【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本公开内容涉及用于生产高浓度l-谷氨酸的菌株以及使用其生产l-谷氨酸的方法。
技术介绍
1、l-谷氨酸(l-glutamic acid)是通过发酵而产生的代表性氨基酸，是重要的氨基酸之一，因为其独特的味道，不仅广泛应用于食品领域，还应用于医药领域、其他动物饲料领域等。使用微生物例如棒状杆菌属(corynebacterium)、大肠杆菌(escherichia coli)、芽孢杆菌属(bacillus)、链霉菌属(streptomyces)、青霉菌属(penicillum)、克雷伯菌属(klebsiella)、欧文氏杆菌属(erwinia)和泛菌属(pantoea)生产l-谷氨酸的方法是已知的(美国专利技术专利第3,220,929号和美国专利技术专利第6,682,912号)。
2、目前，正在进行各种研究以开发高效生产l-谷氨酸的微生物和发酵处理技术。例如，靶标物质特异性方法(例如在微生物中将编码涉及氨基酸生物合成的酶的基因的表达提高或将氨基酸生物合成所不需要的基因去除)主要用于改善l-谷氨酸的生产率。
技术实现思路
1、解决方案
2、本申请的一个目的在于提供一种微生物，其中蛋白质的活性与该微生物的固有活性相比减弱，该蛋白质包含与seq id no：1的氨基酸序列具有至少85％序列同一性的序列。本申请的另一目的在于提供一种表达重组蛋白的微生物，该重组蛋白包含与seq id no：1的氨基酸序列具有至少85％序列同一性的氨基酸序列。
3、本公开内容的另
4、本公开内容的又一目的在于提供一种用于生产l-谷氨酸的组合物，其包含本公开内容的微生物；已将该微生物培养于其中的培养基；或其组合。
5、本公开内容的又一目的在于提供一种用于生产微生物的方法，其包括弱化本公开内容的蛋白质的活性。在一些实施方案中，该微生物是棒状杆菌属。
6、本公开内容的又一目的在于提供一种通过微生物提高l-谷氨酸产量的方法，包括弱化该微生物中的蛋白质的活性，该蛋白质包含与seq id no：1的氨基酸序列具有至少85％序列同一性的氨基酸序列。
7、专利技术的有益效果
8、本公开内容的其中蛋白质的活性减弱的生产l-谷氨酸的棒状杆菌属微生物可以以高产量生产l-谷氨酸，因此，可有利地用于l-谷氨酸的工业化生产。
9、实施本专利技术的最佳方式
10、本公开内容公开的每个描述和实施方案也可以适用于其他描述和实施方案。换言之，本公开内容公开的各种组件的所有组合都落入本申请的范围。此外，本申请的范围不限于下文的具体描述。此外，本领域技术人员仅使用常规实验即可理解或能够确定在本文所述的本申请具体方面的许多等同物。此外，这些等同物应被解释为落入本申请的范围内。
11、本公开内容的一个方面是提供一种微生物，其中蛋白质的活性减弱，该蛋白质包含与seq id no：1具有至少70％序列同一性的氨基酸序列。本公开内容的另一方面是提供一种表达重组蛋白的微生物，该重组蛋白包含与seq id no：1的氨基酸序列具有至少70％序列同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，该微生物是棒状杆菌属。
12、根据上述本公开内容的一些实施方案，该蛋白质可具有或包含seq id no：1所示的氨基酸序列，或由该氨基酸序列所组成，或基本上由该氨基酸序列组成。具体地，根据本公开内容的一些实施方案，该蛋白质可由seq id no：1的氨基酸序列所示的多肽组成。
13、seq id no：1的氨基酸序列可获自美国国家卫生院(national institutes ofhealth，nih)genbank，其是已知的数据库。在本公开内容中，seq id no：1的氨基酸序列可包含与seq id no：1所示的氨基酸序列具有至少70％、71％、72％、73％、74％、75％、76％、77％、78％、79％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、95.18％、96％、97％、98％、99％、99.5％、99.7％或99.9％的同源性或同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，上文所述的微生物的蛋白质可不包含seq idno：1。此外，显然地，具有其中一些序列被删除、修饰、取代、保守性取代或添加的氨基酸序列的蛋白质也包含在本公开内容的范围内，只要该氨基酸序列具有同源性或同一性，并且表现出相应于包含seq id no：1的氨基酸序列的蛋白质的效能。
14、其实例包括在n-末端、c-末端和/或在氨基酸序列中具有不改变根据本公开内容的一些实施方案的蛋白质的功能的序列添加或删除、天然发生的突变、沉默突变或保守性取代的情况。
