【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物，具体公开了一种诱导双靶点再平衡的方法和组合物。
技术介绍
1、nf-κb p65的过表达和cgas的沉默表达通常是促进肿瘤起始、耐药和逃避治疗的关键触发因素，抑制nf-κb p65过表达可抑制肿瘤细胞的增殖和侵袭；另一方面，cgas表达的再激活可以增强细胞免疫活性，促进肿瘤细胞的识别和清除，从而提高整体治疗效果。
2、然而，到目前为止，在肿瘤治疗中并没有同时激活沉默的cgas表达和抑制nf-κbp65过表达。本专利技术专利提出了同时恢复nf-κb p65和cgas异常的一种诱导双靶点再平衡的方法和组合物，这种新的诱导双靶再平衡方法可同时纠正cgas和nf-κb p65的缺陷。通过idtr方法，发现溶瘤腺病毒h101可以重新激活沉默的cgas，而gau1 aso可以抑制nf-κb p65的过度激活，以此组合物制备的药物对结直肠肿瘤有很好的预防、治疗作用。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种诱导双靶点再平衡的方法和组合物，以解决上述
技术介绍
中提出的问题。
2、为了解决上述技术问题，本专利技术提供如下技术方案：一种诱导双靶点再平衡的组合物，其特征在于：组合物包括溶瘤腺病毒h101、gau1 aso，通过溶瘤腺病毒h101激活沉默的cgas表达，同时通过gau1 aso抑制nf-κb p65的过表达。
3、优选地，gau1 aso的基因序列如下：gau1 aso1：gagttagaaagagacagaac；gau1aso2
4、优选地，本专利中gau1 aso的设计原理：gau1 aso可与gau1以碱基互补配对的形式结合，gau1-aso基于全长为1249bp的gau1进行设计，与gau1形成碱基互补配对，三条aso长度均为20nt；gau1-aso是一种rnase h依赖型aso药物，遵循gapmer模式，aso中dna序列和靶序列结合后可招募rnase h介导gau1 lncrna降解；
5、合成步骤如下：脱保护：使用干燥有机溶剂与二氯乙酸除去核苷酸上的5”-dmt保护基团，暴露5”-oh，以供下一步偶联；
6、偶联：单体经过活化后被泵入合成柱，脱保护的5”-oh会与亚磷酰胺四唑活性中间体，形成新的磷氧键，在这一步核苷酸链得到延伸；
7、氧化：偶联反应生成的亚磷酯键，易被酸、碱水解，因此需要进行氧化或硫化操作，形成磷酸二酯(或硫代膦酸二酯)键；
8、加帽：为了防止这些5”的活跃基团与下一个循环加入的活化亚磷酰胺单体发生偶联反应，进而产生n-1杂质，需要对未参与偶联的5”-oh羟基加帽；
9、氨解：在合成循环后，需要对中间产品使用氨水进行氨解反应，将寡核苷酸从固相载体上切割下来并进行基团的脱保护处理；
10、纯化和超滤：可选择离子层析或疏水/反相层析，在层析过程后，需要对产品进行脱盐操作。
11、一种诱导双靶点再平衡的方法：通过溶瘤腺病毒h101激活沉默的cgas表达，同时通过gau1 aso抑制nf-κb p65的过表达。
12、一种复配药物：包括权利要求1～2所述的组合物、生理盐水。
13、优选地，复配药物通过肿瘤内注射给药，溶瘤腺病毒h101单次注射剂量为1×108pfu，gau1 aso的单次注射剂量为20μg。
14、优选地，所述溶瘤腺病毒h101是利用基因工程技术敲除了野生型人5型腺病毒e1b-55kd基因片段和e3区域部分基因片段获得的一款溶瘤腺病毒；厂家：上海三维生物技术有限公司；规格：5.0*1011vp/0.5ml/支；批准文号：国药准字s20060027。
15、优选地，组合物、复配药物用于预防或治疗肿瘤或/和癌症。
16、优选地，所述肿瘤或/和癌症为结直肠癌。
17、与现有技术相比，本专利技术所达到的有益效果是：提出一种同时抑制nf-κb p65过表达和激活cgas的方法，这种新的诱导双靶再平衡(idtr)方法可同时纠正cgas和nf-κbp65的缺陷，通过idtr方法，发现溶瘤腺病毒h101可以重新激活沉默的cgas，而gau1aso可以抑制nf-κb p65的过表达；制备一种包括溶瘤腺病毒h101、gau1 aso的组合物，用于制备治疗肿瘤的药物，有很好的抗结直肠肿瘤效果。
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1.一种诱导双靶点再平衡的组合物，其特征在于：组合物包括溶瘤腺病毒H101、GAU1ASO，通过溶瘤腺病毒H101激活沉默的cGAS表达，同时通过GAU1 ASO抑制NF-κB p65的过表达。
2.根据权利要求1所述的一种诱导双靶点再平衡的组合物，其特征在于：GAU1 ASO的基因序列如下：
3.一种诱导双靶点再平衡的方法，其特征在于：通过溶瘤腺病毒H101激活沉默的cGAS表达，同时通过GAU1 ASO抑制NF-κB p65的过表达。
4.一种复配药物，其特征在于：包括权利要求1或2所述的组合物、生理盐水。
5.根据权利要求4所述的一种复配药物，其特征在于：通过肿瘤内注射给药，溶瘤腺病毒H101单次注射剂量为1×108PFU，GAU1 ASO的单次注射剂量为20μg。
6.根据权利要求1或2所述的组合物在制备用于预防或治疗肿瘤或/和癌症的药物中的用途。
7.根据权利要求4或5所述的复配药物在制备用于预防或治疗肿瘤或/和癌症的药物中的用途。
8.根据权利要求7所述的应用，所述肿瘤或/和癌症为结直
...【技术特征摘要】
1.一种诱导双靶点再平衡的组合物，其特征在于：组合物包括溶瘤腺病毒h101、gau1aso，通过溶瘤腺病毒h101激活沉默的cgas表达，同时通过gau1 aso抑制nf-κb p65的过表达。
2.根据权利要求1所述的一种诱导双靶点再平衡的组合物，其特征在于：gau1 aso的基因序列如下：
3.一种诱导双靶点再平衡的方法，其特征在于：通过溶瘤腺病毒h101激活沉默的cgas表达，同时通过gau1 aso抑制nf-κb p65的过表达。
4.一种复配药物，其...
【专利技术属性】
技术研发人员：张赫，张晓宇，
申请(专利权)人：上海市东方医院同济大学附属东方医院，
类型：发明
国别省市：
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