一种从骨疏宁方中筛选抗氧化活性成分的方法技术

本发明专利技术公开了一种从骨疏宁方中筛选抗氧化活性成分的方法。该方法包括以下步骤：(1)样品在线提取：称取骨疏宁方样品粉末与二氧化硅混合物，将混合物填充于在线提取池，并通过六通阀接入液相色谱系统，用流动相进行在线梯度提取；(2)在线抗氧化分析：待测样品经HPLC分离后，与ABTS溶液在PEEK管中进行反应、混合，通过紫外检测器检测其抗氧化活性；(3)抗氧化活性成分质谱检测：采用HPLC‑Q‑TOF‑MS对在线提取的样品溶液进行质谱检测。本发明专利技术无须繁琐的分离纯化过程，可快速对骨疏宁方的抗氧化成分进行筛选和活性评价，色谱图峰型完整、美观，无拖尾现象；具有同时评估的“谱‑效”优点，为快速评价骨疏宁方提供了新的思路。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于抗氧化成分筛选，涉及一种从骨疏宁方中筛选抗氧化活性成分的方法。

技术介绍

1、老年人易发生骨折，通常认为激素水平失衡、钙和维生素d缺乏以及正常衰老等原因导致骨质疏松、增加了骨脆性。最近的研究表明，氧化应激可能是导致骨质疏松症中成骨细胞和破骨细胞功能分离的罪魁祸首，因此探索和分析药用植物和中药的抗氧化活性成分，对揭示抗骨质疏松的物质基础非常重要。

2、无论是中药还是天然药物均含有多酚、黄酮类等化合物，其中不乏具有抗氧化作用的化合物，为防治骨质疏松症提供了潜在目标物，从中药中发现天然抗氧化成分也已成为一个重要的发展方向。然而，传统的发现抗氧化成分方法是通过繁琐的分离纯化、结构鉴定工作，并分别验证其活性，具有耗时长、成本高、过程复杂、难以全面反映中药的活性特征等不足；基于在线提取、筛选、鉴别和评价的抗氧化成分筛选技术，具有灵敏、快速、无需分离纯化等特点，能从复杂的中药成分中快速灵敏的筛选出抗氧化活性成分。前期文献检索发现，在中药复方及制剂的在线提取、筛选、鉴别和评价抗氧化活性成分研究相对较少。因此，研究新型中药抗氧化活性成分的快速发现及本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种从骨疏宁方中筛选抗氧化活性成分的方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的从骨疏宁方中筛选抗氧化活性成分的方法，其特征在于，所述步骤(1)中骨疏宁方样品粉末与二氧化硅混合物为4～8mg。

3.根据权利要求2所述的从骨疏宁方中筛选抗氧化活性成分的方法，其特征在于，所述骨疏宁方样品粉末与二氧化硅之间的质量比为1:10～1:20。

4.根据权利要求1所述的从骨疏宁方中筛选抗氧化活性成分的方法，其特征在于，所述步骤(2)中，待测样品经HPLC分离后，与P230Ⅱ高压恒流泵泵出的ABTS溶液进行混合，并在1.0～3.0m×0.25μm的P...

【技术特征摘要】

1.一种从骨疏宁方中筛选抗氧化活性成分的方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的从骨疏宁方中筛选抗氧化活性成分的方法，其特征在于，所述步骤(1)中骨疏宁方样品粉末与二氧化硅混合物为4～8mg。

3.根据权利要求2所述的从骨疏宁方中筛选抗氧化活性成分的方法，其特征在于，所述骨疏宁方样品粉末与二氧化硅之间的质量比为1:10～1:20。

4.根据权利要求1所述的从骨疏宁方中筛选抗氧化活性成分的方法，其特征在于，所述步骤(2)中，待测样品经hplc分离后，与p230ⅱ高压恒流泵泵出的abts溶液进行混合，并在1.0～3.0m×0.25μm的peek管中进行反应，再进入紫外检测器，在600～750nm波长下检测其抗氧化活性。

5.根据权利要求4所述的从骨疏宁方中筛选抗氧化活性成分的方法，其特征在于，所述abts溶液的流速为0.3～0.6ml/min。

6.根据权利要求4或5所述的从骨疏宁方中筛选抗氧化活性成分的方法，其特征在于，所述abts溶液的制备：称取abts和过硫酸钾适量，用水溶解，配制终浓...

【专利技术属性】
技术研发人员：范卫锋，梁博伟，虞达欢，梁周，刘宇河，吴勇梅，何科，梁志敏，韦玉燕，梁考云，陈福瑶，
申请(专利权)人：玉林市中西医结合骨科医院，
类型：发明
国别省市：