15、术语“保守性取代”是指将氨基酸取代成具有相似结构和/或化学性质的另一种氨基酸。此类氨基酸取代通常可基于残基的极性、电荷、溶解性、疏水性、亲水性和/或两亲特性中的相似性而发生。通常，保守性取代可能对蛋白质或多肽的活性影响很小或没有影响。
16、如本文所使用，术语“同源性”或“同一性”是指两个给定的氨基酸序列或核苷酸序列之间的相似程度，并可以以百分比表示。术语“同源性”和“同一性”通常可以互换使用。
17、保守多核苷酸或多肽的序列同源性或同一性通过标准比对算法确定，并且通过程序建立的默认空位罚分可一起使用。基本上同源或相同的序列通常能够在中度或高度严格条件下与全部或部分序列杂交。显然地，杂交还包括与多核苷酸杂交，该多核苷酸包含多核苷酸中的共同密码子或考虑了密码子简并性的密码子。
18、例如，可使用已知的电脑算法确定任何两个多核苷酸或多肽序列是否具有同源性、相似性或同一性，例如使用默认参数的“fasta”程序，如pearson等人(1988)[proc.natl.acad.sci.usa 85]:2444中的。或者，可以使用needleman-wunsch算法确定同源性、相似性或同一性(needleman和wunsch,1970,j.mol.biol.48:443-453)，如在emboss包的needleman程序中所执行的(emboss:the european molecular biology opensoftware suite,rice等人,2000,trends genet.16:276-277)(5.0.0版本或更新版本)(包括gcg程序包(devereux,j.等人,nucleic acids research 12:387(1984),blastp,blastn,fasta(atschul,[s.][f.,][等人,j.mol.biol.215]:403(1990)；guide to hugecomputers,martin j.bishop,[ed.,]academic press,san diego,1994,和[car本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种微生物，其中蛋白质的活性与所述微生物的固有活性相比减弱，所述蛋白质包含与SEQ ID NO：1的氨基酸序列具有至少85％序列同一性的序列。
2.一种表达重组蛋白的微生物，所述重组蛋白包含与SEQ ID NO：1的氨基酸序列具有至少85％序列同一性的氨基酸序列。
3.根据权利要求1或2所述的微生物，其中棒状杆菌属的微生物具有L-谷氨酸的生产能力。
4.根据前述权利要求中任一项所述的微生物，其中所述蛋白质包含SEQ ID NO：1的氨基酸序列。
5.根据前述权利要求中任一项所述的微生物，其中所述蛋白质由包含SEQ ID NO：2的核苷酸序列的核苷酸分子编码。
6.根据前述权利要求中任一项所述的微生物，其中编码所述蛋白质的基因的表达控制序列不是所述微生物的固有序列。
7.根据前述权利要求中任一项所述的微生物，其中所述微生物是棒状杆菌属。
8.一种生产L-谷氨酸的方法，包括培养前述权利要求中任一项所述的微生物。
9.一种通过微生物提高L-谷氨酸产量的方法，所述方法包括弱化前述权利要求中
10.一种包含核酸序列的多核苷酸，所述核酸序列编码与SEQ ID NO：1的氨基酸序列具有至少85％序列同一性的氨基酸序列，其中所述多核苷酸在自然界中不存在。
11.以本申请所公开的一个或多个组件为特征的组合产品、工艺或系统的用途。
...【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种微生物，其中蛋白质的活性与所述微生物的固有活性相比减弱，所述蛋白质包含与seq id no：1的氨基酸序列具有至少85％序列同一性的序列。
2.一种表达重组蛋白的微生物，所述重组蛋白包含与seq id no：1的氨基酸序列具有至少85％序列同一性的氨基酸序列。
3.根据权利要求1或2所述的微生物，其中棒状杆菌属的微生物具有l-谷氨酸的生产能力。
4.根据前述权利要求中任一项所述的微生物，其中所述蛋白质包含seq id no：1的氨基酸序列。
5.根据前述权利要求中任一项所述的微生物，其中所述蛋白质由包含seq id no：2的核苷酸序列的核苷酸分子编码。
6.根据前述权利要求中任一项所述的微生物，其中编码所述蛋白...
【专利技术属性】
技术研发人员：权娜罗，奉贤珠，A·R·李，J·O·贺，
申请(专利权)人：CJ第一制糖株式会社，
类型：发明
国别省市：
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