β-半乳糖苷酶突变体及其应用制造技术

本发明专利技术公开了β‑半乳糖苷酶突变体及其应用，其活性在乳糖降解中提供降解及转糖苷的功能，为如下a)或b)的蛋白质：a)如SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列的第331位的组氨酸被取代为缬氨酸或异亮氨酸，或，如SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列的第469位的谷氨酸被取代为缬氨酸，或，如SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列的第517位的组氨酸被取代为异亮氨酸；b)在a)中的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有β‑半乳糖苷酶活性的由(a)衍生的蛋白质。本发明专利技术的突变体具有催化效率快、低聚半乳糖产率高的优良性质，有利于降低益生元的成本，具有较大的工业化生产和应用潜力以及经济价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物工程，具体涉及β-半乳糖苷酶突变体及其应用。

技术介绍

1、低聚半乳糖(galactooligosaccharides,gos)为乳糖的非还原端半乳糖上连接不同数量(2～8个)的半乳糖，是一种功能性低聚糖，常作为健康食品原料广泛应用于食品等行业，多年来备受关注。gos除具有益生活性外，还有预防蛀牙和调节脂质代谢等功效。gos的安全性已得到广泛认可，如美国已将其作为公认安全的食品原料，我国也批准其为营养增强剂和新食品原料。gos与人乳中的人乳寡糖在结构与功能上具有一定的相似性，可被人体内的肠道微生物特异性利用，目前已批准用于婴幼儿配方奶粉中。

2、目前工业上生产gos的主要方法是利用β-半乳糖苷酶催化乳糖或乳清以合成gos。这种方法反应条件温和，操作简单，效率高，被认为有效且适用于规模化生产。目前，工业化生产gos所用的β-半乳糖苷酶多数来源于乳酸克鲁维酵母(kluyveromyces lactis)、米曲霉(aspergillus oryzae)以及环状芽孢杆菌(bacillus circulans)等，但是大多数gos产率较本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.β-半乳糖苷酶突变体，其特征在于，所述β-半乳糖苷酶突变体的活性在乳糖降解中提供降解及转糖苷的功能，为如下a)或b)的蛋白质：

2.含有一种或几种如权利要求1所述的β-半乳糖苷酶突变体的组合物。

3.一种DNA分子，所述DNA分子编码如权利要求1或2所述的β-半乳糖苷酶突变体。

4.如权利要求3所述的DNA分子，所述DNA分子的碱基序列如SEQ ID NO：6所示。

5.一种重组载体，其含有权利要求3所述的DNA分子和与所述DNA分子可操作地连接的用于表达的调节序列。

6.酶突变体基因工程菌，所述宿主细胞含有权利要求3所述的...

【技术特征摘要】

1.β-半乳糖苷酶突变体，其特征在于，所述β-半乳糖苷酶突变体的活性在乳糖降解中提供降解及转糖苷的功能，为如下a)或b)的蛋白质：

2.含有一种或几种如权利要求1所述的β-半乳糖苷酶突变体的组合物。

3.一种dna分子，所述dna分子编码如权利要求1或2所述的β-半乳糖苷酶突变体。

4.如权利要求3所述的dna分子，所述dna分子的碱基序列如seq id no：6所示。

5.一种重组载体，其含有权利要求3所述的dna分子和与所述dna分子可操作地连接的用于表达的调节序列。

6.酶突变体基因工程菌，所述宿主细胞含有权利要求3所述的dna分子或权利要求5所述的重组载体。

7.一种低聚半乳糖的生产方法，其特征在于，包括如下步骤：以乳糖为底物，加入如权利要求1所述的β-半乳糖...

【专利技术属性】
技术研发人员：辛凤姣，王钰璐，于海燕，江正强，杨绍青，
申请(专利权)人：中国农业科学院农产品加工研究所，
类型：发明
国别省市：