【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于微生物，具体涉及一种利用烟草废次物水提液制备细菌纤维素的微生物共培养方法。
技术介绍
1、bc(bacterialcellulose，bc)主要是由革兰氏阴性菌通过静置培养在液体培养基表面形成的凝胶状薄膜，包括acetobacter(醋杆菌属)、komagataeibacter(驹形杆菌属)、enterobacter(肠杆菌属)、sarcina(八叠球菌属)等。与植物纤维素相比，bc具有纯度高，良好机械性能、热稳定性好、无毒、良好的生物相容性等特点，广泛应用于医药、造纸、食品包装等领域。
2、培养基(占总生产成本的30％)是限制bc大规模生产和商业化的关键因素之一。葡萄糖被认为是bc生产的最适碳源，这导致bc的生产成本较高。而低成本的富含碳源的废弃物逐渐用于bc的合成，例如藕粉加工过程中的废弃物、橄榄油厂废水、马铃薯皮、玉米秸秆等。烟草在生产过程中产生大量的烟草废料浸出液(tobacco waste extract，twe)，因为其较高的尼古丁含量(14.7g/l)，通常情况下选择倾倒在垃圾填埋场或焚烧，不仅危害了人体健康同时还会造成环境污染。事实上，twe中存在高含量的糖(总糖含量为125.5g/l)，包括葡萄糖、果糖以及其他多糖，使其成为bc合成的潜在培养基，而尼古丁的存在会对菌株产生毒害作用，bc产生菌株不能降解twe中的尼古丁。将尼古丁降解微生物与bc产生菌共培养为利用twe合成bc提供了一种新对策。
3、假单胞菌pseudomonas sp.jy-q/5△(jy-q/5△)在敲除葡
技术实现思路
1、针对上述问题，本专利技术的目的在于提供一种利用烟草废次物水提液制备细菌纤维素的微生物共培养方法。该方法通过利用a.pasteurianus mgc-n8819合成bc的能力，jy-q/5△降解尼古丁能力，构建两种微生物共培养体系实现共生，解决了twe作为bc合成培养基时尼古丁对菌株的毒害作用，提高bc的产量。
2、具体的技术方案如下：
3、一种利用烟草废次物水提液制备细菌纤维素的微生物共培养方法，包括如下步骤：
4、1)分别制备twe培养基、lb培养基、bsm培养基和hs培养基；
5、2)mgc-n8819与jy-q/5△分别进行种子液培养；
6、3)将mgc-n8819与jy-q/5△种子液混合接种至烟草废次物水提液中，培养，制备细菌纤维素。
7、进一步地，步骤2)中mgc-n8819的种子培养过程为：从-80℃的甘油管中取菌液1ml于装有hs培养基的三角瓶中，30℃，180r/min培养24h至od600为0.7-0.8，常温离心10min，弃上清，取下层菌液沉淀，加入无菌水重悬洗菌体3次。
8、进一步地，步骤2)中jy-q/5△的种子培养过程为：从-80℃的甘油管中取菌液50μl于装有lb培养基的三角瓶中，30℃，180r/min培养12h，常温下离心10min，弃上清，取下层菌液沉淀，加入无菌水重悬洗菌体3次，之后以1％的接种量接种至bsm培养基中，30℃，180r/min培养12h至od600为0.7-0.8，其中bsm培养基中含有2g/l的尼古丁，之后在相同的条件下再次离心并弃上清，取下层菌液沉淀，加入无菌水重悬洗菌体3次。
9、进一步地，步骤3)中的mgc-n8819与jy-q/5△的种子液的混合比例为1:1、1:2或2:1。
10、本专利技术的有益效果在于：
11、本专利技术通过将mgc-n8819与jy-q/5△在twe中静置共培养，降低了合成bc的成本，提高了bc的产量；同时，为twe的资源化利用提供了一种绿色、可持续的方法。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种利用烟草废次物水提液制备细菌纤维素的微生物共培养方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.如权利要求1所述的一种利用烟草废次物水提液制备细菌纤维素的微生物共培养方法，其特征在于，步骤2)中MGC-N8819的种子培养过程为：从-80℃的甘油管中取菌液1mL于装有HS培养基的三角瓶中，30℃，180r/min培养24h至OD600为0.7-0.8，常温离心10min，弃上清，取下层菌液沉淀，加入无菌水重悬洗菌体3次。
3.如权利要求1所述的一种利用烟草废次物水提液制备细菌纤维素的微生物共培养方法，其特征在于，步骤2)中JY-Q/5△的种子培养过程为：从-80℃的甘油管中取菌液50μL于装有LB培养基的三角瓶中，30℃，180r/min培养12h，常温下离心10min，弃上清，取下层菌液沉淀，加入无菌水重悬洗菌体3次，之后以1％的接种量接种至BSM培养基中，30℃，180r/min培养12h至OD600为0.7-0.8，其中BSM培养基中含有2g/L的尼古丁，之后在相同的条件下再次离心并弃上清，取下层菌液沉淀，加入无菌水重悬洗菌体3次。
4.如
...【技术特征摘要】
1.一种利用烟草废次物水提液制备细菌纤维素的微生物共培养方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.如权利要求1所述的一种利用烟草废次物水提液制备细菌纤维素的微生物共培养方法，其特征在于，步骤2)中mgc-n8819的种子培养过程为：从-80℃的甘油管中取菌液1ml于装有hs培养基的三角瓶中，30℃，180r/min培养24h至od600为0.7-0.8，常温离心10min，弃上清，取下层菌液沉淀，加入无菌水重悬洗菌体3次。
3.如权利要求1所述的一种利用烟草废次物水提液制备细菌纤维素的微生物共培养方法，其特征在于，步骤2)中jy-q/5△的种子培养过程为：从-...
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。