu3+溶液与dpa溶液混合，制得含有复合探针的反应溶液；
7、s2、将含羟基吲哚乙酸的待测样品加入到反应溶液中并混合均匀；
8、s3、在荧光激发下测试eu3+的荧光强度，根据测得的荧光强度和对应的工作曲线，得到待测样品中羟基吲哚乙酸的浓度。
9、优选地，步骤s1中，所述eu3+溶液的浓度为1-5mmol/l。
10、优选地，步骤s1中，所述eu3+溶液由可溶性铕盐及其水合物配制得。
11、更优选地，步骤s1中，所述eu3+溶液由eu(no3)3·6h2o配制得。
12、优选地，步骤s1中，所述dpa溶液的浓度为50-500μmol/l。
13、优选地，步骤s1中，所述反应溶液的组分还包括edta和pbs缓冲溶液。
14、更优选地，步骤s1中，将edta溶液、eu3+溶液、pbs缓冲溶液和dpa溶液混合为反应体系溶液。进一步优选地，所述edta溶液的浓度为1-5mmol/l。
15、优选地，步骤s1中，所述eu3+与dpa的用量摩尔比为100:(5-30)。
16、更优选地，所述eu3+与dpa的摩尔比为100:(5-20)。
17、优选地，步骤s1中，所述eu3+溶液的溶剂为水。
18、优选地，步骤s1中，所述dpa溶液的溶剂为水。
19、优选地，步骤s2中，所述含羟基吲哚乙酸的待测样品中羟基吲哚乙酸的浓度为0.001-200μmol/l。
20、优选地，步骤s2中，将含羟基吲哚乙酸的待测样品加入到反应溶液中，混合溶液稀释至0.5-5ml，随后混合均匀。
21、优选地，步骤s3中，以265nm为激发波长，获得扫描范围为550～650nm的荧光发射光谱。更优选地，在265m的紫外光激发下，产生位于593nm和616nm的发射峰。
22、优选地，步骤s3中，所述工作曲线是荧光强度比值与羟基吲哚乙酸浓度的标准曲线。
23、优选地，步骤s3中，所述eu3+-dpa复合探针在检测羟基吲哚乙酸时，eu3+的红色荧光逐渐减弱。
24、优选地，步骤s3中，所述测试在溶液ph为7-8的条件下进行反应。
25、本专利技术的有益效果是：
26、本专利技术提供了eu3+络合物在荧光检测羟基吲哚乙酸的应用，利用荧光探针eu3+-dpa与hiaa之间的内滤效应(ife)，hiaa在遇到dpa和eu3+的络合物时能够淬灭eu3+的特征荧光。本专利技术以具有红色荧光、良好水溶性、分散性和特异性的eu3+-dpa复合探针为检测平台，其中dpa作为配体与eu3+发生配位反应使eu3+产生强烈的红色荧光，成功通过“天线效应”有效敏化eu3+，实现对hiaa的特异性荧光淬灭检测，并且对hiaa的检出限低至0.28nm。
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1.一种Eu3+络合物在荧光检测羟基吲哚乙酸的应用，其特征在于，所述Eu3+络合物为Eu3+-DPA复合探针，其中DPA为吡啶二羧酸。
2.根据权利要求1所述的Eu3+络合物在荧光检测羟基吲哚乙酸的应用，其特征在于，所述Eu3+-DPA复合探针是由如下步骤的制备方法制得：将Eu3+溶液与DPA溶液混合，制得复合探针。
3.一种羟基吲哚乙酸的荧光检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
4.根据权利要求3所述的羟基吲哚乙酸的荧光检测方法，其特征在于，步骤S1中，所述反应溶液的组分还包括EDTA和PBS缓冲溶液。
5.根据权利要求3所述的羟基吲哚乙酸的荧光检测方法，其特征在于，步骤S1中，所述Eu3+与DPA的用量摩尔比为100:(5-30)。
6.根据权利要求3所述的羟基吲哚乙酸的荧光检测方法，其特征在于，步骤S1中，所述Eu3+溶液的溶剂为水；
7.根据权利要求3所述的羟基吲哚乙酸的荧光检测方法，其特征在于，步骤S1中，所述Eu3+溶液由可溶性铕盐及其水合物配制得。
8.根据权利要求3所述的羟基吲哚乙
9.根据权利要求3所述的羟基吲哚乙酸的荧光检测方法，其特征在于，步骤S3中，以265nm为激发波长，获得扫描范围为550～650nm的荧光发射光谱。
10.根据权利要求3所述的羟基吲哚乙酸的荧光检测方法，其特征在于，步骤S3中，所述工作曲线是荧光强度比值与羟基吲哚乙酸浓度的标准曲线。
...【技术特征摘要】
1.一种eu3+络合物在荧光检测羟基吲哚乙酸的应用，其特征在于，所述eu3+络合物为eu3+-dpa复合探针，其中dpa为吡啶二羧酸。
2.根据权利要求1所述的eu3+络合物在荧光检测羟基吲哚乙酸的应用，其特征在于，所述eu3+-dpa复合探针是由如下步骤的制备方法制得：将eu3+溶液与dpa溶液混合，制得复合探针。
3.一种羟基吲哚乙酸的荧光检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
4.根据权利要求3所述的羟基吲哚乙酸的荧光检测方法，其特征在于，步骤s1中，所述反应溶液的组分还包括edta和pbs缓冲溶液。
5.根据权利要求3所述的羟基吲哚乙酸的荧光检测方法，其特征在于，步骤s1中，所述eu3+与dpa的用量摩尔比为100:(5-30)。
6.根据...
【专利技术属性】
技术研发人员：荣铭聪，林春晓，牛利，韩冬雪，黄薇，邱楚贝，王亚楠，
申请(专利权)人：广州大学，
类型：发明
国别省市：
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